国际科技合作与交流专项项目(2013DFG31810)
- 作品数：23 被引量：65H指数：6
- 相关作者：燕海峰王坤蒋隽张佰忠易康乐更多>>
- 相关机构：湖南省畜牧兽医研究所湖南农业大学湖南湘佳牧业股份有限公司更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目湖南省科技计划项目长沙市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡精液稀释液预热方式的研究与应用被引量：13
- 2016年
- 为简化鸡精液稀释技术，对鸡精液稀释液进行恒温水浴或人体温预热，以及不同预热方式的孵化率检测，结果显示：①稀释液水浴，33℃比38℃精子活力与受精率要好；②舍温在16．4～29．9℃条件下，原精温度在31．40～35．00℃之间，体温预热温度在30．10～34．20℃之间，原精温度和体温预热温度均随舍温升高而升高；③冷季宜放在贴近皮肤的上衣口袋预热，热季宜放在贴近皮肤的裤袋，体温预热稀释液与原精的温差在2℃左右；④两种预热稀释液方案的试验组和对照组的孵化率比较，恒温水浴、冷季体温预热的孵化率差异不显著（P〉0．05）；热季体温预热，稀释组均高于原精组，有的阶段甚至达到极显著水平（P〈0．01）。因此，通过体温代替水浴预热稀释液来简化等温稀释教术完全可行，尤其夏秋季节使用效果更好。
- 张晓华孙鏖张佰忠朱立军邱美珍燕海峰
- 关键词：精子受精率孵化率
- 鸡精液稀释液储存时间与稀释比例对孵化率影响的研究被引量：9
- 2015年
- 为解决鸡精液稀释液必须现配现用且受精率不稳定等问题,试验采用前期改进的YHFB鸡精液稀释液以及配套稀释技术,选取精子活力与精液密度中上等的石门土公鸡,分精液稀释1∶1、1∶2、1∶1(稀释液保存2个月)与原精液4组,进行等温及时稀释,稀释精液与原精液等体积对石门土母鸡进行人工输精,输精后24 h收集种蛋,检测孵化指标。结果表明:13个稀释组与原精液组的受精率没有显著差异(P>0.05),1∶2组最高;21∶2组的受精蛋健雏率与入孵蛋健雏率均显著高于1∶1组(P<0.05),也高于原精液组,但差异不显著(P>0.05);31∶1(稀释液保存2个月)组,与1∶1组、原精组的孵化效果无显著差异(P>0.05)。因此,前期研制的稀释液配方、保存方法与稀释技术能解决鸡精液稀释液必须现配现用等问题。
- 周小枫黄治忠张晓华易康乐王坤肖定福燕海峰
- 关键词：精液稀释液孵化率
- 鸡囊胚细胞DMSO细管冷冻保存技术研究
- 2015年
- 旨在研究高效鸡囊胚细胞(Blastodermal cells,BCs)冷冻保存技术,为利用BCs保存禽类雌性遗传资源以及胚胎干细胞研究奠定基础。采用解冻后二乙酰荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)染色以及培养24h后细胞贴壁率双重检测BCs活力方法,比较二甲基亚砜(DMSO)不同浓度、不同冷冻与解冻速率等对BCs的冷冻保存效果。结果表明:(1)DMSO不同浓度,20%组解冻后活力最高(0.58),与15%组差异不显著(P>0.05),但与5%、10%和25%组差异极显著(P<0.01);细胞复苏后贴壁率,20%组最高(30.5%),与15%组差异不显著(P>0.05),与25%组差异显著(P<0.05),与5%和10%组差异极显著(P<0.01)。(2)冷冻速率,使用三步法冷冻,以-1℃·min-1的速率降温至-7℃,保持10min,继续降温分别至-15、-35、-55、-75℃后,投入液氮中保存,-75℃组解冻后活力最高(0.53),但与-35℃、-55℃组差异不显著(P>0.05);贴壁率,各组间差异极显著(P<0.01),其中-35℃组最高(36.6%)。