国家自然科学基金(30070945)
- 作品数：5 被引量：31H指数：2
- 相关作者：王光平陈方平周金平唐发清冷如意更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅二医院湖南中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 鼻咽癌细胞系IκBα mRNA表达及其DNA序列分析被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨核转录因子κB抑制蛋白α(inhibitorα of nuclear transcription factorκB,IκBα) mRNA在鼻咽癌细胞系CNE1,CNE2,HNE1和HNE2细胞内的表达并对其DNA序列进行分析。方法:分别从鼻咽癌细胞系CNE1,CNE2,HNE1和HNE2细胞以及HNE1鼻咽癌移植瘤组织中提取细胞总RNA并逆转录成cDNA。随后,用PCR扩增IκBαcDNA并将其产物用于IκBα mRNAa表达分析和DNA序列直接测定或克隆到质粒载体后再测其序列。结果:在鼻咽癌细胞系CNE1,CNE2,HNE1和HNE2细胞内均可检测到IκBα mRNA表达。DNA序列测定结果显示,在HNE1鼻咽癌细胞移植瘤以及CNE1和CNE2鼻咽癌细胞内IκBαcDNA存在DNA多态性以及A825G,A975G,G576A,A655G和C653A基因突变。结论:在鼻咽癌细胞内不仅存在IκBα mRNA的表达,而且其cDNA还存在DNA多态性和基因突变。
- 王光平陈方平付敢
- 关键词：鼻咽癌IΚBΑCDNA
- 复方黄连对NF—κB活化相关基因在鼻咽癌移植瘤组织表达活性的影响被引量：8
- 2004年
- 目的探讨复方黄连抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的分子机制。方法应用高通量互补DNA(cDNA)表达芯片杂交以及逆转录 — 聚合酶链式反应技术 ,分析复方黄连处理后CNE1和HNE1鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤组织NF—κB活化相关基因信使RNA(mRNA)的表达。结果复方黄连在抑制移植瘤生长的同时 ,尚可改变包括TRAF5、TRAF6、TRAP2、p67、p68激酶、IκBα以及LAP—1在内的一些NF—κB活化相关基因在鼻咽癌移植瘤组织的表达。其中 ,IκBα和TRAF6基因的表达为上调 ,其余基因的表达均为下调。结论复方黄连对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用 。
- 王光平唐发清周金平田道法陈方平冷如意
- 关键词：CDNA芯片复方黄连移植瘤鼻咽癌
- 重组突变型IκBα cDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的诱导作用
- 2007年
- 目的:探讨突变型IκBα cDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的作用。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)首先从CNE2鼻咽癌细胞中扩增突变型IκBα cDNA并将其克隆到pCLXSN逆转录病毒载体。然后,用脂质体介导的方法将含有该突变型IκBα cDNA的重组逆转录病毒载体转移到CNE1鼻咽癌细胞并用AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析转染细胞凋亡情况。结果:通过RT-PCR技术,从CNE2鼻咽癌细胞扩增到IκBα cDNA并成功将其克隆到pCLXSN载体。将该重组逆转录病毒载体转染CNE1细胞约48小时后,AnnexinⅤ阳性细胞数为66.67%,而仅转染空白pCLXSN载体的CNE1细胞,An-nexinⅤ阳性细胞数为4.1%。结论:突变型IκBα cDNA能够诱导CNE1鼻咽癌细胞凋亡的发生。
- 银晖王光平易红冷如意齐振华付敢陈方平
- 关键词：细胞凋亡突变型CNE1细胞鼻咽癌
- 应用cDNA表达芯片研究复方黄连对CNE1鼻咽癌移植瘤基因表达的影响被引量：22
- 2003年
- 目的 :研究复方黄连对鼻咽癌裸鼠移植瘤基因表达的影响。方法 :培养的鼻咽癌细胞系CNE1细胞接种Balb/C裸鼠 ,待移植瘤形成后灌喂复方黄连 ,然后从移植瘤组织提取RNA ,经逆转录标记后的cDNA作为探针 ,与高通量cDNA表达芯片杂交并用激光共聚焦扫描仪分析基因表达。通过逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)半定量技术进一步分析差异表达基因的表达。结果 :复方黄连处理移植瘤裸鼠 30d后 ,移植瘤明显减小 ,其抑瘤率为 2 9.5 %。同时 ,移植瘤组织基因表达发生显著变化。用该复方处理的CNE1鼻咽癌移植瘤组织有 147条基因表达发生改变 ,包括 10 2条下调表达的基因和 45条上调表达的基因。RT PCR半定量技术分析证实有 3条基因为真正差异表达 ,它们分别是MAD3,H731和CHK1基因。其中 ,MAD3和H731基因表达上调 ,CHK1基因表达下调。结论 :复方黄连可抑制CNE1鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长并可影响其基因的表达 ,它对CNE1鼻咽癌移植瘤的抑制作用与其调节移植瘤基因表达密切相关。
- 王光平唐发清周金平
- 关键词：复方黄连CNE1鼻咽癌移植瘤基因表达
- 新辅助化疗诱导结肠癌细胞凋亡及IκBα mRNA的表达
- 2003年
- 目的探讨羟基喜树碱 (HCPT)联合 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)和甲酰四氢叶酸钙 (CF)新辅助化疗诱导结肠癌细胞凋亡及其可能的分子机制。方法2 0例结肠癌患者术前静脉滴入HCPT 10mg/d ,5 Fu5 0 0mg/d,CF 2 0 0mg/d ,共 5天即一周期。术中取结肠癌组织标本 ,应用DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的生化改变 ,比色法检测Caspase 3的活性 ,RT PCR半定量技术检测IκBαmRNA的表达 ,并与同期术中取得的 2 0例术前未化疗患者的结肠癌组织及癌旁正常肠组织作比较。结果①新辅助化疗组结肠癌细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现明显的特征性梯状条带 ,术前未化疗组结肠癌细胞无明显的DNA梯状条带 ;②结肠癌细胞Caspase 3活性新辅助化疗组较术前未化疗组结肠癌细胞及癌旁正常结肠细胞明显增高 (P <0 .0 5 ) ;③新辅助化疗诱导后 ,结肠癌细胞IκBαmRNA的表达明显上调 (P <0 .0 5 )。结论HFCF方案新辅助化疗可能通过上调IκBαmRNA表达、激活Caspase 3活性诱导人体内结肠癌细胞凋亡而起作用。
- 冯斌陈子华王光平石永忠
- 关键词：辅助化疗结肠癌细胞凋亡IΚBΑ羟基喜树碱甲酰四氢叶酸钙
