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国家自然科学基金(30500596)

作品数：8 被引量：12H指数：3
相关作者：奚玲马丁卢运萍吴鹏周剑锋更多>>
相关机构：华中科技大学上海中医药大学武汉大学更多>>
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文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 4篇端粒
  • 4篇端粒酶
  • 4篇细胞
  • 3篇端粒酶活性
  • 3篇端粒酶逆转录...
  • 3篇逆转
  • 3篇逆转录
  • 3篇逆转录酶
  • 3篇转录
  • 3篇转录酶
  • 3篇活性
  • 3篇宫颈
  • 2篇子宫
  • 2篇子宫颈
  • 2篇细胞生长
  • 2篇宫颈癌
  • 1篇凋亡
  • 1篇诱导凋亡
  • 1篇诱饵
  • 1篇乳腺

机构

  • 7篇华中科技大学
  • 2篇上海中医药大...
  • 1篇武汉大学

作者

  • 7篇奚玲
  • 5篇马丁
  • 4篇卢运萍
  • 3篇吴鹏
  • 2篇周剑锋
  • 2篇王拥军
  • 1篇朱涛
  • 1篇刘萍
  • 1篇田媛
  • 1篇万艳
  • 1篇陶海鹰
  • 1篇王蓓蓓
  • 1篇罗丹枫
  • 1篇罗爱月
  • 1篇李双
  • 1篇张萍
  • 1篇陈刚
  • 1篇王丹
  • 1篇吴黎

