国家自然科学基金(30973877)
- 作品数：8 被引量：46H指数：5
- 相关作者：李顺祥魏宝阳曹亮黄丹卢向阳更多>>
- 相关机构：湖南中医药大学湖南农业大学湖南省中医药研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>
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- 一株产吴茱萸碱结构类似物的内生真菌的筛选和初步鉴定被引量：3
- 2011年
- 目的筛选产吴茱萸碱结构类似物的内生真菌。方法采用平板分离法对湖南新晃、湘乡、娄底,贵州铜仁,江西万载和浙江温州等地的吴茱萸内生真菌进行分离纯化。采用TLC、LC-MS等分析技术对产吴茱萸碱、吴茱萸次碱及其结构类似物等成分的内生菌进行分析。结果从6个吴茱萸产区共分离到31种内生真菌。分别从吴茱萸的叶、茎和果实中分离到不同的内生真菌,表现为组织特异性,且在不同产地的内生真菌的种类和优势种群存在明显的差异,即具有地域特异性;通过筛选找到了5株产吴茱萸碱和吴茱萸次碱类似成分的内生真菌,该成分可能为去氢吴茱萸碱。并对其中的1株内生真菌进行了形态学鉴定和ITS序列分析,初步判断该菌属子囊菌纲。结论从吴茱萸内生真菌中分离得到1株产去氢吴茱萸碱的子囊菌,为去氢吴茱萸碱的资源开发开辟了新途径。
- 李兆星吴晓红魏宝阳曹亮黄丹李顺祥
- 关键词：内生真菌ITS序列吴茱萸碱
- 产吴茱萸碱或吴茱萸次碱结构类似物的吴茱萸内生真菌的筛选
- 2011年
- 为了筛选可表达吴茱萸碱或吴茱萸次碱以及结构类似物的内生真菌,采用纯培养技术与菌丝尖端分离技术获得吴茱萸内生真菌23株,对其进行液体发酵培养,对内生真菌发酵液和菌丝体的乙醇提取物进行薄层层析分析,结果表明,23株吴茱萸内生真菌中有5株可产吴茱萸次碱或其结构类似物。
- 曹望龙魏宝阳曹亮李佩莲李顺祥
- 关键词：内生真菌吴茱萸碱吴茱萸次碱
- 吴茱萸遗传多样性的SRAP分析被引量：6
- 2011年
- 目的分析不同产区吴茱萸的遗传多样性。方法应用SRAP技术对吴茱萸的遗传背景进行研究,试剂盒提取吴茱萸幼嫩叶片基因组DNA,构建SRAP试验体系,筛选引物并对35份样品进行遗传背景的研究,用NTSYS-pc 2.1软件对SRAP扩增结果进行聚类分析。结果从100对SRAP引物中优选10对用于吴茱萸遗传背景的研究,其中两对引物可有效鉴别吴茱萸品种,分别为Me4+Em1和Me9+Em10。10对引物共扩增得到清晰条带188条,其中共有条带43条,多态性条带145条,多态性比率为77.1%。聚类结果显示在相关系数为0.52时,吴茱萸与密果吴萸分居两群;在相似系数为0.62时,共分为3大类群。吴茱萸中的石虎变种比吴茱萸原变种的遗传差异更显著;石虎品种呈现出较强的地缘相关性,特别是受海拔因素影响明显。结论吴茱萸遗传背景差异明显,SRAP分析可有效鉴别不同品种的吴茱萸,并检测到地区间的差异。
- 魏宝阳曹亮李顺祥黄丹卢向阳
- 关键词：石虎SRAP聚类分析
- 不同采收期对吴茱萸品质的影响被引量：3
- 2015年
- 目的考察吴茱萸不同采收期的主要成分的差异,为吴茱萸药材合理利用提供参考。方法应用HPLC方法测定吴茱萸果实中吴茱萸内酯、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,以此为指标考察不同采收期药材主要成分的变化规律。结果吴茱萸品种随成熟期不同,生物碱含量呈先升高、再保持稳定、最后随药材的老熟而呈降低的趋势。结论湖南浏阳地区吴茱萸的最佳采收期是8月底,湖南浏阳地区石虎的最佳采收期是9月初,广西柳城地区疏毛吴茱萸的最佳采收期是8月中下旬,广西桂林地区疏毛吴茱萸的最佳采收期是8月中旬。
