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羧化胶乳凝集试验检测边缘无形体血清抗体的研究被引量：2: 2004年; 利用边缘无形体可溶性抗原 ,以化学交联的方式致敏羧化胶乳制成胶乳抗原 ,成功地建立了一种检测牛边缘无形体血清抗体的胶乳凝集试验 (LAT)诊断方法。用制备的胶乳抗原分别检测瑟氏泰勒虫、双芽巴贝虫、衣原体、附红细胞体阳性血清 ,结果均为阴性 ;与边缘无形体标准阳性血清、免疫牛血清、流行区血清样品均呈明显的凝集反应。研究结果表明 ,LAT方法具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强、成本低廉等优点 ,是一种特别适合于基层现场检测边缘无形体血清抗体的新方法。; 袁建丰于建敏宋翠萍王志亮姚宝安吴鉴三; 关键词：化学交联胶乳凝集抗体检测

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅱ.试剂盒阴阳性临界值的测定及其与IDEXX公司试剂盒的比较被引量：7: 2006年; 对临床上采集的899份猪血清样本,用以纯化的重组N蛋白为包被抗原建立的检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接EL ISA进行检测,运用统计学方法摸清了检测结果的分布规律,并和国外IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒同时对460份血清样本进行检测,结果表明,2种方法的符合率为91.73%。利用TG-ROC软件确定了自制的EL ISA酶标板(NP-EL ISA)的临界值,并标定试剂盒的特异性和敏感性均为92.6%。EL ISA的结果判定标准是:当以血清样本L为标准参考阳性血清时,样品与阳性血清的比值(S/P)小于或等于0.4为阴性;S/P在0.4与0.5之间为可疑;S/P大于或等于0.5为阳性。与IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒对临床样品的检测结果进行比较后,初步判定所建立的EL ISA之所以出现较多的假阴性,可能是目前临床上出现了PRRSV欧洲型所致。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳许立华陈溥言; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒试剂盒重组N蛋白

抗PrP单抗用于BSE检测和PrPC在CNS中的定位和分布: 朊病毒病(又称传染性海绵状脑病)的病原是致病型朊蛋白(PrPSc),聚集在牛脑中能够引发牛海绵状脑病(BSE).利用自制的单抗4C11和国外同类单抗进行免疫组织化学(IHC)的比较染色,结果显示单抗4C11和国际上常用的...; 王小军王志亮鲍恩东刘雨田吴晓东; 关键词：朊蛋白朊病毒牛海绵状脑病; 文献传递

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅳ.与IDEXXELISA试剂盒及Westernblot的比较被引量：7: 2006年; 利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western-blot进行了符合率试验。试验结果表明,所研制的试剂盒与Westernblot的符合率达97.67%以上。对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测,其中有37份不相符合,用Westernblot对这37份血清进行验证,有35份血清检测结果与自制的试剂盒检测结果一致。由此表明,自行研制的试剂盒,其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 BLOT

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅰ.ELISA方法的初步建立及其标化被引量：14: 2005年; 以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。研究结果表明,重组抗原最适包被质量浓度为1mg/L,最适包被条件为4℃过夜,血清稀释度为1∶40,待检血清和酶标二抗的反应时间分别为37℃30min和40min,底物用TMB溶液,37℃显色10min。本研究对ELISA板的蛋白稳定剂、血清稀释液的显色系统和终止液进行了研究。用全病毒进行的阻断试验结果表明,全病毒能够阻断阳性血清与包被重组N蛋白抗原的结合反应。用此方法对几种繁殖障碍性疾病的阳性血清进行检测,均为阴性,无交叉反应,表明建立的ELISA具有很好的特异性。板内和板间重复性试验结果为,同1份血清板内各孔的变异系数和板间各次的变异系数均小于7%,表明本方法的重复性好。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳许立华陈溥言; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体的ELISA研制——Ⅲ.ELISA试剂盒保存条件被引量：4: 2006年; 对应用重组N蛋白抗原检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的EL ISA诊断方法的主要成分(抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清)及组装成的试剂盒的保存条件进行了摸索。分别用5种方法对抗原包被板处理,结果表明用真空包装机抽真空后充入氮气法处理效果最好;酶标二抗在酶标抗体保存液中保存,能很好地保持EL ISA测定结果的稳定性。对其他试剂盒组成成分的保存期分别测定后,组装成试剂盒,测定试剂盒的保存期为12个月。; 吴延功徐天刚王志亮张喜悦王君玮宋翠平刘佩兰徐培莲宋芳; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ELISA 保存期

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