重庆市自然科学基金(CSTC2004BB5123)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：龚旭周琦刘方欣张玉诺更多>>
- 相关机构：重庆市肿瘤研究所重庆医科大学中国人民解放军更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒的构建和序列分析
- 2006年
- [目的]利用RNA干扰技术,以Bcl-2为靶基因,设计构建重组体,并进行序列分析,探索肿瘤基因治疗的新途径。[方法]设计有小发夹结构的两条DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至转录载体Pgenesil-1上构建重组体,转化DH5a菌株,提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析。[结果]将合成的DNA片段退火后克隆至载体上,经酶切及序列鉴定为目的序列,靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒构建成功。[结论]靶向Bcl-2基因转录shRNA重组质粒的成功构建,为下一步利用该重组体干扰肿瘤细胞中Bcl-2的mRNA转录,探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础。
- 周琦张玉诺刘方欣龚旭
- 关键词：基因BCL-2重组质粒
- RNAi表达载体对卵巢癌Bcl-2基因表达的抑制作用被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨Bcl-2基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)表达载体对卵巢癌SKOV3细胞Bcl-2基因表达的抑制作用。方法:构建针对Bcl-2基因的RNAi表达载体,脂质体法转染卵巢癌SKOV3细胞株,应用RT-PCR及流式细胞仪检测其对Bcl-2基因mRNA及蛋白表达的影响。结果:构建的两种表达载体均抑制了Bcl-2基因的mRNA及蛋白的表达,其中转染2号载体的SKOV3细胞Bcl-2基因mRNA表达仅相当于对照组的32.3%,蛋白抑制率达60.18%。结论:RNAi表达载体可以有效抑制Bcl-2基因的表达。
- 张玉诺龚旭刘方欣周琦
- 关键词：RNA干扰人卵巢癌细胞BCL-2基因
