浙江省自然科学基金(Y207632)
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- 小鼠半相合移植物抗宿主病体内、外实验体系的建立及应用
- 2013年
- [目的]建立观察小鼠移植物抗宿主病(Graft Versus Host Disease,GVHD)的体、内外实验体系。[方法]体外实验体系包括MTT法观察单向混合淋巴反应(MLR)中供鼠淋巴细胞增殖;采用PHA活化供鼠T淋巴细胞,Annexin V/PI双染法检测T细胞凋亡率,观察细胞周期变化及不同时间的CD25和CD69表达率。选择经典GVHD防治药物环孢菌素A(cyclosporin A,CSA)和地塞米松(dexamethasone,Dexa)验证体外实验体系的有效性。以CB6F1为受鼠,60Co全身照射清髓,输入供鼠的骨髓和脾细胞,建立稳定的小鼠半相合骨髓移植GVHD模型,为体内实验体系,观察GVHD的程度、生存期及CSA和Dexa的疗效。[结果]CSA和Dexa能显著抑制单向MLR中供鼠效应T淋巴细胞增殖,诱导PHA活化后T淋巴细胞凋亡率增加。CSA和Dexa对T细胞的细胞周期影响包括亚二倍体凋亡峰的比例明显增加、G0/G1期比例增加和S期比例减少。CSA和Dexa还能降低GVHD同种反应T细胞的标志CD25和CD69的表达。建立稳定的小鼠半相合骨髓移植GVHD模型,CSA和Dexa均能减轻GVHD的程度,延长生存期,以CSA为佳。[结论]形成体外观察供鼠GVHD同种反应T细胞增殖、活化的实验体系,建立稳定的小鼠GVHD模型,采用CSA和Dexa验证了其药物筛选的有效性。
- 林筱洁高瑞兰倪桂宝尹利明沃立科董原赵燕娜王潇陈小红
- 关键词：移植物抗宿主病骨髓移植T细胞凋亡CD25CD69
