江苏省重点学科建设基金(SYC0703)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：胡秀彩吕爱军温洪宇张冬杰余为一更多>>
- 相关机构：徐州师范大学安徽农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省重点学科建设基金江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 牙鲆钙调素基因在原核和真核细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 设计特异引物,以SMARTcDNA为模板,应用PCR方法扩增牙鲆钙调素基因(Paralichthys olivaceus calmodulin,PoCaM)。计算机辅助分析表明,PoCaM基因编码149个氨基酸的推定蛋白,其分子量为17kD,等电点为3.93,含有4个螺旋-环-螺旋样结构,与其它鱼类CaM氨基酸一致性为97.3%-100%。构建原核表达重组质粒pET32a/PoCaM,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE蛋白电泳,结果显示PoCaM在大肠杆菌中进行了特异性融合表达,融合蛋白分子量约为34kD,与预期分子量大小一致。同时,以绿色荧光蛋白(GFP)为表达标签,构建真核表达重组质粒pEGFP-N3/PoCaM,经Lipofectamine 2000介导转染鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC),荧光显微镜观察显示,PoCaM在EPC细胞中进行瞬时表达,主要分布于细胞核及胞浆中。
- 吕爱军胡秀彩
- 关键词：牙鲆原核表达真核表达
- 水产动物致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定被引量：8
- 2008年
- 从病鳖和鱼体内分离到7株细菌(BA1、BA3、BA5、BA6、BA7、XA5、XA13),经形态学观察、生理生化特性和血清学鉴定,确定为嗜水气单胞菌。动物感染试验结果表明,BA1和BA3株为致病性嗜水气单胞菌,对鲫鱼的致死率分别为66.7%、100%。免疫电泳分析结果表明,致病性嗜水气单胞菌BA3株与非致病性BA6株之间存在共同抗原。
- 吕爱军胡秀彩李槿年余为一
- 关键词：水产动物嗜水气单胞菌
- 11株中度嗜盐菌的分离及生理生化特性研究被引量：10
- 2008年
- [目的]了解海产品、盐渍类食品中的中度嗜盐菌资源，探究其生理生化特性。[方法]对海产品、盐渍品样品进行分离纯化，获得11株中度嗜盐菌，对各菌株的形态进行观察，进行生理生化特征测试。[结果]11株中度嗜盐菌中7株为杆菌，其中JD6、HYD2、NY80和NY11革兰氏阳性，其他革兰氏阴性，JD6和JD910产生芽孢；4株为球菌，其中NY3和NY12革兰氏阳性，XH1和JH3革兰氏阴性。11株细菌在0～20％NaCl条件下生长，均分解葡萄糖产酸，产生过氧化氢酶、赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶，不产生H2s；菌株XBD1、XH1、NY3、JH3和NY12在TCBS与SS琼脂上均能生长，NY11和JD910在SS琼脂上生长。11株细菌对氨苄青霉素和青霉素不敏感，对利福平敏感。11株细菌对小鼠无致死性。[结论]该研究为合理开发利用嗜盐微生物资源提供了参考。
- 吕爱军胡秀彩张冬杰温洪宇
- 关键词：中度嗜盐菌生理生化特性
- 产色素温和气单胞菌的特性及其外膜蛋白型研究被引量：4
- 2008年
- [目的]研究产色素温和气单胞菌的致病机理。[方法]从不同来源的病鳖和病鳗体内分离到4株产生棕色色素温和气单胞菌,并采用平板法进行检测。[结果]对鲫鱼胸基部注射9×108cfu/ml菌悬液0.4ml后,BA10、BA15和BA16株对鲫鱼的致死率在33.3%以上,M1株对鲫鱼无致死性。采用超声波破碎-SI法提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳结果显示,4株温和气单胞菌的外膜蛋白相对分子质量范围在20.1～66.2kDa,其中1个鳗鱼分离株M1株属OMP1型,由8条主要蛋白带组成;其余3个鳖源分离株BA10、BA15和BA16株属OMP2型,由9条主要蛋白带组成。[结论]产色素与致病性无相关;4株产色素温和气单胞菌之间存在共同抗原;产色素温和气单胞菌的OMP型可能与菌株来源有关。
- 胡秀彩吕爱军陈宏
- 关键词：温和气单胞菌色素毒力因子共同抗原外膜蛋白型
- 赤点石斑鱼皮肤的体外培养
- 2008年
- 以赤点石斑鱼为材料，无菌操作剥离皮肤，并剪成大小为0．5—1．0cm的外植块，于25℃进行体外培养。观察结果显示，赤点石斑鱼皮肤外植块在含20％胎牛血清（FBS）的DMEM培养液中存在生长活性，3d后长出上皮样细胞，6。7d形成岛屿状细胞集落，12—14d长满呈“铺路石”状。研究结果表明，皮肤外植块在体外维持生长状态达30d以上，培养30d的悬浮细胞存活率为51．4％，提示皮肤上皮细胞状态良好。
- 吕爱军温洪宇胡秀彩
- 关键词：赤点石斑鱼皮肤体外培养
