国家自然科学基金(31071794)
- 作品数：10 被引量：35H指数：4
- 相关作者：王永勤赵瑞王婵田保华李丽林更多>>
- 相关机构：北京市农林科学院蔬菜研究中心山西大学沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划北京市农林科学院科技创新能力建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 洋葱花发育B类MADS-box基因AcPI表达载体的构建及拟南芥转化
- 2014年
- 为进一步分析实验室前期利用RACE技术从洋葱花蕾中分离到的AcPI基因的功能,本研究构建了AcPI基因的过表达载体,采用冻融法将表达载体转入农杆菌菌株LBA4404后,通过花序侵染法介导转化生态型拟南芥进行过表达试验。转基因植株的PCR和RT-PCR分析结果表明,外源基因AcPI已经整合到拟南芥基因组中并在转录水平上表达;转AcPI基因植株除了开花时间比野生型植株有所提前外,花器官和营养器官在形态上均未发生明显改变。因此,AcPI基因的功能需要进一步利用RNAi干涉技术进行研究,以为今后全面剖析洋葱花器官发育的分子遗传机制以及利用生物工程技术创造洋葱雄性不育植株提供理论依据。
- 赵瑞李丽林陈俊琴佟昊旻
- 关键词：洋葱ACPI拟南芥
- 北京地区侵染大葱的胡葱黄条病毒外壳蛋白基因的克隆与分析
- 我国是葱的原产地,长期以来品种改良多以产量和品质为主要目标,加之栽培面积的扩大和连作栽培,葱病毒病发病日趋严重,田间发生率一般为20%～30%,严重的高达75%。大葱病毒病已成为葱高产优质栽培的主要限制因素之一。本研究中...
- 田保华王永勤
- 关键词：大葱病毒外壳蛋白基因
- 文献传递
- 洋葱异源胞质雄性不育候选基因atp6的克隆与表达分析被引量：3
- 2012年
- 以异源胞质洋葱不育系及其保持系为材料,克隆洋葱atp6基因,并对其在DNA、蛋白质二级结构和花发育各时期表达量等方面进行分析比较。结果表明:获得的atp6基因全长均为1414bp,与保持系进行序列比对发现,不育系开放阅读框第92碱基处由C突变为A,该突变导致编码氨基酸由酪氨酸突变为丝氨酸;二者编码的氨基酸在二级结构组成及蛋白质残基溶剂可接触性上也存在不同程度的差异;其表达量在小花蕾和大花蕾时差异不大,中花蕾时不育系却明显高于保持系,表达上调。
- 周晓娟赵瑞王永勤
- 关键词：洋葱ATP6克隆
- 感染北京地区大葱的胡葱黄条病毒外壳蛋白基因的克隆及分析被引量：2
- 2012年
- 以感染胡葱黄条病毒(Shallot yellow stripe virus,SYSV)的大葱为材料,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)获得包含SYSV-CP全部编码序列、NIb蛋白基因5′端的部分序列和3′UTR的2个基因片段,分别命名为SYSV-CP1和SYSV-CP2,它们的编码区碱基数均为774bp,均编码258个氨基酸;在该编码区内存在2个碱基的差异,编码的蛋白存在1个氨基酸的差异。系统进化树分析表明:SYSV分离物可以区分为两个主要群体,SYSV-CP1和SYSV-CP2位于第Ⅱ组内,它们与来自浙江的SYSV的分离物亲缘关系最近,表现出一定的地理分布相关性。
- 田保华王永勤王婵
- 关键词：大葱外壳蛋白基因克隆
- 次氯酸钠用于植物培养基灭菌方法初探被引量：6
- 2012年
- 为了解决培养基高压蒸汽灭菌时间长、能源消耗多等问题,对植物组织培养基的灭菌方法进行了改进,在培养基的配制过程中添加不同浓度次氯酸钠进行灭菌。结果表明,在培养基配制过程中,琼脂加热溶解后,趁热在培养基中添加10mg/L次氯酸钠,未发现污染。以‘神马’菊花为外植体,在培养基配制过程中加入终浓度20mg/L的次氯酸钠时,植株可以正常生长,而且,生长状况好于高压灭菌组;次氯酸钠浓度高于50mg/L时,生长状况差于高压灭菌组,而且会产生伤害。在本试验条件下,利用次氯酸钠代替高压蒸汽灭菌具有一定的可行性;该灭菌方法具有缩短灭菌时间,节约能源等优点。
- 张雨婷王贤王永勤孙继凡
- 关键词：植物培养基次氯酸钠
- 洋葱细胞质雄性不育研究进展被引量：2
- 2012年
