病毒学国家重点实验室开放研究基金(2007001)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 黑胸大蠊浓核病毒NS2蛋白的表达、抗体制备及亚细胞定位被引量：4
- 2009年
- ns2是黑胸大蠊浓核病毒的一个非结构基因,所编码的蛋白质大小为30kD,是一个功能未知的基因。为了对该基因进行深入的功能研究,从感染了黑胸大蠊浓核病毒的蟑螂的后肠组织中通过RT-PCR得到ns2基因编码序列,将其构建于原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得融合表达产物。此融合蛋白经分离纯化后,免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体。采用Western印迹技术,用该抗体检测ns2基因的真核表达产物,证明该抗体有较好的针对NS2蛋白的专一性,可用于对NS2结构和功能的研究。同时,将此编码序列克隆至果蝇细胞表达载体pAC,得到重组质粒后转染果蝇S2细胞表达重组蛋白,通过共聚焦显微镜用该抗体检测该蛋白在S2细胞中的亚细胞定位,发现NS2蛋白主要定位于细胞质,核内仅有少量分布。
- 杨波余沛然蔡大威董晓敏刘志刚胡征张珈敏胡远扬
- 关键词：黑胸大蠊浓核病毒亚细胞定位
