国家自然科学基金(30000076)
- 作品数：13 被引量：128H指数：8
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- 相关机构：第四军医大学西京医院西安市中心医院第四军医大学更多>>
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- NF-κB在人肝细胞肝癌中的表达及与HBV X蛋白的关系被引量：10
- 2002年
- 目的 :研究核转录因子NF κB在人肝细胞肝癌组织中的表达及其与乙型肝炎病毒 (HBV)X蛋白的关系。方法 :用免疫组织化学S P法 ,检测 5 2例人肝细胞肝癌组织中核转录因子NF κB及HBVX蛋白的表达 ;用质脂体介导的基因转染法将HBVx基因真核表达载体pcDNA3 1 HBX转染入人肝癌细胞系HCC 92 0 4 ,检测肝癌细胞内核转录因子NF κB的表达。结果 :5 2例人肝细胞肝癌组织均有核转录因子NF κB的广泛表达 ,并且在 11例HBVX蛋白阳性的肝癌组织 ,核转录因子NF κB位于肝癌细胞胞质和胞核 ,而在 4 1例HBVX蛋白阴性的肝癌组织 ,核转录因子NF κB位于肝癌细胞的胞质。将HBVx基因真核表达载体 pcDNA3 1 HBX转染入人肝癌细胞系HCC 92 0 4 ,并在稳定表达X蛋白的肝癌细胞 ,核转录因子NF κB定位于其胞质和胞核 ,而未进行基因转染的亲体细胞 ,核转录因子NF κB仅定位于细胞质 ,细胞核无核转录因子NF κB的表达。结论 :核转录因子NF κB在人肝细胞肝癌组织中广泛表达 ,人肝细胞肝癌中存在着核转录因子NF κB的异常激活 ,并且核转录因子NF κB的异常激活与HBVX蛋白有关 ,X蛋白可激活核转录因子NF κB ,使其从细胞质转位于细胞核 ,这可能在HBV相关的人原发性肝细胞肝癌的发生中起一定作用。
- 郭双平翟宇强王文亮赵一岭章必成
- 关键词：HBVX蛋白肝细胞肝癌乙型肝炎病毒X蛋白
- 一种新的抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达及生物学意义(英文)被引量：9
- 2002年
- 背景与目的:PTEN基因是新发现的一种抑癌基因,定位于人染色体10q23。它的缺失和突变可能构成一个新的信号转导途径,与人类恶性肿瘤的发生普遍相关。资料报道,肾细胞癌有抑癌基因PTEN的缺失和突变。但目前尚未见到关于抑癌基因PTEN在肾细胞癌中表达的研究,本实验研究抑癌基因PTEN在肾细胞癌的表达和生物学意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测5例正常肾组织、18例癌旁肾组织和40例肾细胞癌组织中抑癌基因PTEN的表达;分析抑癌基因PTEN的表达与肾细胞癌病理类型、淋巴结转移之间的关系。结果:5例正常肾组织和18例癌旁肾组织均有较强的PTEN蛋白的表达,正常肾组织和癌旁肾组织PTEN蛋白的表达强度、阳性细胞的分布形式无明显差异。肾小管上皮细胞的胞质呈PTEN蛋白阳性,免疫组化染色程度较强,肾小球无PTEN蛋白的表达。抑癌基因PTEN在肾细胞癌中的表达不同于正常肾组织和癌旁肾组织,12.5%呈PTEN蛋白阴性,17.5%呈弱阳性,70%呈阳性或强阳性。PTEN蛋白阴性、弱阳性和阳性的肾细胞癌,肾门淋巴结转移率分别为80%,51.74%,10.71%。PTEN蛋白阴性和弱阳性肾细胞癌的肾门淋巴结转移率与PTEN阳性者比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:本实验提示肾细胞癌中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和异常,可能与肾细胞癌的发生。
