河北省自然科学基金(301351)
- 作品数：13 被引量：47H指数：4
- 相关作者：刘江惠郭建文左连富谷振勇丛斌更多>>
- 相关机构：河北医科大学河北医科大学第四医院中国医学科学院更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金教育部科学技术研究重点项目“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CCK-8调节LPS诱导大鼠血管平滑肌细胞iNOS表达的分子机制被引量：3
- 2006年
- 目的观察硫酸化八肽胆囊收缩素(CCK-8)对体外脂多糖(LPS)诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞(TASMCs) iNOS表达的影响,探讨CCK的受体介导效应,以揭示CCK-8抗休克作用的分子机制。方法采用贴块法培养大鼠TASMCs,经LPs、CCK-8、CR-1409、CR-2945、CCK+LPS、CCK+LPs+CR-1409、CCK+LPS+CR-2945及溶剂孵育细胞16 h,RT-PCR技术检测细胞浆iNOs mRNA的表达；Western blot技术检测胞浆iNOS蛋白表达,以光密度值表示其相对含量。结果LPS(0．1mg/L)可诱导TASMCs iNOS mRNA及蛋白的表达上调(P＜0．01)；而CCK-8(10^(-8)mol/L)可抑制LPS的诱导作用(P＜0．01)；预先给子CCK-AR特异性拮抗药CR-1409(10^(-5)mol/L)、CCK-BR特异性拮抗药CR-2945(10^(-5) mol/L),均可部分拮抗CCK-8的这种抑制作用,其中CR-1409的拮抗作用略高于CR-2945：CCK-8、CR-1409、CR- 2945单独作用与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。结论CCK-8受体介导了其对LPS诱导的胸主动脉平滑肌细胞iNOs的表达的抑制,且CCK-AR的作用略高于CCK-BR,此为CCK-8抗内毒素休克作用的受体机制。
- 马丽琴谷振勇董国凯李娜马春玲丛斌凌亦凌
- 关键词：八肽胆囊收缩素特异性拮抗剂胸主动脉平滑肌细胞
- 八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导ECV-304一氧化氮合酶表达的分子抑制作用
- 2006年
- 目的探讨CCK-8抑制LPS诱导ECV-304 iNOS表达的分子机制。方法培养ECV-304,用溶剂、CCK-8、LPS及CCK受体拮抗剂丙谷胺分别或联合孵育细胞,用W estern b lot检测iNOS蛋白表达,用免疫细胞化学方法检测NF-κB P65蛋白表达与核移位,用RT-PCR检测CCK-AR和CCK-BR mRNA表达。结果①溶剂对照组ECV-304 iNOS蛋白呈低表达;LPS诱导iNOS表达明显上调,CCK-8剂量依赖性抑制LPS的作用,单独CCK-8对其无影响。②ECV-304存在CCK-AR和CCK-BR mRNA表达,其中CCK-BR mRNA表达稍强。LPS可诱导CCK-AR和CCK-BR mRNA表达明显增强。③溶剂对照组NF-κB P65蛋白主要分布于细胞质;LPS孵育1 h后细胞核中NF-κB P65表达明显增加,CCK-8剂量依赖性抑制LPS的作用;单独CCK-8对其无影响。④丙谷胺可翻转CCK-8的抑制作用。结论ECV-304存在CCK-AR和CCK-BR mRNA表达;CCK受体和NF-κB参与介导CCK-8抑制LPS诱导ECV-304 iNOS蛋白表达上调。
- 高峰谷振勇平静刘霞赵丽徐锦荣倪志宇丛斌凌亦凌
- 关键词：缩胆囊素诱生型一氧化氮合酶CCK受体
- 食管鳞癌及癌前病变中环氧化酶-2及p53表达上调被引量：4
- 2003年
