江西省自然科学基金(2007GZY1470)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 相关作者：汪泱娄远蕾谢安阮琼芳冯年花更多>>
- 相关机构：南昌大学南昌大学第一附属医院南昌大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人诱导性多能干细胞的培养及鉴定被引量：7
- 2010年
- 目的建立稳定的人诱导性多能干细胞(iPS细胞)培养体系。方法取第3～5代的小鼠胚胎成纤维细胞,丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态;观察拟胚体形成能力;RT-PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果(1)小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。(2)生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形,边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核/质比高。RT-PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体(EB)。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。
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- 关键词：细胞培养饲养层
- 人诱导性多能干细胞定向分化为神经干细胞的实验研究被引量：7
- 2010年
- 目的观察人诱导性多能干细胞(iPS细胞)定向分化为神经干细胞(NSCs)的潜能。方法用维甲酸(RA)诱导人iPS细胞向NSCs分化。倒置显微镜下观察iPS细胞的形态变化,RT-PCR检测NANOG、OCT4、SOX2的表达;免疫组织化学方法检测Nestin、SOX2、β-TubulinШ和GFAP的表达。结果 RA诱导后第4天,贴壁的拟胚体出现了早期神经祖细胞特有的神经管样结构并不断增多,细胞表达神经巢蛋白Nestin,而对照组未观察到神经管样结构。神经管样结构内的细胞能分化为β-TubulinШ阳性的神经元,但GFAP阳性的星形胶质细胞少见。结论人iPS细胞具有定向分化为NSCs的潜能,并能模拟神经发育过程。
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- 关键词：诱导性多能干细胞神经干细胞维甲酸分化
- 胎肝源性细胞促进人骨髓间充质干细胞向肝细胞的定向分化被引量：1
- 2009年
- 目的：探讨人胎肝源性细胞（HFLC）对骨髓间充质干细胞（MSCs）体外诱导分化为肝系细胞的效应和机制。方法：药物流产的胎肝源性细胞和Hoechst33342标记的人MSCs，按培养方式不同，分为HFLC和MSCs直接接触共培养组及transwell共培养组，用倒置显微镜观察细胞形态，在不同时段用免疫细胞荧光法检测肝系细胞标志如AFP、CK-18和CK-19并进行糖原染色。结果：在直接接触共培养组，免疫细胞荧光法显示分化细胞表达AFP、CK-18和CK-19，并随分化时间延长表达量增加；同时，分化细胞具有贮存糖原功能，PAS染色显示分化细胞糖原染色阳性。而在transwell共培养组，分化细胞未检测到肝系细胞标志物的表达及糖原的贮存。结论：HFLC与MSCs的直接接触共培养体系的微环境，有利于MSCs定向分化为肝系细胞。
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- 关键词：骨髓间充质干细胞共培养肝细胞分化
- 后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞向肾系细胞分化的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨胚胎后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为肾系细胞的作用。方法:小鼠D3系胚胎干细胞通过悬滴法制备拟胚体(EBs),将EBs细胞与取自孕12.5 d小鼠胚胎的后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化,即为共培养诱导组,设EBs细胞自然分化为对照组;采用免疫荧光染色法检测共培养第3、5、7 d后的EBs细胞Pax2、WT-1蛋白表达情况,通过逆转录PCR法检测诱导3 d后的EBs细胞Pax2、WT-1、Lim1、Sall1、Emx2、GDNF、Wnt4、BMP7、Nephl、Nephrin、KSP和CD24 mRNA的表达情况。结果:EBs细胞在诱导的第3 d即出现了全部肾发育相关基因的表达,其中共培养组Pax2、WT-1、Emx2、GDNF、Nephl、Nephrin、KSP和CD24的表达强于对照组;免疫荧光结果显示在诱导3 d后的EBs细胞中可观察到Pax2阳性细胞,阳性细胞数在共培养第5、7 d增多;诱导5 d后可观察到WT-1阳性细胞,对照组未见Pax2或WT-1蛋白阳性细胞出现。结论:后肾细胞微环境可促进ESCs分化为肾系细胞。
- 汪泱张立行王共先谢安娄远蕾阮琼芳崔苏萍杨阳
- 关键词：胚胎干细胞
- 诱导性多能干细胞体外定向诱导分化的研究进展
- 2009年
- 胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究已成为发育生物学和细胞移植治疗学的研究热点，但伦理及免疫排斥问题一直阻碍胚胎干细胞（ES）的研究和临床应用。近两年，科学家成功地从多种成体细胞获得了诱导性多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞具有和胚胎干细胞相似的特性，由于其可来自自体成体细胞，因而可避开伦理及免疫排斥问题，是胚胎干细胞良好的替代材料，具有广阔的应用前景。iPS只有诱导分化为成熟的功能细胞才能用于疾病的治疗。主要介绍iPS细胞向成熟细胞分化的研究现状及目前存在的一些问题。
- 冯年花汪泱
- 关键词：诱导性多能干细胞胚胎干细胞分化
