国家自然科学基金(30672615)
- 作品数：14 被引量：135H指数：8
- 相关作者：刘春生王学勇刘东吉南博李贝宁更多>>
- 相关机构：北京中医药大学中国医学科学院北京协和医学院中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 甘草β-香树酯醇合成酶的编码区克隆与序列分析被引量：12
- 2009年
- 目的:对甘草β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,bAS)编码区进行克隆及序列分析。方法:根据已报道的光果甘草bAS基因的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR技术,以甘草主根总RNA为模板扩增出甘草bAS基因的编码区序列。结果:序列分析表明,所克隆的bAS基因编码区长为2 289 bp,编码762个氨基酸残基,命名为GubAS(GenBank注册号:FJ627179),推测的氨基酸序列与光果甘草、光叶百脉根、豌豆、截形苜蓿、大豆的氨基酸序列同源性最高,分别达99%,92%,90%,90%,89%。结论:首次报道了甘草bAS基因的编码区序列,为进一步研究三萜类化合物的生物合成机制及为甘草优良品种的选育奠定基础。
- 沈湛云刘春生王学勇
- 关键词：甘草
- 不同产地栽培辽细辛的挥发油研究被引量：27
- 2010年
- 目的:研究不同产地栽培辽细辛挥发油的成分差别,为正确评价不同产地细辛药材的质量提供依据。方法:采用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)仪对不同产地栽培辽细辛的挥发油进行分离测定,结合计算机检索对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对含量。结果:从本溪、桓仁、宽甸、新宾、通化5个产地辽细辛挥发油中分别鉴定出59,59,66,64,62种成分,占其挥发油总量的96.67%,97.13%,97.74%,97.09%,97.54%。在被鉴定的成分中有33种成分是5个产地栽培辽细辛挥发油所共有的,其主要成分为甲基丁香酚和黄樟醚。结论:不同产地栽培辽细辛挥发性成分存在差别,活性成分的积累与环境有一定的相关性。
- 刘东吉刘春生
- 关键词：挥发油GC-MS
- 栽培甘草不同部位甘草酸含量的单株分析被引量：10
- 2007年
- 刘春生段天璇王文全牛小宇
- 关键词：甘草酸含量栽培甘草同部位药材质量甘草资源
- 甘草有益微生物的研究进展被引量：1
- 2009年
- 植物体内大量分布的微生物对植物产生的影响已成为人们关注的热点,特别是那些有益的影响可对植物的生长及活性成分的形成产生一定的作用。甘草作为一种大宗中药,其栽培品的质量一直是人们所关心的问题,甘草有益微生物对提高甘草的品质有重要作用。该文综述了甘草有益微生物的研究进展,以期对提高栽培甘草的质量起到指导意义。
- 崔浩然牛小宇刘春生
- 关键词：甘草内生菌根瘤菌菌根真菌
- 乌拉尔甘草HMGR基因cDNA的克隆与序列分析被引量：6
- 2011年
- 目的:对乌拉尔甘草3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3methylglutary CoA reductase,HMGR)的cDNA克隆并进行序列分析。方法:根据NCBI数据库中的豆科其他物种HMGR的cDNA保守区设计引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从甘草根中获得目的基因;利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开发阅读框,Prosite分析蛋白质的基本结构域,Clustal x比对已有HMGR的氨基酸序列,并构建进化树。结果:得到1个全长为1 842 bp的HMGR的cDNA序列,含有1 722 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码573个氨基酸,具有HMGR家族的特异序列,推测的氨基酸序列与豌豆、蒺藜苜蓿的氨基酸序列一致性分别为84%,76%。结论:对甘草HMGR基因的cDNA进行了克隆,为进一步研究3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A在甘草酸生物合成途径中的作用提供了理论依据。
- 荣齐仙许巧仙刘春生黄璐琦
- 关键词：甘草HMGRRACE
- 道地产区甘草遗传多样性的ISSR分析被引量：18
- 2010年
