辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2008403)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：罗美秦书俭马云胜刘树辉刘霞更多>>
- 相关机构：辽宁医学院锦州医科大学辽宁中医药大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脐血基质细胞生物学特性的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨人脐血基质细胞的生物学特性,为骨组织工程选择理想的种子细胞来源。方法:采用加入10%FBS、20ng/mlbFGF的L-DMEM培养基培养人脐静脉血基质细胞,以人骨髓基质细胞(BMSCs)做为对照。应用倒置显微镜观察细胞形态学特征,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期。同时原代细胞进行成骨诱导分化培养。碱性磷酸酶染色和Von-Kossa染色法检测成骨能力。结果:①人脐血基质细胞原代培养形态呈长梭形,需21～30d长满瓶底,传代后细胞增殖缓慢并逐渐死亡。②在成骨诱导培养基里,脐血基质细胞增殖速度减慢,诱导前后形态无明显改变。碱性磷酸酶染色:脐血基质细胞阳性率为46.0%。Von-Kossa染色提示脐血基质细胞成骨诱导后形成钙化结节。结论:脐血基质细胞增殖能力有限,较骨髓基质细胞难于培养,成骨诱导证实可以向成骨细胞分化。
- 马云胜罗美刘树辉秦书俭
- 关键词：脐血骨髓基质细胞诱导分化
- 人脐血CD29＋细胞向神经元样细胞转化
- 2010年
- 脐血中富含造血干细胞，一直以来被用于血液疾病的治疗，近年来人们发现脐血中含有少量的非造血干细胞的成分，表达骨髓间充质干细胞（MSC）的表型并可以分化为骨、软骨、神经等多种组织。但是由于没有好的获取该细胞的方法，
- 马云胜罗美穆长征秦书俭
- 关键词：细胞转化神经元样人脐血造血干细胞血液疾病
- 人脐血基质细胞的体外培养及向成骨细胞诱导分化被引量：1
- 2009年
- 背景:研究证实婴儿脐带血里含有类似骨髓间充质细胞的细胞,但在培养过程中其成功率很低且难度高。目的:拟在体外分离培养人脐血基质细胞,并观察其分化潜能。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-03/2008-06在辽宁医学院中心实验室完成。材料:健康足月新生儿脐带血12份,每份30～60mL,由锦州市妇婴医院提供。方法:取采集的脐带血,使用淋巴细胞分离液离心后取界面上的白色混浊状细胞层,加入含体积分数为10%胎牛血清、20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、0.3g/LL-谷胺酰胺、100U/mL青霉素和100g/L链霉素的L-DMEM培养液悬浮细胞,按2×109L-1密度接种于25cm2培养瓶中,待细胞达70%汇合时消化传代。取处于对数生长期的脐血基质细胞,将其培养基更换为含有地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C、体积分数为10%胎牛血清的L-DMEM培养基成骨诱导21～30d。主要观察指标:倒置显微镜观察细胞形态学特征,描绘生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,碱性磷酸酶染色和Von-Kossa染色检测成骨能力。结果:原代培养的人脐血基质细胞呈长梭形,需21～30d长满瓶底,传代后细胞增殖缓慢并逐渐死亡,细胞平均倍增时间为42h,处于G0/G1期的细胞达(86.54±2.31)%。在成骨诱导培养基里,脐血基质细胞增殖速度减慢,细胞形态无明显变化,成骨诱导14d后碱性磷酸酶阳性率为(46.0±2.1)%,成骨诱导21d形成钙化结节。结论:应用体积分数为10%胎牛血清、20μg/L碱性成纤维细胞生长因子的L-DMEM培养液可在体外成功分离培养出人脐血基质细胞,但细胞增殖能力有限,诱导后可向成骨细胞方向分化。
- 刘霞马云胜罗美秦书俭
- 关键词：体外培养成骨
