国家教育部博士点基金(20060487066)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：曾甫清王竞汪良蒋国松杜岳峰更多>>
- 相关机构：华中科技大学长江大学附属第一医院华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人工合成拟Smac多肽增强膀胱癌细胞化疗敏感性的实验研究
- 2008年
- 背景与目的:Smac是目前发现的惟一能直接同时抑制多个IAPs家族成员活性的凋亡相关蛋白,其N端的4个氨基酸残基AVPI(Ala-Val-Pro-Ile)是重要的促凋亡结构域,我们通过人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacN7,探讨其对膀胱癌化疗药物敏感性的促进作用。方法:噻唑蓝(MTT)检测SmacN7融合多肽对低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导的膀胱癌T24细胞的相对存活率的影响:Annexin V/PI双标流式细胞术检测T24细胞的凋亡1;Western印迹检测SmacN7融合多肽与MMC联用后T24细胞内XIAP、Caspase-3的表达;同时检测Caspase-3活性及SmacN7融合多肽与MMC联用对T24细胞的杀伤作用。结果:SmacN7融合多肽能穿透细胞并与内源性XIAP结合,增加低剂量MMC诱导的T24细胞凋亡并呈时间和浓度依赖性:并能显著降低细胞内XIAP的表达水平,增强Caspase-3的表达及活性:在24 h和48 h,SmacN7+MMC组与单用MMCtg相比,T24细胞的存活率分别降低55%和72.7%。结论:人工合成可穿透细胞的促凋亡融合多肽SmacNT能促进化疗药物诱导的膀胱癌T24细胞凋亡,抑制细胞增殖,增强膀胱癌细胞对MMC的化疗药物敏感性。
- 曾甫清王竞汪良蒋国松
- 关键词：SMAC/DIABLO合成肽膀胱癌化疗敏感性
- 拟Smac合成肽羧甲基壳聚糖磁性纳米复合物的制备及体外抗肿瘤性能研究被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨拟Smac合成肽羧甲基壳聚糖磁性纳米复合物的制备及联合恒定外磁场体外对膀胱癌细胞的凋亡促进作用。方法:以羧甲基壳聚糖为骨架与具有超顺磁性的Fe3O4纳米粒合成纳米载体粒子,将拟Smac合成肽SmacN7与其结合,制备拟Smac合成肽羧甲基壳聚糖磁性纳米复合物,并通过透射电镜、振动样磁强计等考察其理化性质;Hoechst33258染色观察外加磁场下纳米复合物诱导膀胱癌T24细胞凋亡的形态,MTT比色分析法观察其对肿瘤细胞的生长抑制作用。结果:拟Smac合成肽羧甲基壳聚糖磁性纳米粒子的粒径约为46.2nm;磁化曲线提示具有超顺磁性;载药量和包封率分别为(31.8±3.6)%和(65.2±2.4)%并具有良好的药物控释性能;外加磁场下磁性纳米粒子能使肿瘤细胞呈现明显的凋亡形态改变并表现出显著的生长抑制活性。结论:拟Smac合成肽羧甲基壳聚糖磁性纳米复合物具有粒径小、较强的磁响应性、载药量和包封率高和良好的药物缓释性能,联合恒定外磁场具有明显的促进肿瘤细胞凋亡的作用,为膀胱肿瘤的生物治疗提供了新的切入点。
- 王竞曾甫清汪良蒋国松黄慧汪涛潘晖
- 关键词：SMAC合成肽凋亡
- 拟Smac促凋亡多肽的合成及其生物活性的初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨拟Smac多肽的合成及其对膀胱癌细胞的促凋亡生物活性。方法应用固相多肽合成技术,合成具有细胞膜穿透性SmacN7融合多肽,经RP-HPLC纯化、纯度分析,用质谱仪定性鉴定;通过荧光显微镜观察细胞凋亡形态、细胞增殖抑制率测定及流式细胞仪分析,研究其对低剂量丝裂霉素C诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡促进作用。结果可穿透性融合多肽SmacN7产物峰纯度达95%以上,分子量为3278.08,质谱鉴定结果与合成预期结果完全一致;50～500μg/LSmacN7作用12～48h,肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变;随着SmacN7浓度的增加或作用时间的延长,细胞增殖抑制率出现明显增加,药物作用12h、24h、48h后增殖抑制率分别为(9.62±1.07)%～(61.48±1.15)%、(24.17±1.02)%～(72.86±1.68)%、(43.24±1.15)%～(84.91±1.74)%;肿瘤细胞凋亡率也明显增加,分别为(6.12±1.16)%～(49.81±2.11)%、(13.47±1.15)%～(64.54±2.27)%、(28.91±1.08)%～(82.36±2.19)%。结论固相合成的拟Smac融合多肽SmacN7为高纯度的目的肽,能够稳定地转入细胞内且利用率高,并有明显促进低剂量丝裂霉素C诱导的膀胱癌T24细胞凋亡的生物活性,为进一步研究膀胱肿瘤的生物治疗积累了有价值的资料。
- 王竞曾甫清汪良蒋国松廖贵益杜岳峰
- 关键词：SMAC固相合成生物活性
- 人工合成拟Smac融合多肽促低剂量丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡的研究
- 2007年
- 目的：探讨人工合成拟Smac融合多肽（SmacN7）对低剂量丝裂霉素C（MMC）诱导的膀胱癌T24细胞凋亡的促进作用。方法：运用固相多肽合成技术人工合成SmacN7细胞可穿透性融合多肽，将0．05mg／ml MMC诱导的膀胱癌T24细胞与50～500μg／L的SmacN7融合多肽共同孵育4～48h，采用Annexin—V荧光染色技术检测肿瘤细胞凋亡情况；应用流式细胞术和MTT比色法检测诱导后T24细胞凋亡率、增殖抑制率与SmacN7的时间和浓度的效应关系。结果：50-500μg／L SmacN7作用4～48h，肿瘤细胞出现典型的凋亡形态学改变，随着SmacN7浓度的增加或药物作用时间的延长，肿瘤细胞凋亡率也增加，12h为5．67％～56．12％，24h为14．54％～65．24％，48h为31．48％～87．23％，同时细胞增殖抑制率出现明显增加，药物作用12h、24h、48h后，增殖抑制率分别为9．58％～63．42％、28．94％～72．3％、44．7％～87．12％。结论：SmacN7能够有效地促进低剂量MMC诱导的膀胱癌T24细胞凋亡，并具有时间和浓度依赖性，为膀胱肿瘤的生物治疗提供了新思路。
- 王竞曾甫清汪良杜岳峰廖贵益
- 关键词：膀胱肿瘤SMAC蛋白合成肽