传媒

  • 1篇中国妇幼保健
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇癌症
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇武汉大学学报...
  • 1篇医学研究生学...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 2篇2008
  • 5篇2007
  • 1篇2006
共 8 条 记 录，以下是 1-8
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排序方式：
DN-hTERT对MCF7细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用
2007年
目的:观察端粒酶逆转录酶负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性和恶性表型的抑制作用。方法:将带DN-hTERT基因的真核表达载体(DN-hTERT-IRES2-EGFP,DN)、IRES2-EGFP空载体(Ⅰ)通过脂质体2000(lipofectamine2000)介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERT mRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性;流式荧光原位杂交法(FLOW-FISH)检测转染细胞端粒长度的变化;裸鼠肿瘤细胞移植观察转染细胞动物致瘤率。结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN) hTERT mRNA表达升高;TRAP-ELISA检测MCF7/DN细胞端粒酶活性(2.36±0.12)与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)(3.32±0.14)比较显著降低(P<0.05);反应端粒长度的荧光强度差比较中,MCF7/DN细胞(13.89±0.23)比MCF7/I(19.87±0.36)低,转染DN端粒长度出现缩短;裸鼠肿瘤细胞移植,2周动物致瘤率MCF7/DN为0,与MCF7/I的35%比较有极显著意义(P<0.01)。结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性。
饶耀剑刘慧娟王拥军奚玲
关键词：端粒酶活性
Peroxiredoxin Ⅱ酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活效应检测
2007年
目的:应用酵母双杂交体系,构建人peroxiredoxinⅡ(PrxⅡ)蛋白酵母双杂交诱饵载体,并检测该载体的表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用。方法:用PCR扩增PrxⅡ基因cDNA中编码完整开放阅读框的基因片段;将该基因片段与pGBKT7载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;用醋酸锂法(Li-Ac)将序列正确的重组质粒pGBKT7-PrxⅡ转化入AH109酵母菌株,在缺陷性培养基上观察pGBKT7-PrxⅡ在AH109中的表达情况,检测诱饵载体有无毒性作用和单倍体及二倍体自激活功能。结果:成功构建pGBKT7-PrxⅡ重组质粒。转化有重组质粒和pGBKT7空载体的酵母菌都能在SD/-Trp/X--αgal平板上长出粉红色菌落,在SD/-His/-Trp/X--αgal,SD/-Ade/-Trp/X--αgal平板上不能生长,两种酵母菌在SD/-Trp液体培养基中培养16 h后,菌液的OD600均值均为0.9,说明AH109[pGBKT7-PrxⅡ]转化成功,对酵母菌株AH109无毒性且不具自主激活报告基因的功能。结论:成功获得了在酵母细胞中正确表达,并对酵母细胞无毒性且未自主激活报告基因的诱饵表达载体pGBKT7-PrxⅡ,该载体可作为酵母双杂交系统中的“诱饵”,该诱饵载体可应用于酵母双杂交系统3筛选PrxⅡ相互作用蛋白。
刘萍奚玲陶海鹰卢运萍马丁
关键词：PEROXIREDOXIN酵母双杂交系统克隆
端粒酶逆转录酶在脐静脉内皮细胞耐受曲古抑菌素A诱导凋亡中的作用
2007年
目的观察曲古抑菌素A（TSA）对脐静脉内皮细胞及官颈癌细胞凋亡、端粒酶逆转录酶（hTERT）表达的影响,并探讨hTERT在脐静脉内皮细胞耐受TSA中的作用。方法磺酰罗丹明B （RSB）法检测药物动力学特征;流式细胞仪检测周期改变和凋亡;RT-PCR检测hTERT和p21^Waf1基因表达变化;免疫荧光结合流式细胞术检测hTERT蛋白表达变化;转染hTERT质粒后,PCR-TRAP- ELISA法检测转染细胞端粒酶活性;AnnexinV／PI检测转染细胞在TSA作用下的早期凋亡。结果在大剂量TSA作用脐静脉内皮细胞后,增殖抑制、周期阻滞,但凋亡并不显著;HeLa细胞在相同剂量的TSA作用下凋亡明显。脐静脉内皮细胞经TSA诱导后,hTERT表达上调,p21^Waf1则无明显变化;而HeLa细胞p21^Waf1表达上升,hTERT表达下降。转染显性负突变hTERT的脐静脉内皮细胞,其端粒酶活性显著低于对照组。TSA作用转染不同质粒的脐静脉内皮细胞的凋亡率与对照组差异有统计学意义。结论脐静脉内皮细胞可以耐受大剂量TSA诱导的凋亡,hTERT表达上调可能是脐静脉内皮细胞耐受TSA诱导凋亡的重要机制之一。
吴鹏奚玲陈刚王蓓蓓罗丹枫卢运萍周剑锋马丁
关键词：曲古抑菌素A凋亡端粒酶逆转录酶P21^WAF1
40岁以下妇女浸润性宫颈癌94例临床分析被引量：1
2008年
目的：探讨年轻妇女浸润性宫颈癌临床病理特征和治疗特点。方法：对2005年1月～2007年8月收治的40岁以下年轻浸润性宫颈癌患者94例的临床资料进行回顾性分析（研究组），并以同期治疗的41～73岁宫颈癌患者149例作为对照研究（对照组），分析两组的临床表现、病理特征和淋巴结转移情况及治疗特点。结果：40岁以下宫颈癌的比例高达38．68％，研究组初婚年龄、孕次、产次均较低（P〈0．01）。临床表现以接触性出血为主（P〈0．01），肿瘤类型以外生型为主（69．1％）。组织病理学类型及分级、淋巴结转移与对照组无显著性差异。临床分期以早期为主，Ⅰa～Ⅱa期共占76．5％（P〈0．01）。研究组94例中予以手术治疗75例，70例保留一侧或双侧卵巢并移位于同侧上腹部（P〈0．01），74例行盆腔淋巴结清扫，淋巴结转移率为18．92％，以闭孔淋巴结转移最常见。结论：宫颈癌有低年龄化趋势，应引起我们的高度重视。接触性阴道流血为年轻妇女宫颈癌的危险信号，应提高对年轻妇女宫颈癌的警惕性，治疗时应注意保留早期患者的卵巢功能。
王丹李双吴黎万艳奚玲卢运萍马丁
关键词：年轻妇女子宫颈癌浸润性
Screening for Novel Binding Proteins Interacting with Human Papillomavirus Type 18 E6 Oncogene in the Hela cDNA Library by Yeast Two-Hybrid System被引量：3
2008年