- 郭双平翟宇强王文亮马福成
- 关键词：抑癌基因PTEN肾细胞癌生物学
- 核转录因子-κB在肾细胞癌组织中的表达及意义被引量：8
- 2002年
- 目的 研究肾细胞癌组织中核转录因子κB(NF κB)的表达及意义。方法 应用免疫组织化学S P法检测5例正常肾组织、1 8例癌旁肾组织和 40例肾细胞癌组织中NF κB的表达 ,并分析NF κB表达与肾细胞癌病理类型的关系。结果 5例正常组织和 1 8例癌旁肾组织均有NF κB的表达 ,在肾小管上皮细胞的胞质表达较强 ,肾小球毛细血管球和肾小球囊壁层细胞表达较弱。在 40例肾细胞癌组织中 ,NF κB主要表达于癌细胞的胞质和部分癌细胞的胞核。结论 正常肾组织和癌旁肾组织中 ,NF κB存在于肾小管上皮细胞的胞质 ,而癌细胞在胞质和 /或胞核。肾癌细胞核中表达的是NF κB家族p65/p50成员 ,它可能在肾细胞癌的发生。
- 郭双平翟宇强王文亮马福成
- 关键词：NF-KB肾细胞癌肾肿瘤
- 乳腺癌中核转录因子-κB的表达及意义被引量：13
- 2002年
- 目的 探讨乳腺癌组织中核转录因子 κB (nucleartranscriptionfactor κB ,NF κB)的表达及意义。 方法 应用免疫组织化学SP法 ,检测 2 8例乳腺癌和 2 1例乳腺癌旁组织中NF κB的表达 ,并分析NF κB的表达与乳腺癌淋巴结转移的关系。结果 2 1例乳腺癌旁组织中均有NF κB的表达 ,主要定位于乳腺小叶导管上皮细胞和腺泡上皮细胞的胞质。 2 8例乳腺癌组织中均有NF κB表达 ,但表达程度强弱不等 ,其表达有两种形式 :①NF κB在癌细胞的胞质及部分癌细胞的胞核中均呈阳性表达 ;②NF κB的阳性表达定位于癌细胞的胞核 ,而细胞质为阴性表达。NF κB表达强度与乳腺癌淋巴结转移无关 ,而NF κB在癌细胞中的定位与乳腺癌淋巴结转移相关 ,癌细胞的胞核呈阳性表达者 ,淋巴结转移率为 80 % ;而癌细胞的胞质和胞核同时呈阳性表达者 ,淋巴结转移率为 2 2 % (χ2 =8.42 ,P<0 .0 5 )。结论 NF κB表达于乳腺癌旁组织中的导管上皮细胞、腺泡上皮细胞及肌上皮细胞的细胞质 ,细胞核中无表达。在乳腺癌组织中NF κB表达于癌细胞的胞质和 /或胞核 ,NF κB可能在乳腺癌的发生、发展中起一定作用。
- 郭双平王文亮翟宇强马福成
- 关键词：乳腺癌核转录因子-КB免疫组织化学
- PTEN蛋白在肝细胞肝癌中的表达及意义被引量：14
- 2001年
- 目的 探讨 PTEN蛋白在肝细胞肝癌 (hepatocellu-lar carcinoma,HCC)中的表达及其临床病理意义 .方法 应用免疫组织化学 SP法 ,用 PTEN兔抗人多克隆抗体检测 5 6例 HCC组织 ,17例肝硬化组织和 3例正常肝组织中 PTEN蛋白的表达 ,同时结合临床病理进行分析 .结果 5 6例 HCC组织中 ,PTEN蛋白的阳性表达率为 71% (4 0 / 5 6 ) ,其中低分化 HCC的阳性率最低 ,为 5 7% (12 / 2 1) .G1 ,G2 级与 G3 级HCC组织中的 PTEN蛋白阳性表达率具有显著性差异 (P<0 .0 5 ) .17例肝硬化组织中 ,阳性表达率为 94% (16 / 17) .HCC与肝硬化组织中 PTEN蛋白的表达具有显著性差异 (P<0 .0 5 ) .HCC组织中存在较高比例的 PTEN蛋白表达缺失 ,且恶性程度最高的 HCC组织中 ,PTEN蛋白的阳性表达率最低 .结论 在 HCC的发生发展过程中 ,PTEN蛋白表达缺失起着一定作用 ,且其缺失主要发生于肝癌晚期 .