- 目的:探讨环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)-2及p53在中国人食管上皮癌变中表达特点及其作用,为食管癌早期诊断及非类固醇类抗炎药(Nonsteroidalanti-inflammatorydrugs,NSAIDs)在食管癌高发区进行化学预防提供理论依据。方法:收集我省食管癌高发区食管癌及癌前病变新鲜标本76例,应用流式细胞术对COX-2及p53的表达进行定量检测。结果:COX-2及p53的表达在食管上皮细胞从正常到单纯增生以至高分化鳞癌演进过程中不断增高,COX-2在高分化鳞癌中表达量达最高(FI=2.37±0.71),而后随癌的分化程度降低而明显减少。但p53表达持续增高,在低分化癌中达最高(FI=2.70±0.82)。二者表达在从正常至高分化鳞癌中呈显著正相关(r=0.424,P=0.002),而在不同分化癌中表达,二者呈显著负相关(r=-0.345,P=0.031)。结论:COX-2及p53在食管上皮早期癌变进程中表达异常增高,并有明显的协同作用,对二者的早期定量检测有可能作为早期癌变的较好标志物。并有可能应用COX-2抑制剂对食管癌高发区进行化学预防。
- 张林西齐凤英左连富林培中郭建文刘淑霞刘江惠
- 关键词：癌前病变环氧化酶-2P53
- 环氧化酶-2在食管上皮癌变过程中的表达被引量：8
- 2003年
- 张林西齐凤英左连富林培中郭建文刘江惠
- 关键词：环氧化酶-2流式细胞术原位杂交法食管上皮增生
- DNA倍体及相关基因蛋白含量的检测在脱落细胞学诊断中的意义被引量：4
- 2008年
- 目的研究胸腹水中脱落细胞DNA、端粒酶、p53及p21基因蛋白产物的表达,为临床良恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断提供有价值的参考依据,与脱落细胞学诊断相结合,提高恶性肿瘤诊断的阳性率。方法对胸腹水中的脱落细胞进行细胞学检查,利用流式细胞术测定93例胸腹水中DNA倍体、端粒酶、p53、p21基因蛋白产物。结果经细胞学诊断为癌或可疑癌41例(44.1%),其中DNA异倍体32例,端粒酶表达阳性39例,p53表达阳性39例,p21表达阳性35例。在细胞学诊断阴性的52例中,DNA异倍体8例,端粒酶表达阳性20例,p53表达阳性17例,p21表达阳性17例。以上方法联合检测,阳性63例(阳性率为67.7%)。结论采用脱落细胞学与流式DNA倍体、端粒酶和基因蛋白定量检测相结合的办法进行诊断,阳性率高于单纯的细胞学检查。这对于临床中减少漏诊将有重要的参考价值。
- 刘江惠王珩左连富郭建文刘亮
- 关键词：DNA胸水腹水
- 环氧化酶-2在食管上皮癌变过程中的表达状况
- 2004年
- 目的 :探讨环氧化酶 (Cyclooxygenase ,COX) - 2基因在食管上皮癌变中的作用 ,为食管癌早期诊断及非类固醇抗炎药 (Nonsteroidalanti-inflammatorydrugs,NSAIDs)在食管癌高发区进行化学预防提供理论依据。方法 :自食管癌高发区人群采集食管上皮细胞标本 ;并收集本省食管癌高发区食管癌新鲜手术切除标本 5 1例。分别采用COX - 2mRNA原位杂交技术、免疫荧光标记技术及流式细胞仪 ,对COX - 2在食管上皮癌变过程中及不同分化的鳞癌组织中的表达进行检测。结果 :COX - 2在食管脱落上皮细胞中的表达随异型性的增高而逐渐增加 ,在可疑癌及癌细胞中达最高 (FI=1 .5 4± 0 .2 7) ;COX - 2在癌组织中的表达以高分化鳞癌中最高 (FI =2 .6 4± 0 .6 4) ,原位杂交显示其阳性率为 1 0 0 %。而在癌组织中的表达含量随分化程度的降低明显减少 ,在低分化鳞癌中FI=1 .5 1± 0 .2 7。原位杂交结果也是随分化程度的降低其阳性率显著减小 ,在低分化鳞癌为 38.5 %。研究还发现 ,在癌旁上皮中COX - 2含量及阳性率也较高 (FI =1 .73± 0 .35 ,阳性率 1 0 0 %) ,而切端上皮无COX - 2表达。组织免疫荧光检测其阳性率比原位杂交结果稍低。结论 :COX - 2表达在食管上皮早期癌变进程中异常增高 ,COX - 2检测可以作为食管上皮早期癌变?
