中国博士后科学基金(X90203)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：李晓谢幸程琪汪辉黄亚非更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属妇产科医院华中科技大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金浙江省医药卫生优秀青年科技人才专项科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卵巢癌细胞诱导的CD8^+ T细胞凋亡与Caspase-3活性及细胞内钙的关系
- 2007年
- 目的探讨卵巢癌细胞诱导CD8+T细胞发生凋亡,及Caspase-3与细胞内游离钙离子在CD8+T细胞凋亡过程中的作用。方法分别采用透射电镜、流式细胞术观察3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)的培养上清液诱导的CD8+T细胞凋亡和细胞周期变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法和比色法检测CD8+T细胞Caspase-3mRNA的表达和Caspase-3活性;Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)。结果经3株卵巢癌细胞的培养上清液分别作用后,CD8+T细胞被阻滞在G1/G0期,电镜下出现典型的凋亡改变,流式细胞仪检测见凋亡峰,细胞凋亡率增高;CD8+T细胞凋亡过程中Caspase-3mRNA的表达水平、Caspase-3的活性和[Ca2+]i均明显升高。结论卵巢癌细胞能诱导CD8+T细胞凋亡,Caspase-3激活及细胞内钙超载在此过程中起重要作用。
- 汪辉黄亚非李天李晓程琪谢幸
- 关键词：卵巢癌细胞凋亡
- 卵巢癌细胞诱导T淋巴细胞凋亡的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨卵巢癌细胞诱导T淋巴细胞凋亡及一氧化氮与细胞内游离钙离子在T淋巴细胞凋亡过程中的作用。方法 分别采用电子显微镜、流式细胞仪观察 3个卵巢癌细胞株 (OVCAR3、CAOV3和SKOV3 )的培养上清液诱导的CD+ 8T淋巴细胞的凋亡 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)mRNA的表达 ;Fura 2荧光负荷技术和酶联免疫 (EIA)法分别检测细胞内游离钙离子浓度 ( [Ca2 + ]i)和环鸟苷酸 (cGMP)浓度。结果 ( 1)分别经卵巢癌细胞株OVCAR3、CAOV3和SKOV3细胞培养的上清液作用后 ,CD+ 8T淋巴细胞出现典型的凋亡改变 ,即染色质固缩和片段化 ;流式细胞仪上见凋亡峰 ;细胞凋亡率 [分别为 ( 2 3 8± 3 5) % ,( 2 3 1± 2 9) %、( 2 4 2± 4 9) % ]较对照 [( 4 6± 0 5) % ]明显增高 (P <0 0 1) ;( 2 )CD+ 8T淋巴细胞凋亡过程中iNOSmRNA的表达 (分别为 1 14± 0 0 3 ,1 0 5± 0 0 4,1 16± 0 0 2 )较对照 ( 0 60± 0 0 3 )显著增高 (P <0 0 1) ;细胞内游离 [Ca2 + ]i[分别为 ( 3 80± 3 8)、( 3 66± 13 )、( 3 56± 2 0 )nmol L]和cGMP浓度 [分别为 ( 0 65± 0 0 9)、( 0 62± 0 16)、( 0 57± 0 12 )pmol ml]均较对照 [分别为 ( 184± 11)nmol L、( 0 2 9± 0 0
- 汪辉李晓谢幸吕卫国叶大风陈怀增程琪
- 关键词：卵巢癌细胞诱导T淋巴细胞细胞凋亡一氧化氮合成酶
- 卵巢癌细胞对T细胞信号转导途径JAK-STAT的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 通过研究卵巢癌细胞对T细胞信号转导途径JAK STAT的影响 ,探讨其在卵巢癌免疫抑制中的作用。方法 分别采用MTT、流式细胞术、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法观察 3株卵巢癌细胞 (OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液对CD8+ T细胞增殖和细胞周期及分泌细胞因子的影响 ;运用Western印迹方法检测在卵巢癌细胞培养上清液作用后CD8+ T细胞中JAK1、JAK3蛋白的表达和STAT3、STAT5的活化状态。结果 (1 ) 3株卵巢癌细胞培养上清液皆能抑制CD8+ T细胞增殖 ,并使其阻滞在G1 /G0 期 ,分泌的细胞因子IFN γ显著降低 ,而白细胞介素 (IL) 1 0显著增高 ;(2 )与对照组比较 ,OVCAR3、CAOV3和SKOV3细胞培养上清液均能抑制CD8+ T细胞中JAK3的表达 ,JAK3蛋白平均吸光度 (A)值分别为 0 396± 0 0 1 2 ;0 40 0± 0 0 1 0 ;0 41 6± 0 0 1 5 ;0 656± 0 0 1 5 ;STAT5的活化也明显受抑 ,STAT5蛋白平均A值分别为 0 2 2 0± 0 0 1 0 ;0 2 1 6±0 0 0 5 ;0 2 2 3± 0 0 0 6 ;0 390± 0 0 0 1 ;对JAK1的表达无影响 ,只有OVCAR3细胞培养上清液使STAT3的活化受抑 (0 2 1 0± 0 0 1 0 ;0 393± 0 0 0 7)。结论 卵巢癌能抑制CD8+ T细胞信号转导途径JAK STAT的活化 ,从而抑制其增殖与活化 ,这可能是卵巢癌?
- 汪辉谢幸吕卫国叶大风陈怀增李晓程琪
- 关键词：卵巢癌信号转导途径免疫抑制肿瘤微环境
- 卵巢癌细胞对CD8^+ T细胞活化分子CD69表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨卵巢癌细胞对CD8+T细胞活化分子CD69表达的影响。方法:采用流式细胞术检测3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液对CD8+T细胞表达早期活化分子CD69表达的百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN-γ的水平。结果:与对照组比较,3株卵巢癌细胞培养上清液可对CD8+T细胞CD69的表达产生明显的抑制作用(F=29.90,P<0.01),CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN-γ水平显著降低(F=16.31,P<0.01)。结论:卵巢癌细胞早期就能抑制CD8+T细胞的活化,CD69可作为评价免疫效应细胞功能的指标。
- 汪辉黄亚非李天李晓程琪谢幸
- 关键词：卵巢癌CD69活化
- 卵巢癌细胞对CD8^＋T细胞ζ链表达及分泌Tc1／Tc2型细胞因子的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:通过研究卵巢癌细胞对CD8+ T细胞ζ链表达及分泌Tc1/Tc2型细胞因子影响,探讨其在卵巢癌免疫抑制中的作用。方法:Western印迹方法检测3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液作用后CD8+ T细胞ζ链蛋白的表达;分别采用MTT、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察卵巢癌细胞培养上清液对CD8+ T细胞增殖和分泌Tc1/Tc2型细胞因子的影响。结果:(1)与对照组比较,OVCAR3、CAOV3和SK-OV3细胞培养上清液均能抑制CD8+ T细胞中ζ链的表达,ζ链蛋白平均吸光度值分别为(0.346±0.004;0.349±0.007;0.387±0.011;0.616±0.013);(2)3株卵巢癌细胞培养上清液皆抑制CD8+ T细胞增殖,分泌的Tc1细胞因子IFN-γ显著降低,而Tc2细胞因子IL-10显著增高。结论:卵巢癌细胞源性的免疫抑制因子通过下调CD8+ T细胞ζ链的表达,从而抑制其增殖并导致Tc1/Tc2细胞因子分泌失衡,这可能是卵巢癌诱导腹腔免疫抑制的机制之一。
- 汪辉黄亚非李天李晓程琪谢幸
- 关键词：卵巢肿瘤免疫抑制CD8^+T细胞
