国家自然科学基金(30500575)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 相关作者：陈新林肖新莉刘勇谭敬徐曦更多>>
- 相关机构：西安交通大学西安交通大学医学院第一附属医院西安医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 采用IV型胶原酶建立小鼠脑出血模型被引量：4
- 2014年
- 目的:用脑内注射胶原酶方法建立小鼠脑出血模型。方法:在动物脑立体定位仪下将不同剂量Ⅳ型胶原酶0.5μl注射到昆明小鼠左侧纹状体处,分别在术后24h对小鼠运动功能进行检测,并对出血部位脑组织进行尼氏染色,光镜观察染色结果来验证模型制作是否成功。结果:术后小鼠即表现右侧肢体运动功能障碍。形态学观察证实左侧纹状体内血肿形成,且在一定范围内,出血灶大小与肢体偏瘫症状发展过程基本一致。不同个体间相同单位的胶原酶出现的血肿体积和部位基本一致。结论:应用Ⅳ型胶原酶脑内注射方法建立的小鼠脑出血模型,是一种方法简单,效果可靠,易于大批量制作的动物模型。脑内注射0.02U的IV型胶原酶制备的脑出血模型能较好满足实验要求。
- 谭敬肖新莉陈新林徐曦高燕凤刘勇
- 关键词：脑出血化学诱导脑出血胶原酶小鼠
- 灯盏花素改善大鼠局灶性脑缺血后空间学习记忆功能的研究(英文)被引量：5
- 2009年
- 目的:研究灯盏花素对大鼠局灶性脑缺血后空间学习记忆能力的影响。方法:线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞模型,腹腔注射灯盏花素(20、40 mg/kg),1次/天,持续2周,缺血对照组注射同体积10%葡萄糖注射液。其后,进行5天的Morris水迷宫实验检测动物的空间学习记忆能力。结果:与假手术组比较,缺血对照组动物在定向航行实验和空间探索实验中均显现了较为严重的空间学习记忆能力障碍。在定向航行实验中,灯盏花素组动物的平均潜伏期较缺血对照组明显缩短(低剂量组,P<0.01;高剂量组,P<0.05),在空间探索实验中,与假手术组(P<0.01)和灯盏花素组动物(P<0.01)比较,缺血对照组动物在非原平台象限停留时间明显延长,穿越原平台位置的次数明显减少。Nissl组织化学染色和ChAT免疫组织化学染色显示,灯盏花素组动物缺血侧皮质神经元数量和ChAT免疫阳性神经元数量较缺血对照组动物明显增多(P<0.01)。在海马CA区的锥体细胞层,神经元数量和ChAT免疫阳性神经元数量在假手术组、缺血对照组和灯盏花素组之间无明显差异。结论:研究结果表明,灯盏花素可以改善大鼠局灶性脑缺血后空间学习记忆能力障碍,保护新皮质内的神经元/胆碱能神经元可能是其保护作用的机制之一。
- 刘建新刘勇陈新林赵建军宋土生钱亦华
- 关键词：灯盏花素学习记忆脑缺血乙酰胆碱转移酶
- 人神经元特异性烯醇化酶蛋白表达及抗体制备(英文)
- 2006年
- 目的克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断。方法经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Westernblotting和免疫组化鉴定。结果所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性。Westernblotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白。结论NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究。
- 肖新莉韩俊张琳陈岚张瑾陈新林周伟姜惠英张宝云刘勇董小平
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶抗血清朊病毒病
- 大鼠室管膜下区和齿状回的EGFR表达
- 2014年
- 目的:探讨大鼠脑发育过程中表皮生长因子受体(EGFR)在室管膜下区(SVZ)和齿状回(DG)的表达及其意义。方法:选取正常不同发育时期SD大鼠脑,进行石蜡包埋连续切片,对大鼠脑室管膜、室管膜下区和海马DG进行EGFR免疫组织化学染色及光镜观察。应用免疫荧光双重染色观察EGFR和BrdU的共表达情况。结果:不同发育阶段大鼠的室管膜细胞都呈EGFR阳性。侧脑室背外侧角SVZ的EGFR阳性细胞在出生前及出生后早期较多,出生30d后(P30)EGFR阳性细胞数目锐减。在P7的SVZ,90%以上的EGFR细胞与BrdU共表达。在齿状回,颗粒细胞、一些位于SGZ、分子层和门区的细胞呈EGFR阳性。在大鼠胚胎晚期和出生后1周内,EGFR表达较高。P30,P120和P365,EGFR阳性细胞数较P7大幅度减少并且减少的主要是位于SGZ、分子层和门区的细胞。此外,在P7齿状回的各层可见一些EGFR阳性细胞表达BrdU。结论:EGFR在SVZ和DG有较强表达且表达随年龄增长有降低的趋势。在SVZ和DG各层可见EGFR和BrdU的细胞表达,EGFR信号途径在神经干(祖)细胞的增殖和特定类型神经元的分化及迁移过程中可能发挥重要作用。
- 肖新莉徐曦冯骏谭敬刘勇
- 关键词：齿状回病理学受体表皮生长因子
- 一种简易可行的激光捕获显微切割样本RNA质控方法被引量：1
- 2008年
- 目的建立一种简易可行的激光捕获显微切割样本RNA质控方法。方法分别提取捕获样本和染色前、染色后1和2h、持续捕获1和2h切片及残余组织的RNA,琼脂糖电泳检测;激光捕获显微切割(LCM)样本RNA的产率可通过理论值初步估计。结果当染色前后、捕获后的切片或切片残余组织RNA质量完好时,捕获样本的RNA质量完好,实时定量PCR亦获得了良好的扩增结果。结论使用琼脂糖凝胶电泳分别检测染色前后、捕获后的切片或切片残余组织RNA的质量,可以从不同的环节和过程对捕获样本RNA进行间接检测,该方法简单方便有效,并可进一步用于LCM样本蛋白质及DNA等大分子的质控。
- 田英芳魏朝明陈新林邱芬肖新莉康前雁朱波峰田玉梅张军峰刘勇
- 关键词：激光捕获显微切割琼脂糖凝胶电泳
- 大鼠胼胝体神经元表达Cav，2.2及其神经纤维联系被引量：1
- 2008年
- 目的:证明成年大鼠胼胝体内存在神经元,检测胼胝体神经元是否表达钙通道蛋白并追踪胼胝体神经元纤维联系方式。方法:选取正常SD大鼠脑,冰冻连续切片进行成熟神经元的标志物NeuN和N型电压依赖性钙通道α1亚单位(Cav2.2)的免疫组织化学染色,应用神经束路逆行追踪剂30%辣根过氧化物酶(HRP)生理盐水溶液注射入胼胝体小钳下方,对HRP进行四甲基联苯胺(TMB)显色。分别观察胼胝体中NeuN和Cav2.2的表达和胼胝体内神经元突起的联系情况。结果:在胼胝体中存在少量NeuN阳性细胞,部分NeuN阳性细胞同时表达Cav2.2。神经逆行追踪显示在胼胝体内存在HRP阳性神经元,其神经纤维连接与皮质或尾壳核有联系。结论:在成年大鼠胼胝体内存在少量的神经元,部分胼胝体神经元表达Cav2.2。这些神经元可能与脑皮质和胼胝体下方的尾壳核有联系。
- 张建水刘勇许杰华杨蓬勃肖新莉陈新林田玉梅张军峰
- 关键词：胼胝体神经元亚单位