- 王知力王文亮郭双平曾建新
- 关键词：PTEN蛋白肝细胞癌免疫组织化学基因表达
- 抑癌基因PTEN在肝癌组织中的突变及其对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用被引量：29
- 2006年
- 目的探讨抑癌基因PTEN在人原发性肝癌组织中的突变及其对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用。方法(1)聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)法和序列分析法检测42例人原发性肝癌组织中抑癌基因PTEN第5、8外显子的突变。(2)脂质体介导的基因转染法将野生型PTEN基因、突变型PTEN基因的真核表达载体pEGFP-wt-PTEN、pEGFP-PFEN;G129R分别转染不表达内源性PTEN蛋白的人肝癌细胞系HHCC,G418筛选稳定表达PTEN蛋白的克隆,MTT比色实验分析测定细胞的增殖能力。以未转染基因的HHCC细胞和转染空载体pEGFP-C1的HHCC细胞为对照。(3)TNF-α诱导上述细胞凋亡,流式细胞仪测定凋亡细胞比例;Western印迹法检测细胞内磷酸化Akt(Ser473)的表达。结果(1)在4例肝癌组织中检测出PTEN基因第5外显子的异常突变条带(9．5％,4／42)。(2)转染野生型PTEN基因的HHCC细胞生长明显抑制,而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞的增殖能力与对照组比较差异无统计学意义。(3)TNF-α诱导分别转染野生型、突变型PTEN基因、空载体的HHCC细胞和未转染基因的HHCC细胞凋亡,细胞凋亡率分别为13．8％、8．1％、4．6％、3．3％,与转染空载体的HHCC细胞比较,转染野生型PTEN基因的HHCC细胞凋亡率增高(P<0．05);而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0．05)。Western印迹检测显示未经基因转染的HHCC细胞内源性Akt水平较低;HHCC细胞经TNF-α作用,其内源性Akt水平增高;转染野生型PTEN基因,可降低TNF-α诱导的肝癌细胞内信号分子Akt (Ser473)的磷酸化水平。结论(1)首次发现原发性人肝癌组织中抑癌基因PTEN发生突变;(2)野生型PTEN基因可抑制肝癌细胞增殖,而突变型PTEN基因丧失对肝癌细胞增殖的调控作用;(3)野生型PTEN基因可降低TNF-α诱导的肝癌细胞内重要的信号分子Akt(ser473)的磷酸化水平,即野生型PTEN基因通过抑制TNF-α诱导的肝癌细胞
- 郭双平王丽王文亮李擒龙王文勇张静
- 关键词：突变增生蛋白激酶类
- 抑癌基因PTEN在肾癌组织中的表达及意义被引量：3
- 2002年
- 翟宇强郭双平王文亮马福成王文勇
- 关键词：抑癌基因PTEN肾癌病理类型
- 抑癌基因PTEN对肝癌细胞增殖的抑制及作用机制被引量：26
- 2005年
- 目的探讨抑癌基因PTEN对肝癌细胞增殖和细胞周期的调控作用。方法构建野生型PTEN基因和突变型PTEN基因的真核表达载体pEGFP-WT-PTEN和pEGFP-PTEN;G129R。采用脂质体介导的基因转染法,分别将上述载体转染不表达PTEN蛋白的人肝细胞肝癌细胞系HHCC,经G418筛选,获得稳定表达PTEN蛋白的细胞克隆。以流式细胞仪测定细胞周期,以Westernblot法分析稳定表达PTEN蛋白的肝癌细胞内源性的磷酸化AKT表达水平,同时与未进行基因转染和转染空载体pEGFP-C1的HHCC细胞进行对照。