- 目的:对4个核心道地产区甘草的遗传多样性进行研究,分析其遗传变异程度,为探讨道地药材的遗传机制奠定基础。方法:采用ISSR分子标记技术研究来自4个产地155个甘草个体的遗传多样性。结果:8条引物共扩增出56条多态性条带,占总带数的75.68%,每条引物扩增多态位点百分率(PPB)在44.44%～100%。聚类分析显示,各产地野生品基本能够各聚一类,内蒙古、宁夏、甘肃甘草遗传特征较为稳定,陕西甘草的变异幅度较大。结论:不同道地产区甘草的遗传变异具有明显的地域性特征,甘草道地药材的形成具有遗传基础。
- 李贝宁南博刘春生周应群刘娟
- 关键词：甘草道地产区ISSR
- 甘草鲨烯合酶基因及cDNA的克隆与序列分析被引量：14
- 2011年
- 目的:对甘草鲨烯合酶(SQS)基因的cDNA及DNA进行克隆及序列分析。方法:根据已报道的光果甘草SQS1基因的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR的方法,提取甘草根的RNA然后反转录成cDNA,以cDNA为模板,扩增出SQS基因的cDNA序列,以甘草总DNA为模板,扩增SQS的DNA序列。结果:序列分析表明,克隆获得的甘草SQS1的cDNA编码区为1 242 bp,编码413个氨基酸残基,命名为GuSQS1,登录号为GQ266154,与卢虹玉等报道的甘草的2个SQS(SQS1和SQS2)的氨基酸序列一致性为98.55%,88.62%,对应DNA序列全长为4 484 bp,含有13个外显子,12个内含子,登录号为GQ180932。结论:甘草SQS的cDNA及DNA序列的获得为进一步研究甘草酸生物合成机制提供了基础。
- 荣齐仙刘春生黄璐琦张宁南博呙未
- 关键词：甘草鲨烯合酶RT-PCR
- 基于HMGR、SQS1、β-AS基因CNVs的甘草道地性机制研究被引量：24
- 2012年
- 本文利用real-time PCR方法对不同产地甘草的3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)、鲨稀合成酶1(squalene synthetase 1,SQS1)、β-香树脂醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因的拷贝数进行了研究,发现不同产地的HMGR基因存在1～3个拷贝数变异,SQS1基因存在1～2个拷贝数变异,未发现β-AS基因拷贝数变异。甘草HMGR、SQS1、β-AS基因拷贝数存在5种自然组合类型:A型(2+1+1)、B型(1+1+1)、C型(3+2+1)、D型(2+2+1)和E型(3+1+1),其中内蒙古杭锦旗甘草存在A、B两种类型,A与B的比例为1∶1.3;内蒙古赤峰甘草也存在A、B两种类型,但A与B比例为3∶1;宁夏盐池甘草存在A、B、C、D 4种类型,A/B/C/D比例为1∶5.1∶1∶2,A/B比例为1∶5.1;甘肃民勤甘草存在A、B、E 3种类型,A/B/E比例为4.1∶2.1∶1,A/B比例为2∶1。本研究证明中药功能基因基因组拷贝数变异(copy number variations,CNVs)与产地具有相关性,可能是道地药材形成的机制之一。
- 刘颖刘东吉刘春生廖彩丽程小丽
- 关键词：HMGR道地性甘草
- 环境对栽培甘草遗传多样性的影响研究被引量：4
- 2011年
- 目的研究道地产区的甘草经过栽培后遗传多样性的变化,从分子层面探讨中药"离其土,则失其味也"的科学性,为栽培甘草选育优良品种提供依据。方法采用ISSR-PCR技术对6组24个栽培甘草样品进行遗传多样性分析。结果用6条引物对24个样品DNA进行PCR扩增,共得到43个条带,其中29个条带具有多态性,多态性百分比为67.45%。用NTSYS-pc2.10分析软件进行聚类分析,基本可将不同道地产区的栽培甘草较好的区分,但同一产区种子栽培的甘草与种苗栽培的甘草并不能较好的聚类。结论栽培甘草不同产地遗传多样性都很丰富,同一产地的甘草由于不同的栽培代数遗传多样性有所改变,说明甘草经过多代有性繁殖后遗传多样性会有部分丢失,这可能与环境的选择有关,为优质甘草的栽培育种提供理论基础。
- 刘娟李贝宁刘春生周应群
- 关键词：甘草遗传漂变ISSR
- 甘草药材中淀粉含量和甘草酸含量的相关性研究被引量：8
- 2009年
- 目的：探讨甘草药材中淀粉含量和甘草酸含量的关系，为提高栽培甘草药材中的甘草酸含量提供依据。方法：采用HPLC和碘．淀粉比色法分别测定甘草单株中的甘草酸和淀粉含量。结果：甘草药材中淀粉质量分数为1．39％～10．82％，甘草酸质量分数为0．63％～3．51％。结论：甘草药材中淀粉含量和甘草酸含量负相关，可以通过调控甘草中淀粉含量提高甘草药材质量。
- 刘春生王学勇刘仁权南博张艳洁
- 关键词：甘草酸含量淀粉含量
