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磷酸氟达拉滨对MUTZ-1细胞作用及机制研究被引量：1: 2006年; 目的:在体外研究磷酸氟达拉滨(fludarab ine)对人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞的作用以及可能的作用机制。方法:采用MTT法、透射电境、DNA凝胶电泳、流式细胞仪以及RT-PCR等分析方法。结果:磷酸氟达拉滨能抑制MUTZ-1细胞的生长,24、48、72 h的IC50分别为137.65 m g/L、6.27 m g/L、0.51 m g/L,具有浓度和时间依赖性。经透射电境、DNA凝胶电泳和A nnex inⅤ/P I检测,证实1~16 m g/L磷酸氟达拉滨对MUTZ-1细胞作用24 h后,可以诱导MUTZ-1细胞凋亡,其对Bcl-2、Bax、surv iv in、X IAP、cIAP1和cIAP2基因mRNA表达均无明显下调作用,但可以导致MUTZ-1细胞线粒体膜电位的下降。结论:1 m g/L^16 m g/L磷酸氟达拉滨不但能抑制MUTZ-1细胞生长而且能诱导细胞凋亡,诱导细胞凋亡是其主要细胞毒作用之一。线粒体膜电位下降是其诱导细胞凋亡的重要环节之一。; 吴文俊蔡真; 关键词：MUTZ-1细胞线粒体膜电位

survivin、XIAP在骨髓增生异常综合征患者及其细胞株MUTZ-1中的表达及意义被引量：27: 2004年; 目的　研究骨髓增生异常综合征 (MDS)患者及MDS RAEB细胞株MUTZ 1凋亡蛋白抑制因子survivin、XIAP的表达和高三尖杉酯碱 (HHT)诱导MUTZ 1细胞凋亡的作用机制。方法　以 4 7例初发MDS患者及 15名异基因骨髓移植志愿供者为研究对象 ,应用RT PCR方法检测survivin、XIAPmRNA表达 ;采用流式细胞术分析MDS RAEB细胞系MUTZ 1细胞凋亡和细胞周期变化 ,RT PCR技术检测survivin、XIAP在MUTZ 1中的表达 ;研究survivin反义寡脱氧核苷酸 (AS ODN)和HHT对细胞增殖、凋亡的影响。结果　MDS患者survivinmRNA总阳性率高于正常对照组 (分别为 38.3%和 0 ,P <0 .0 1) ,高危组 (RAEB、RAEB t、CMML)阳性率高于低危组 (分别为 5 3.6 %和 16 .7% ,P <0 .0 5 )。MDS患者及正常对照均表达XIAP ,但表达水平不同 ,其中低危组XIAPmRNA(0 .74± 0 .2 4 )低于正常对照组 (1.0 1±0 2 8) (P <0 .0 5 ) ,高危组XIAPmRNA表达 (1.5 5± 0 .34)高于低危组及正常对照组 (P值均 <0 .0 1)。HHT能诱导MUTZ 1细胞凋亡 ,凋亡率与作用浓度和时间呈正相关 ,细胞被阻滞在G2 期 ;HHT作用MUTZ 1细胞 6h后细胞内survivin表达下调 ,而XIAP表达无明显变化。survivinAS ODN能明显抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡 ,并提高MUTZ 1细胞对HHT的敏感性。结论　凋亡?; 蔡真包悍英Wolf-Dieter LudwigChristian Wuchter; 关键词：SURVIVIN基因 XIAP基因三尖杉酯碱

血液肿瘤细胞株细胞survivin基因表达以及ATRA对NB4细胞株survivin基因表达的调节被引量：18: 2004年; 目的 :检测survivin基因在血液肿瘤细胞株细胞的表达。方法 :应用RT -PCR法检测survivin基因mRNA表达。结果 :10种血液肿瘤细胞株和K5 6 2 /ADM细胞株细胞均有survivinmRNA表达 ,不同的血液肿瘤细胞株survivinmRNA表达有明显的差异性 ,K5 6 2 /ADM细胞株与K5 6 2细胞株细胞相比 ,survivinmRNA表达上调了 1.6倍。外周血单个核细胞survivinmRNA表达阴性。经ATRA处理后 ,NB4细胞survivinmRNA表达随着时间的延长而呈逐渐下降趋势 ,在 72h几乎检测不到survivinmRNA的表达。结论 :survivin基因在血液肿瘤细胞株中广泛表达 ,它是肿瘤细胞抗凋亡和耐药的重要机制之一 ,survivin基因有望成为肿瘤治疗新靶点。; 薛军林茂芳蔡真; 关键词：基因逆转录聚合酶链反应细胞系维甲酸