- 张林西齐凤英左连富郭建文刘江惠
- 关键词：环氧化酶-2食管癌食管上皮癌变流式细胞仪
- 食管癌前细胞DNA、端粒酶含量及多基因表达产物的定量检测被引量：10
- 2002年
- 为探讨食管癌高发区人群食管上皮癌变过程中的早期分子改变及早期癌变机理 .应用流式细胞术和免疫荧光技术及碘化丙啶DNA荧光染色方法 ,对食管上皮癌前细胞的DNA含量、端粒酶含量和多个基因p5 3、p16、cyclinD1蛋白质表达进行了定量检测 .检测结果发现 ,DNA含量在癌变形成时明显增加 ,异倍体率为 87 9% ;p5 3蛋白积聚发生在癌变早期 ,在癌细胞组的阳性率为 10 0 % (5 5 ) ;抑癌基因 p16在癌变早期有明显缺失 ;癌基因cyclinD1及端粒酶阳性率在癌细胞组都为 10 0 % (分别为 6 6 ,7 7) .研究结果表明 :在癌变早期 ,DNA含量及异倍体率增加 ,癌基因cyclinD1表达增高 ,抑癌基因 p16缺失及 p5 3蛋白积聚 ,端粒酶含量也明显增高 。
- 左连富林培中齐凤英张林西郭建文刘江惠
- 关键词：DNA含量端粒酶P16
- 食管鳞癌中PPARγ和MMP-7的表达及其意义被引量：4
- 2009年
- 目的探讨PPARγ和MMP-7在食管鳞状细胞癌发生、发展中的作用及生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测PPARγ和MMP-7蛋白在40例食管鳞状细胞癌、25例非典型性增生组织和13例正常黏膜中的表达。结果PPARγ在癌组织中的阳性表达率为52．5％，高于不典型增生组织（20％）和正常黏膜（7．7％）（P〈0．05）；MMP-7在癌组织中的阳性表达率为62．5％，高于不典型增生组织（28．0％）和正常黏膜（0％）（P〈0．05）。PPARγ的表达与细胞的分化程度、淋巴结转移相关，MMP-7的表达与浸润深度和淋巴结转移相关。PPARγ和MMP-7的表达呈正相关。结论PPARγ和MMP-7基因在食管鳞癌中具有高表达，且表达具有肿瘤特异性，提示PPARγ和MMP7在食管鳞癌的生长和侵袭转移过程中有非常重要的作用。
- 刘江惠李金梅左连富郭建文刘亮王静
- 关键词：食管肿瘤肿瘤鳞状细胞免疫组织化学
- 诱导型一氧化氮合酶在八肽胆囊收缩素抗休克效应中的作用
- ＜正＞ 体循环血管收缩反应性降低是内毒素休克发病过程中平均动脉血压（MAP）进行性降低的关键发病环节。我们以往的研究证实,八肽胆囊收缩素（CCK-8）可缓解内毒素休克时MAP降低,但机制尚未完全阐明。本实验在整体、器官、...
- 谷振勇段国辰丛斌徐小虎凌亦凌
- 文献传递
- 八肽缩胆囊素调节脂多糖诱导ECV-304细胞核转录因子-κB表达的受体机制研究被引量：6
- 2006年
- 目的探讨八肽缩胆囊素(CCK 8)调节脂多糖(LPS)诱导血管内皮细胞核转录因子κB(NFκB)表达的受体机制。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV 304;用溶剂(生理盐水)、LPS、CCK 8、CCK受体(CCK R)非特异性拮抗剂丙谷胺、CCK A受体(CCK AR)特异性拮抗剂CR 1409、CCK B受体(CCK BR)特异性拮抗剂CR 2945分别或联合刺激ECV 304细胞1 h。用蛋白质免疫印迹法(W esternb lot)检测NFκB p65蛋白表达;用免疫细胞化学技术检测NFκB p65蛋白核移位。结果与溶剂对照组比较,LPS可诱导ECV 304细胞NFκB p65蛋白核移位,且其表达明显上调;CCK 8可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的核移位及表达上调;CCK受体拮抗剂可翻转CCK 8的上述抑制效应,其中CR 1409、CR 2945、丙谷胺作用依次增强。结论CCK AR和CCK BR参与介导了CCK 8对LPS诱导ECV 304细胞NFκB表达的抑制作用,其中CCK BR的作用比CCK AR稍强。
- 高峰谷振勇平静王杏云刘霞徐锦荣赵丽闫玉仙马丽琴丛斌凌亦凌
- 关键词：内毒素核转录因子-ΚB