(3)37℃水浴解冻,10s、1min、2min、3min解冻后,各组间活力差异不显著(P>0.05),其中10s组最高(0.60),解冻后贴壁率,37℃水浴1min组结果最好(43.9%),与水浴2min组差异不显著(P>0.05),但与水浴10s组差异显著(P<0.05),与水浴3min组差异极显著(P<0.01)。50℃水浴5s、20s、40s、1min解冻,5s组活力最高(0.70),与20s组差异显著(P<0.05),与40s、1min组差异极显著(P<0.01),解冻后贴壁率,各组间差异均极显著(P<0.01),其中50℃水浴5s组最高(36.9%),50℃水浴1min组最低(5.6%)。综上表明,鸡BCs使用DMSO浓度为20%的冷冻保护剂进行细管冷冻,以-1℃·min-1的速率降温至-7℃保持10min,继续以此速率降温至-35℃后,投入液氮保存,37℃水浴1~2min解冻,BCs通过FDA染色与体外培养贴壁率双重检测均可获得较好效果。
- 王坤张佰忠易康乐朱立军蒋隽燕海峰
- 关键词：囊胚细胞DMSO冷冻保存
- 鸡精液冷藏及添加番茄红素对孵化率影响的研究被引量：3
- 2016年
- 为了研发稳定的鸡精液稀释技术,提高冷藏精液孵化率,在前期改进的YHFB鸡精液稀释液基础上,从在不同稀释比例的精液中添加番茄红素、精液稀释后储存6 h等方面,在种鸡场进行孵化效果研究。结果表明:采集精液后不稀释立即冷藏,可以采集大量样品对精子密度与活力同时集中检测。试验建立的与正常生产输精同步进行的多组试验设计表直观明了,有利于鸡精液稀释技术多组试验在种鸡场进行孵化率检测。在精液稀释液中添加抗氧化剂番茄红素后立即输精,对孵化率提高不显著(P>0.05);YHFB稀释液对精液1∶1稀释冷藏6小时时进行人工输精,方案可行。
- 张晓华孙鏖张佰忠易康乐王庆桥阳俊坤燕海峰
- 关键词：番茄红素孵化率
- 鸡细管冻精去甘油技术研究
- 引言/目的甘油可以作为一种渗透性冷冻保护剂用于精子的冷冻保存,但同时甘油对鸡又有抗受精作用,故冻精解冻后要去除甘油。本试验在前期鸡精液冷冻保存技术研究的基础上,对去甘油技术进行详细研究,为建立稳定的鸡精液保存技术奠定基础...
- 李闯阳小胡孙鏖朱立军戴求仲燕海峰
- 稀释液中添加番茄红素对鸡精子保护作用的研究被引量：2
- 2015年
- 为了研发新的鸡精液稀释液,试验在YHFB鸡精液稀释液(分别为B1液、B2液、B3液、B4液)中添加浓度分别为0,0.1,0.2,0.05 mg/mL抗氧化剂番茄红素,按1∶1的比例对鸡混合鲜精进行稀释,稀释后置于长时间保存的低温条件(5℃左右)下,定期检查精子活力,当小于或等于0.3时停止检查;置于高温恶劣环境(41℃水浴)下,每30 min检查1次精子活力,直到精子全部死亡。结果表明:低温条件下不同时间精子活力B1、B4液,B2、B3液均差异不显著(P>0.05),添加0.1 mg/mL番茄红素的B2液在48小时前精子活力稍大于B3液,48小时后B3液精子活力稍大于B2液;高温条件下不同时间精子活力各组之间无显著差异(P>0.05)。说明在低温条件下鸡精液稀释液中添加0.1 mg/mL番茄红素,能显著延长精子活力,但在41℃的高温条件下对精子的保护作用不明显。
- 王晓娟何宇唐炳易康乐张佰忠燕海峰
- 关键词：精子稀释液番茄红素
- 品种、冷冻速率和白藜芦醇对鸡精液冷冻保存效果的影响被引量：2
- 2020年