- 黎丹曹亮李顺祥魏宝阳黄丹
- 关键词：吴茱萸碱吴茱萸次碱吴茱萸内酯成熟期
- 吴茱萸遗传多样性的AFLP分析被引量：10
- 2012年
- 目的:应用AFLP技术对吴茱萸的遗传背景进行研究,分析不同产区吴茱萸的遗传特性差异。方法:试剂盒提取吴茱萸幼嫩叶片基因组DNA,构建AFLP实验体系并筛选引物,对来自全国5个省份的46份样品进行遗传背景的研究;用NT-SYS-pc 2.1软件对AFLP扩增结果进行聚类分析。结果:从72对AFLP引物中优选6对用于吴茱萸遗传背景的研究,通过研究发现在相关系数为0.53时,浙江地区的吴茱萸石虎变种样品与其他地区样品分开;石虎变种遗传差异比吴茱萸更显著并呈现出较强的地缘相关性。结论:吴茱萸遗传背景差异明显,AFLP分析方法可有效鉴别不同品种的吴茱萸,并能检测到地区间的差异。
- 魏宝阳曹亮李顺祥黄丹卢向阳虢小翊周晋
- 关键词：AFLP道地药材聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
- SRAP和SCAR分子标记应用于中药材研究进展被引量：9
- 2010年
- 分子标记技术是基于生物体基因组的遗传分析方法,在动植物的品种鉴定、亲缘关系分析、遗传多样性分析、遗传图谱构建和分子辅助育种等研究中有着广泛的应用。其中相关序列扩增的态性(Sequence-Related Amplified Polymorphism,SRAP)是开发较晚、应用较广的分子标记技术,以其简单、高效、重复性良好的优点,在药用植物的遗传学研究中表现出很大的优势。利用分子标记技术构建药材系统发生树,明晰遗传背景和药材品质的关系,辅助中药材品种选育,研究药材道地性成因是近几年的研究热点。本文介绍了SRAP和序列特征性扩增区域(Sequence Characterined Amplified Regions,SCAR)的技术基础,并总结了SRAP常用引物,比较分析了一些中药材的优化反应体系;综述SRAP在中药材的遗传多样性研究、道地性分析、遗传图谱构建等方面的应用情况;SCAR技术的应用特点和在中药材鉴定中的作用;阐述二者结合在中药材研究中的现状及其应用前景。
- 曹亮魏宝阳李顺祥
- 关键词：中药材道地性
- 吴茱萸RAPD体系构建及道地性遗传背景研究被引量：14
- 2010年
- 目的建立吴茱萸的RAPD分子标记技术并对吴茱萸的道地性遗传背景进行探讨。方法应用试剂盒法提取吴茱萸基因组DNA;筛选RAPD引物;对全国3个省市5个吴茱萸产区采取的48份样品进行RAPD分子标记,应用NTSYS-PC软件进行聚类分析。结果获得了吴茱萸的RAPD分子标记方法 ;通过对RAPD扩增结果进行聚类分析,发现不同品种吴茱萸差异较大,浏阳地区的吴茱萸和其他石虎品种在相似度系数为0.68时聚集为两个类群;而同一品种的石虎遗传背景差异明显,在相似度系数为0.78时,铜仁、浏阳、建德、温州的样品各自聚集在相同地域的族群。结论吴茱萸遗传背景差异明显,RAPD技术是一种可用于吴茱萸道地性遗传背景分析的有效手段。
- 曹亮李顺祥魏宝阳黄丹徐菲佟志远
- 关键词：RAPDDNA道地药材
- 吴茱萸道地药材的高效液相指纹图谱研究被引量：10
- 2010年
- 目的建立吴茱萸道地药材化学特征指纹图谱。方法采用HPLC梯度洗脱法,对吴茱萸药材进行测定,流动相为0.04%辛烷磺酸钠与0.05%磷酸的水溶液-乙腈,检测波长230 nm,记录80 min的色谱。结果运用梯度洗脱能很好分离吴茱萸的各类成分,经方法学考察,HPLC指纹图谱具有良好的重现性;11批样品中21个特征指纹峰有专属性。结论本研究建立的指纹图谱分析方法可用于吴茱萸药材质量的综合评价,也可用于道地性考察。
- 袁清照张水寒李顺祥黄丹蔡萍
- 关键词：HPLC道地性指纹图谱
