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国家重点实验室开放基金(303060202400311)
作品数:
2
被引量:5
H指数:2
相关作者:
陈长征
李璐
邢怡桥
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抑制光损伤人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子A的表达对趋化因子受体3配体表达的影响
被引量:3
2015年
目的 观察抑制光损伤人视网膜色素上皮(RPE)细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达对趋化因子受体3(CCR3)配体嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)表达的影响.方法 体外培养人RPE细胞,取第8~12代生长良好的传代细胞用于实验.将同代细胞随机分为正常对照组、光照损伤组和光照干预组.采用波长400 nm的蓝色节能灯以(600±100) Lux持续光照RPE细胞12h建立光损伤模型,光照干预组采用0.125 mg/ml的VEGF-A受体拮抗剂雷珠单抗处理光损伤的RPE细胞;正常对照组以锡箔纸包裹细胞培养皿避光培养.结束光照24 h时,应用实时聚合酶链反应、酶联免疫吸附测定、蛋白免疫印迹法及免疫组织化学染色法检测3组细胞中VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3及核因子(NF)-κB的mRNA和蛋白表达情况.结果 光照损伤组VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3、NF-κB的mRNA和蛋白表达较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).光照干预组VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3、NF-κB的mRNA和蛋白表达较光照损伤组明显降低,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 抑制光损伤后人RPE细胞VEGF-A的表达可以下调CCR3配体eotaxin的表达,其机制可能与阻断转录因子NF-κB的激活有关.
潘颖喆
邢怡桥
陈长征
黎智
王慧
李璐
苏钰
关键词:
视网膜色素上皮
血管内皮生长因子A
光照对人视网膜色素上皮细胞趋化因子受体3配体的影响
被引量:2
2013年
目的观察光照后人视网膜色素上皮(RPE)细胞趋化因子受体3(CCR3)配体嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)-1、eotaxin-2、eotaxin-3的表达。方法体外培养人RPE细胞,取第5~10代生长状态良好的传代细胞用于实验。将同代细胞随机分为光照干预组与正常对照组。采用15w蓝色荧光灯自制光照器,以(600±100)Lux的强度对光照干预组细胞持续光照12h,对照组细胞采用双层高压消毒锡纸包裹。随后两组细胞均置于恒温培养箱内继续培养,并于光照结束后0、3、6、12、24h终止细胞培养。采用实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法分别检测eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白的表达。结果光照干预组细胞eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白表达均随培养时间延长呈上升趋势,其中eotaxin-3mRNA和蛋白表达增加最为明显。光照干预组与正常对照组比较,光照结束后0(t。=6.05,t。-12.561)、3(t1—2.95,t2—3.67)h时eotaxin-1、eotaxin-2mRNA表达间差异均有统计学意义(P〈0.05),eotaxin-3mRNA表达间差异无统计学意义(t3=1.57、1.OO,P〉0.05);光照结束后6(t1=4.73,t2=18.64,t3:28.48)、12(t1=3.11,t2=20.62,t3=18.50)、24(t1=8.25,t2=38.27,t3=18.60)h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA表达间差异均有统计学意义(P〈0.05)。光照干预组与正常对照组比较,除光照结束后3h时eotaxin-3蛋白表达间差异无统计学意义外(t3=1.28,P〉0.05);光照结束后0(t1=4.85,t2=5.45,t3=6.21)、3h(tl-5.64,t2=4.55)、6(t1=31.60,t2=6.63,t3=7.15)、12(t1=14.09,t2=18.22,t3=15.76)、24(t1=6.96,t2=10.47,t3=12.85)h时eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3蛋白表达间差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论光照后人RPE细胞CCR3配体eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3mRNA和蛋白表达均随培养时间延�
李璐
陈长征
易佐慧子
翁铭
邢怡桥
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光刺激
视网膜色素上皮
病理生理学
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CCR3
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