- 【目的】明确品种、冷冻速率和白藜芦醇对鸡精液冷冻保存效果的影响及其互作关系,为解决鸡精液冷冻保存不稳定的困境及加快新品种培育进程提供技术支持。【方法】采集黑丝羽乌骨鸡(简称乌鸡)和黄土二鸡(简称黄鸡)2个品种的公鸡精液,分别添加0、25、50和100μmol/L白藜芦醇,以二甲基乙酰胺(DMA)为抗冻剂制备细管冻精,在液氮面上1 cm处(高冷冻速率)或3 cm处(低冷冻速率)冷冻,通过冻后精子活力、脂质过氧化水平和线粒体膜电位水平评价鸡精液冻后品质。【结果】黄鸡精液冻后精子活力显著高于乌鸡(P<0.05,下同),但线粒体膜电位水平差异不显著(P>0.05,下同);高冷冻速率下的鸡精液冻后脂质过氧化水平显著低于低冷冻速率,但冻后精子活力和线粒体膜电位水平差异不显著;不同白藜芦醇添加量下,鸡精液冻后精子活力和脂质过氧化水平差异不显著,但线粒体膜电位水平差异显著。双因素组合时,品种×冷冻速率、品种×白藜芦醇和冷冻速率×白藜芦醇间均存在交互作用,其中,乌鸡×高冷冻速率组合的鸡精液冻后脂质过氧化水平显著低于黄鸡×高冷冻速率组合,但冻后精子活力和线粒体膜电位水平无显著差异。三因素组合时,鸡精液冻后脂质过氧化水平最低的组合是乌鸡×低冷冻速率×50μmol/L白藜芦醇,线粒体膜电位水平最高的组合是乌鸡×低冷冻速率×0μmol/L白藜芦醇。【结论】鸡精液冷冻保存时其品种、冷冻速率和白藜芦醇间存在二元互作效应或三元互作效应。因此,只有充分考虑鸡品种、冷冻速率和抗氧化剂间的互作效应,才能切实提高鸡冷冻精液的品质。
- 喻宗岗蒋隽朱立军姚亚铃蒲学慧燕海峰
- 关键词：冷冻精液白藜芦醇互作效应
- 黑丝羽乌骨鸡DMA细管冻精冷冻方法的研究被引量：3
- 2016年
- 为建立黑丝羽乌骨鸡精液合适的冷冻保存程序,选择16只35周龄黑丝羽乌骨鸡公鸡,采集单只公鸡精液,从精液稀释基础液BPSE(Beltsville Poultry Semen Extender)、Lake’s与FEB、加入冷冻保护剂N,N-二甲基乙酰胺(DMA)后平衡时间和细管离液氮面的距离等方面研究冻精解冻后精子活力。结果表明:1)3种稀释液的效果依次为BPSE、Lake’s与FEB,前两者差异不显著,但BPSE液显著高于FEB液(P<0.05);2)平衡1 min和10 min组的活力显著高于平衡20 min、30 min组(P<0.05);3)离液氮面1 cm和2 cm组的活力显著高于离液氮面3 cm和4 cm组(P<0.05)。
- 蔡文杰李剑波张翠永邱美珍邓溯顺燕海峰
- 关键词：精液冻精
- 鸡精液稀释液配制及效果分析被引量：6
- 2015年
- 试验对不同溶质、灭菌方式、冷冻保存时间的3种稀释液稀释精液后在10℃以下冷藏,检测其存活力,同时对3种稀释液的孵化率进行检测。结果表明:1精液用3种稀释液稀释后冷藏保存的存活时间,由长到短依次为YB、LT、YL;进行稀释后与原精等体积输精的孵化率,由高到低依次为YB、YL、LT(P>0.05);2同一种稀释液,采用高压与过滤灭菌方式,精子最长存活时间差异不显著;3将YB稀释液现配后低温(-20℃)保存5、10个月后解冻,稀释精液后冷藏,3组间精子存活时间无显著差异;4YB稀释液进行不同种鸡场孵化率检测,在第一个种鸡场,稀释组略低于对照组(P>0.05);第二个种鸡场第一阶段试验,稀释组略高于对照组(P>0.05),第二阶段试验,稀释组极显著高于对照组(P<0.01)。
- 张晓华孙鏖易康乐朱立军卓新雄燕海峰
- 关键词：精液稀释液受精率孵化率
- 鸡生殖细胞遗传资源保存与应用研究进展被引量：2
- 2017年
- 畜禽遗传资源保存方法中,生殖细胞的冷冻保存因其遗传资源保存的稳定性和长效性,是目前进行畜禽保种的一种主要手段。文章对鸡精液、原始生殖细胞、囊胚细胞、睾丸细胞、性腺细胞以及卵巢组织等生殖细胞的冷冻技术及在遗传资源保存和应用进行了综述,并对不同生殖细胞的保存效果进行了比较。
- 胡雄贵伍佰鑫张晓华朱立军张佰忠燕海峰
- 关键词：生殖细胞种质资源冷冻
