福建省自然科学基金(C0310022)
- 作品数:4 被引量:23H指数:3
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- 神经营养因子对培养不同时间的大鼠神经干细胞的定向诱导分化被引量:7
- 2006年
- 采用BDNF、GDNF、PDGF和forskolin对培养不同时间的大鼠脑神经干细胞(NSC)进行诱导分化,通过免疫荧光染色观察这些诱导剂对NSC分化为神经元的作用,以RTPCR和Westernblot检测体外培养不同时间的NSC表达TrkB受体的水平,探讨它与NSC诱导分化反应性的关系。结果表明,各种神经营养因子诱导的MAP2阳性细胞数均高于未加神经营养因子的对照组(P<0.001)。在所使用的神经营养因子中,以BDNF促进NSC分化成神经元的效果为著,MAP2阳性细胞数约为空白对照组的6倍。而体外培养3个月的NSC单用BDNF诱导分化后未见MAP2阳性细胞,仅在联合使用BDNF和forskolin时方可诱导出少数MAP2阳性细胞。RTPCR和Westernblot检测结果显示,体外培养3个月的NSC表达TrkB受体的mRNA及蛋白的量较培养1个月的NSC减少3倍,提示培养3个月的NSC对BDNF诱导反应性的减弱可能与TrkB受体表达下调有关。
- 林玲郑志竑胡建石蔡良知林建银
- 关键词:神经干细胞分化神经营养因子
- 脑源性神经营养因子对神经干细胞的体外定向分化及体内移植的影响被引量:7
- 2006年
- 目的 了解体外培养的大鼠脑神经干细胞植入正常成鼠脑内后的存活、迁移和分化情况,以及脑源性神经营养因子(BDNF)对其影响。方法 从出生2~3d的大鼠脑皮质分离培养神经干细胞,采用BDNF诱导分化后,用免疫荧光染色鉴定神经元的数量。将培养的神经干细胞经溴脱氧尿苷(BrdU)标记,或同时加用BDNF后,移植入成鼠大脑皮质,移植1个月后,应用抗BrdU和抗β-ptubulin Ⅲ双重免疫荧光染色,对脑切片中细胞分化和迁移情况进行分析。结果 植入的神经干细胞可在大脑皮质发生迁移,个别移植的细胞可分化成神经元。体外诱导分化实验中,神经干细胞经BDNF诱导3d后,其分化成神经元的数量约为对照组的5倍。在神经干细胞脑内移植时,加用BDNF发生迁移的神经干细胞的数量较未加BDNF的增多,但神经干细胞分化成神经元的数量与未加BDNF对比无明显差别。结论 体外培养的新生大鼠脑神经干细胞植入正常成鼠脑内后,能够存活、迁移及分化,BDNF有助于移植的神经干细胞的存活和迁移。
- 林玲郑志竑胡建石蔡良知林建银
- 关键词:干细胞细胞分化神经系统脑源性神经营养因子
- 脑微透析探针置入对透析样品的影响被引量:9
- 2008年
- 目的探讨微透析探针置入的刺激对大鼠纹状体内谷氨酸水平的影响。方法通过初次和二次置入微透析探针至大鼠纹状体并收集脑微透析液,结合高效液相色谱法检测透析液谷氨酸水平。结果探针初次置入纹状体谷氨酸水平立即升高约30倍,3h后降至基础值;二次置入时谷氨酸仅升高约15倍,1h后即降至基础值。结论微透析探针置入的刺激可引起大鼠纹状体内谷氨酸水平短暂增高,在脑微透析检测谷氨酸样品时应注意探针置入的影响。
- 郑瑜宏林玲郑志竑
- 关键词:微透析谷氨酸高效液相色谱
- 大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化和脑内定位移植被引量:1
- 2005年
- 目的了解骨髓基质细胞(MSC)在体外对抗氧化剂和生长因子等的反应及其脑内移植后的情况。方法体外培养成年大鼠MSC,用β巯基乙醇、BDNF、GDNF、CNTF、forskolin诱导分化,并将MSC植入成鼠大脑皮质,观察MSC在体内外环境中是否能够分化为神经细胞。采用流式细胞术鉴定MSC,免疫荧光染色法鉴定神经细胞。结果在本实验条件下,MSC未见被诱导成神经细胞,植入脑内的MSC能够存活并迁移,但也未见分化为神经细胞。结论MSC横向分化为神经细胞可能是多因素作用的结果,需要更多的实验对其横向分化和定向分化进行探索。
- 林玲郑志竑胡建石林建银
- 关键词:神经细胞