结果稳定表达野生型PTEN蛋白的肝癌细胞,细胞生长受到明显抑制,与转染空载体的HHCC细胞比较,G1期细胞比例显著增高,G2期和S期细胞比例显著降低,且差异有统计学意义(P<0.05);而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞,与转染空载体的HHCC细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与转染空载体的HHCC细胞比较,稳定表达野生型PTEN蛋白的HHCC细胞,其内源性磷酸化AKT水平明显减低;而转染突变型PTEN基因的HHCC细胞,其AKT水平无明显变化。结论野生型PTEN基因对肝癌细胞周期具有调控作用,而突变型PTEN基因丧失对肝癌细胞周期的调控作用;野生型PTEN基因可能通过降低AKT的活化而实现对肝癌细胞周期的调控。
- 郭双平王文亮王文勇李擒龙
- 关键词：抑癌基因PTEN细胞增殖细胞周期肝肿瘤
- 丙型肝炎及其肝硬化组织中病毒核心蛋白及p53和Bcl-2的表达与相关性研究被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨丙型肝炎及其肝硬化组织中丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白、突变p53、Bc l-2的表达及其相关性,探讨HCV核心蛋白是否能促进p53突变和Bc l-2的表达。方法:收集HCV表达阳性的肝炎、肝硬化组织23份,采用免疫组化Envision法检测HCV核心蛋白、突变p53、Bc l-2的表达,并分析三者间的关系。结果:核心蛋白和突变p53的阳性表达主要定位于细胞核中,Bc l-2的阳性表达主要定位于细胞质中;在核心蛋白表达阳性的组织中,突变p53的阳性表达率为87.0%,Bc l-2的阳性表达率为95.7%,三组间阳性强度的差异无显著性意义(P=0.095);HCV-C蛋白与突变p53、Bc l-2阳性强度两者间相关性检验的P值分别为0.011和0.012,相关系数r分别为0.69和0.72;突变p53与Bc l-2两者相关性检验P=0.007,r=0.72。结论:三种蛋白的表达有相关性;HCV核心蛋白可能促进野生p53突变;核心蛋白和突变p53都有可能促进Bc l-2蛋白的表达。
- 张志培王文亮江逊赵佐庆成胜权郭双平
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白突变P53BCL-2丙型肝炎肝硬化
- 肝癌组织中PTEN基因蛋白的表达及其与微血管密度的相关性被引量：6
- 2004年
- 目的 :研究原发性肝癌 (HCC)组织中PTEN蛋白的表达及与肿瘤微血管密度 (MVD)之间的相关性 .方法 :应用免疫组织化学SP法检测 5 6例原发性肝癌组织及 4例肝硬化和 1例正常肝组织中PTEN蛋白的表达并对肿瘤MVD计数 ,分析其意义及两者间的相关性 .结果 :肝癌组织中PTEN阳性染色主要定位于细胞核中 ,总阳性率为 4 2 .9% (2 4 / 5 6 ) ;癌旁组织中PTEN阳性染色主要定位于细胞质 ,阳性率为1 0 0 % (32 / 32 ) ,在肝癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织 (P <0 .0 1 ) ,且其表达强度在HCC病理分级中有差异 ,同时 ,在肿瘤TNM分期中各期PTEN阳性率有显著差异 ,而发生肝内转移和肿瘤直径大于 5cm的肝癌组织PTEN阳性率低于未转移和肿瘤直径小于 5cm的肝癌组织 .肝癌组织中MVD为 4 0± 1 1 ,MVD值随着肿瘤TNM分期的增高而增大 .且MVD在无包膜肝癌中及有肝内转移肝癌中比有包膜和无肝内转移的高 .肝癌组织中PTEN的表达与肿瘤MVD相关性分析两者呈显著负相关 ,即高PTEN表达的HCC中微血管计数较低 ,而低PTEN表达的HCC微血管计数增高 .结论 :PTEN蛋白的低表达与血管生成是原发性肝癌发生发展过程中的重要事件 ,且与肿瘤恶性分化程度密切相关 ;
- 王丽王文亮郭双平张勇成胜权
- 关键词：肝细胞癌PTEN基因抑癌基因免疫组织化学微血管密度