- 细胞质雄性不育性在高等植物遗传育种研究中占有重要地位,一直是植物遗传育种和遗传理论研究的热点。通过综述洋葱细胞质雄性不育类型、不育机理、起源关系等方面的研究进展,对洋葱工作的进一步开展及雄性不育的选育提出一些粗浅的建议。
- 周晓娟赵瑞王永勤
- 关键词：洋葱细胞质雄性不育
- 一种快速提取葱属植物DNA的方法
- 2012年
- 目的:针对分子育种工作的繁琐性及葱属植物次生代谢物较多的特点,研究一种利用普通试剂及简单仪器高效快速提取葱属植物DNA的方法。方法:对碱处理法稍加改进,在碱性环境中高温裂解细胞,将释放的DNA保存在Tris缓冲液中,用PCR检测提取质量并分析DNA的保存时间。结果:与用试剂盒提取的DNA相比,扩增产物无显著差异,利用此方法提取DNA并分析了13个洋葱品种的细胞质雄性不育类型;保存时间分析显示,DNA在常温下只能保存5 d,在4℃或-20℃可至少保存2个月。结论:该方法方便快速、成本低、适于田间操作,得到的DNA可满足分子生物学实验的基本要求,可用于以PCR为基础的分子标记辅助育种。
- 王婵田保华裴雁曦王永勤
- 关键词：DNA提取葱属
- 洋葱花器官B类MADS-box基因AcPI的克隆及表达分析被引量：10
- 2012年
- 【目的】克隆洋葱花器官B类PI/GLO家族MADS-box基因,分析其序列特征及时空表达模式,为探讨其在洋葱花发育过程中的分子遗传机制奠定基础。【方法】以洋葱花蕾总RNA为模板,根据同源克隆策略设计简并引物,利用RT-PCR结合RACE技术,获得AcPI的全长cDNA序列。用生物信息学方法对其基因序列特征进行分析;利用RT-PCR和Real-time PCR分析AcPI在花蕾整个生长过程中的时空表达模式。【结果】克隆获得洋葱AcPI基因(GenBank登录号:JX679083)的cDNA全长931 bp,包含615 bp的完整开放阅读框,编码205个氨基酸。蛋白分析表明,AcPI蛋白具有植物MADS-box蛋白典型的MADS和K结构域;与水仙的NTPI、风信子的HoMADS2有78%、75%的相似性,与金鱼草的GLO也有52%的相似性。系统进化树分析表明,AcPI属于B类MADS-box蛋白家族的PI亚家族。RT-PCR表达分析表明,AcPI只在生殖器官花蕾中表达,但主要在花的第一、二、三轮花器官中表达,而在营养组织根、茎和叶中不表达。Real-time PCR进一步分析表明,AcPI在花芽整个生长过程中,在心皮中微弱表达,但表达丰度呈递增趋势;而在外轮被片、内轮被片和雄蕊中强烈表达,其表达丰度除了在外轮被片中呈先增后减的趋势外,在内轮被片和雄蕊中都呈递增趋势。【结论】AcPI在洋葱第一轮花器官中的表达支持了van Tunen提出的修正的ABC模型;但AcPI在洋葱第四轮花器官中也有表达,这表明AcPI除了调控外轮被片、内轮被片和雄蕊发育外,还可能在心皮的形成发育过程中起着重要作用。
- 李洪有王婵李丽林王永勤赵瑞
- 关键词：洋葱花器官MADS-BOX基因基因克隆
- 洋葱大葱种间杂种鉴定方法建立与应用被引量：4
- 2011年
- 以洋葱、大葱及其杂种F1为材料,利用PCR-RFLP技术对其核糖体DNA内部转录间隔区(ITS)和细胞质线粒体DNA的srRNA基因V7进行分析,试图建立洋葱大葱种间杂种的鉴定方法。结果显示:大葱ITS序列没有DdeⅠ酶切位点;而洋葱被DdeⅠ酶切成两个大小不同的片段;F1杂种具有两亲本的ITS序列酶切模式。细胞质线粒体srRNA基因的V7区域的扩增表明F1杂种和亲本有大小一致的单一片段,经RsaI酶切后,大葱有约0.3kb条带,比洋葱的稍小,两亲本都含有另外一条小条带(约0.1kb)。对25份杂种材料进行鉴定,22份的母本为大葱,3份为假杂种。本研究在分子水平上建立了洋葱大葱种间杂种的鉴定方法,快速、准确地辨别杂种一代的真假性。
- 田保华梁毅陈丽王永勤裴雁曦
- 关键词：洋葱大葱种间杂种MTDNA
- 单子叶植物花器官发育的分子机制及修正的ABC模型被引量：4
- 2013年
- 大多数单子叶植物都与人类生活密切相关,其花器官发育的好坏不仅直接关系到它们的种族延续,而且对粮食作物和园艺作物的生产具有重要影响。该文综述了在主要单子叶粮食作物和观赏园艺作物中花器官发育分子机制的研究进展,分析了基于对双子模式植物的研究所建立起来的花器官发育模型在单子叶植物中的保守性及其多样性,并提出了适当的见解以及对今后研究的展望。
- 李洪有王婵李丽林赵瑞王永勤
- 关键词：单子叶植物保守性多样性
