国家自然科学基金(81000176)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- TGF-β ⅡR单链抗体／轻链恒定区／鱼精蛋白截短体融合蛋白携带miR-29b抗肝纤维化的研究
- 2012年
- 目的观察TGF-β ⅡR单链抗体／轻链恒定区／鱼精蛋白截短体融合蛋白（简称新型载体）携带miR-29b对体外培养肝星状细胞（HSC）的转染效率和治疗效果，为今后肝纤维化基因治疗提供新裁体。方法脂质体、新型载体和慢病毒携带miR-29b治疗体外培养的HSC，荧光显微镜和流式细胞术观察转染效率，实时荧光定量RT-PCR和WesternBlot技术分析collagen αl（I）mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较，慢病毒组的转染效率最高，为70％；其次为新型载体组，为58％；最后为脂质体组，为29％。各载体组collagen αl（I）mRNA表现出不同的下降，与对照组比较，慢病毒组下降70％（t=6．316，P〈0．01），新型载体组为50％（t=4．082，P〈0．01），脂质体组为38％（t=3．014，P〈0．05）。各载体组collagen αl（I）蛋白也表现出不同的下降，慢病毒组下降为59％（t=4．209，P〈0．01）；新型载体组为41％（t=4．033，P〈0．01；）；脂质体组为27％（t=2．842，P〈0．05）。结论笔者构建的新型载体具有较高的转染效率，并且携带miR-29b具有较好的抗肝纤维化效果。
- 俞富军郑建建高申孟董培红
- 关键词：鱼精蛋白类遗传学重组融合蛋白质类遗传学微RNAS
- 脂联素抑制大鼠肝星状细胞株HSC-T6的Ⅲ型前胶原和透明质酸的表达被引量：2
- 2011年
- 目的 观察脂联素对肝星状细胞（HSCs）分泌结缔组织生长因子（CTGF）的影响,并观察Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、透明质酸（HA）含量的变化.方法 把大鼠HSCs分成5组,其中4组分别加入不同浓度的脂联素,另外1组作对照.通过RT-PCR和Western Blot技术分析CTGF mRNA和蛋白表达水平,ELISA法检测上清液PCⅢ、HA含量.结果 与对照组比较,A、B、C、D组脂联素HSCs内CTGF mRNA表达均下降,吸光度比值分别为1.54±0.18、1.21±0.14、0.96±0.10、0.79±0.08,其中以D组下降最明显（t=2.42,P＜0.05;t=2.73,P＜0.05;t=3.28,P＜0.01;t=4.67,P＜0.01）;CTGF蛋白表达也抑制,积分吸光度比值分别为1.54±0.18、1.21±0.14、0.96±0.10、0.79±0.08,其中以D组抑制最明显（t=2.84,P＜0.01;t=4.05,P＜0.01;t=6.25,P＜0.01;t=9.72,P＜0.01）;上清液PCⅢ、HA含量也下降,随脂联素浓度增加,下降越明显.结论 脂联素能够抑制HSCs分泌PCⅢ、HA;脂联素可通过抑制HSCs内CTGF表达而发挥抗纤维化作用.
- 俞富军董培红范栩妃陈永平李骥