HHT诱导骨髓增生异常综合征细胞MUTZ-1凋亡过程中活性氧和线粒体膜电位的变化被引量：1: 2004年; 目的研究活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP)在高三尖杉酯碱(HHT)诱导骨髓增生异常综合征细胞MUTZ-1凋亡过程中的变化,以期进一步探讨HHT诱导细胞凋亡的机制。方法以100ng/mlHHT作用于MUTZ-1细胞一定时间后应用流式细胞仪,以AnnexinVFITC和PI双染的方法检测细胞凋亡率,ROS捕获剂HE反应法检测细胞内ROS的水平,JC-1染色法检测细胞MMP的变化。结果HHT作用MUTZ-1细胞0、6、12、24h后的凋亡率分别为5.68%±0.52%、16.88%±0.96%、43.75%±2.33%、55.48%±3.67%。在细胞凋亡的同时,细胞内ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01)。结论细胞内ROS水平升高和线粒体膜电位下降是HHT诱导MUTZ-1细胞凋亡的重要机制之一。; 吴文俊蔡真; 关键词：HHT 骨髓增生异常综合征 MUTZ-1 活性氧线粒体膜电位

survivin mRNA表达水平与高三尖杉酯碱诱导恶性血液病细胞凋亡的相关性研究被引量：4: 2006年; 目的:研究surv iv in mRNA在细胞株MUTZ-1、K 562、Jurkat、RPM I、HL 60的表达水平与高三尖杉酯碱(HHT)诱导的凋亡率的关系。方法:应用流式细胞仪技术,研究HHT诱导人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1、人急性红白血病细胞株K 562、人淋巴瘤细胞株Jurkat和人骨髓瘤细胞株RPM I,以及人急性粒细胞白血病细胞株HL 60细胞凋亡。用半定量逆转录酶-多聚酶链式反应,检测上述细胞株及HHT作用MUTZ-1细胞后凋亡蛋白抑制因子surv iv in、X IAP的表达。结果:细胞株MUTZ-1、K 562、Jurkat、RPM I、HL 60均表达surv iv in、X IAP mRNA,HHT能诱导各细胞株凋亡,HHT诱导的凋亡率与细胞株surv iv in mRNA表达呈负相关。结论:surv iv in在细胞中的表达水平可能直接影响细胞对化疗药物的敏感性,可作为预测细胞耐药的指标之一,同时也可能将成为肿瘤治疗的新靶向。; 包悍英蔡真; 关键词：MUTZ-1 细胞凋亡 XIAP 高三尖杉酯碱

骨髓凋亡蛋白抑制因子survivin检测在非霍奇金淋巴瘤中的临床意义被引量：2: 2007年; 目的探讨survivin mRNA在非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者骨髓中的表达及临床意义。方法多聚酶链反应(PCR)方法检测21例NHL患者骨髓单个核细胞(MNCs)中克隆性免疫球蛋白重链(IgH)、T细胞受体γ(TCRγ)基因重排。逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测21例NHL患者骨髓及7例术后实体癌患者的外周血单个核细胞的survivin mRNA的表达,12例正常骨髓作为正常对照。骨髓常规检查21例NHL患者淋巴瘤细胞骨髓浸润情况。结果克隆性IgH和(或)TCRγ基因重排在21例NHL患者中检出率为71.4%(15/21),其中IgH为52.4%(11/21),TCRγ为47.6%(10/21)。21例NHL患者survivin mRNA的阳性率为81.0%(17/21),7例术后实体癌患者的外周血单个核细胞仅有1例为弱阳性,12例正常骨髓单个核细胞不表达survivin mRNA。21例NHL患者骨髓常规检查的阳性率为19.0%(4/21)。其中,1例survivin mRNA检测阴性患者,克隆性IgH和(或)TCRγ基因重排阳性,而3例克隆性IgH和(或)TCRγ基因重排阴性患者,survivin mRNA检测阳性,其余病例均同时阴性或阳性。IgH和(或)TCRγ基因重排阳性与survivin mRNA表达存在正相关性。结论survivin mRNA在恶性淋巴瘤患者骨髓中的表达检测也可作为诊断微小残留病变及骨髓侵犯的辅助指标。而survivin mRNA表达与淋巴瘤患者疗效及生存预后关系尚待进一步累积病例及随访。; 包悍英王云贵沈朋方维佳张晓琛徐农蔡真; 关键词：SURVIVIN MRNA检测非霍奇金淋巴瘤凋亡蛋白抑制因子 TCRΓ基因重排逆转录-多聚酶链反应

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浙江省自然科学基金(302690)

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