To screen for novel binding proteins interacting with high-risk HPV 18 E6 oncogene, the strain AH 109 was transformed with pGBKT7-HPV 18 E6 plasmid, and subsequent transference was utilized to screen for interacting proteins with HPV 18 E6 in human Hela cDNA library. HPV 18 E6 mRNA was expressed in yeast and there was no self-activation and toxicity in AH109. Seven proteins that interacted with HPV18 E6, including transmembrane protein 87B, phosphonoformate immuno-associated protein 5, vimentin, KM-HN-1 protein, dedicator of cytokinesis 7, vaccinia related kinase 2 and a hypothetical protein, were identified. It was suggested that yeast two-hybrid system is an efficient for screening interacting proteins. The high-risk HPV 18 E6 oncogene may interact with the proteins, which may be associated with signal transduction and transcriptional control, epithelial cell invasion and migration, as well as humoral and cellular immune etc. This investigation provides functional clues for further exploration of potential oncogenesis targets for cancer biotherapy.
李双刘萍奚玲蒋学峰周剑峰王世宣孟力卢运萍马丁
关键词：YEASTHYBRIDIZATION
端粒酶逆转录酶显性负突变体对乳腺癌细胞端粒酶活性的抑制作用被引量：3
2007年
目的:观察端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性的抑制作用。方法:将携带DN-hTERT基因的真核表达载体IRES2-EGFP空载体通过脂质体2000介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERT mRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性。结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN)hTERT mRNA表达升高;改进端粒重复序列扩增法(TRAP-ELISA)检测MCF7/DN细胞端粒酶活性与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)比较显著降低(P<0.05)。结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性。
饶耀剑刘慧娟王拥军奚玲
关键词：端粒酶活性乳腺癌
子宫颈上皮内瘤样病变和子宫颈癌组织中Smad2/3和HPV16 E7的表达及意义被引量：5
2007年
背景与目的:Smads蛋白是转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族信号转导的下游信号蛋白,与多种肿瘤的发生密切相关;人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宫颈癌的重要致癌因素,但目前对两者在宫颈癌发病过程中相互关系的研究尚不充分。本研究拟检测不同宫颈病变组织中Smad2/3和HPV16E7蛋白的表达,探讨HPV感染和Smad2/3蛋白变化在宫颈癌形成和演进进程中的相互关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测20例宫颈慢性炎症、30例宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和30例宫颈癌组织中Smad2/3和HPV16E7的表达情况,比较其在各种病变中表达水平的差异。结果:Smad2/3蛋白在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌组织中的阳性率分别为50.0%、73.3%和93.3%,宫颈癌组分别与慢性宫颈炎组和CIN组比较,差异有统计学意义(P<0.05),慢性宫颈炎组与CINⅢ级组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV16E7蛋白阳性率在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌组织中分别为60.0%、66.7%和83.3%,各组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。Smad2/3阳性率与宫颈癌临床分期、病理类型、组织学分级和淋巴结转移无关(P>0.05)。Smad2/3与HPV16E7表达呈正相关(r=0.271,P=0.015)。结论:Smad2/3蛋白在宫颈癌组织中表达升高,可能在宫颈癌的发生过程中起重要作用;HPV感染与Smad2/3蛋白在宫颈癌组织中表达升高密切相关。
田媛吴鹏罗爱月奚玲周剑锋马丁
关键词：宫颈上皮内瘤样病变SMAD2SMAD3HPV16E7
端粒酶活性对HeLa细胞生长及化疗敏感性的影响
2006年
目的研究抑制端粒酶活性对HeLa细胞在体内外生长和对顺铂敏感性的影响。方法将野生型端粒酶逆转录酶、端粒酶逆转录酶显性负突变体和对照质粒电转染于HeLa细胞中,绘制细胞生长曲线,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞对顺铂的敏感性,磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V)法检测细胞凋亡情况;接种裸鼠观察其致瘤性及对顺铂敏感性的影响。结果端粒酶逆转录酶显性负突变体转染于HeLa细胞后,端粒酶活性显著下降,细胞生长速度延缓,显著增强顺铂诱导的凋亡,端粒酶活性抑制后对裸鼠致瘤性丧失,而端粒酶活性增强后顺铂对肿瘤的抑制作用下降。结论端粒酶活性下降能抑制HeLa细胞生长,增强顺铂的杀伤作用,反之端粒酶活性升高将导致对顺铂耐药。
奚玲吴鹏朱涛张萍卢运萍马丁
关键词：端粒酶逆转录酶宫颈癌
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