湖北省青年杰出人才基金(QJX2010-31)
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 激活蛋白-2转录因子在乳腺癌中的作用
- 2012年
- 激活蛋白-2(AP-2)转录因子家族包括AP-2α、β、γ、δ和ε5个成员,在调节细胞增殖、分化和凋亡以及哺乳动物的胚胎发育中起到重要作用;近年研究发现激活蛋白-2与乳腺癌的发生相关,至少3个AP-2家族成员AP-2α、AP-2β和A P-2γ在乳腺癌中表达;抑制癌基因P53和WWox、转录共激活物、癌基因HER2的表达、以及AP-2蛋白质的翻译后修饰都参与调控AP-2在乳腺癌中的作用。
- 黄前川曹军皓
- 关键词：激活蛋白-2乳腺癌
- hAP-2α转录因子酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活检测
- 2012年
- 目的构建hAP-2α转录因子酵母双杂交诱饵载体,检测hAP-2α转录因子在酵母双杂交中的表达及对报告基因有无激活作用,为进一步研究乳腺癌中hAP-2α转录因子相互作用蛋白的作用机制奠定基础。方法通过RT-PCR方法从Hela细胞克隆hAP-2α基因,SalI和EcoRI双酶切后连接诱饵载体pGBKT7,获得诱饵质粒pGBKT7-hAP2α,经测序鉴定后与酵母双杂交空质粒pGBKT7转化到酵母菌株AH109,在营养缺陷培养基中观察pGBKT7-hAP2α的自激活作用,同时利用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达。结果成功扩增人乳腺癌hAP-2α基因,并准确克隆入pGBKT7中,诱饵载体pGBKT7-hAP2α成功转化到酵母菌株AH109中,经表型筛选检测无自激活作用,蛋白印迹法检测证实pGBKT7-hAP2α在酵母细胞中表达诱饵蛋白hAP2α。结论成功构建酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-hAP2α,诱饵质粒pGBKT7-hAP2α无自激活活性,可用于研究乳腺癌或其他疾病中与hAP-2α蛋白的相互作用分子。
- 黄前川杨长亮曹军皓丁进亚
- 关键词：诱饵载体酵母双杂交自激活作用
- 雌激素膜受体-α信号通路与乳腺癌的相关性被引量：2
- 2016年
- 雌激素受体α和β是一类转录因子，产生多种生理功能，雌激素受体α和β调控靶基因转录是配体依赖性的，然而，近来研究表明雌激素受体仅还存在另外一条信号途径，也称作非基因组或膜启动途径，能够快速地被雌激素激活，这种雌激素受体α位于细胞膜，因此也称作膜雌激素受体α，已经报道膜雌激素受体α与多种肿瘤的发生相关，本文阐述了近年来雌激素受体α的研究成果以及与乳腺癌的相关性。
- 黄前川丁进亚王萍
- 关键词：乳腺癌
- Ku70去泛素化与乳腺癌转录激活因子2α稳定相关性研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨Ku70去泛素化与乳腺癌中转录激活因子2α(activatior protein 2α,AP-2α)蛋白稳定性增高的相关性。方法脉冲追踪技术分析AP-2α稳定性;免疫共沉淀验证AP-2α和Ku70在细胞内的相互作用;蛋白质印迹法检测蛋白酶体抑制剂MG132对乳腺癌和正常乳腺上皮细胞中AP-2α泛素化水平的影响;蛋白质印迹法检测乳腺癌组织标本中AP-2α及其泛素化水平;通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制Ku70的表达,观察乳腺癌细胞中AP-2α泛素化、AP-2α和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER-2)蛋白水平的变化。结果脉冲追踪结果显示,乳腺癌细胞系中AP-2α的蛋白半衰期32h,而正常乳腺上皮细胞仅2h,说明乳腺癌细胞系中AP-2α的蛋白稳定性增高;免疫共沉淀证实AP-2α和Ku70蛋白细胞内存在相互作用;蛋白质印迹检测显示,MG132提高正常乳腺上皮细胞AP-2α泛素化水平,但对乳腺癌细胞AP-2α的泛素化作用不明显;蛋白质印迹检测乳腺癌组织标本中AP-2α泛素化水平与其蛋白水平成负相关;siRNA抑制Ku70表达可以促进乳腺癌细胞中AP-2α泛素化,Spearman等级相关系数为-0.917,P<0.05;AP-2α及其靶基因HER-2的蛋白水平随处理时间增加而显著下降,Spearman等级相关系数为0.989,P=0.011。结论 Ku70可抑制乳腺癌转录因子AP-2α泛素化降解,稳定性增高的AP-2α在乳腺癌中呈高表达,从而激活癌基因HER-2。
- 黄前川曹军皓丁进亚
- 关键词：乳腺肿瘤KU70泛素化人表皮生长因子受体2
