安徽省自然科学基金(KJ2007A018)
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
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- 相关机构：安徽工程大学安徽古井贡酒股份有限公司更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 葡枝根霉TP-02中的内切葡聚糖苷酶基因在枯草芽胞杆菌WB600中的克隆和表达
- 2012年
- 利用cDNA文库筛选的方法将葡枝根霉TP-02中的内切葡聚糖苷酶基因(eg2和eg3)在枯草芽胞杆菌WB600中成功地克隆和表达。阳性克隆在羧甲基纤维素钠(CMC-Na)培养基中发酵36 h内切葡聚糖酶活达到最大值,分别为1.174和1.034 IU/mL,相比出发菌株发酵时间缩短了54 h。用G100分离纯化其发酵上清液后,用SDS-PAGE电泳方法,测得EGⅡ和EGⅢ分子量分别为44、46 ku。
- 黄辉汤斌
- 关键词：克隆纯化
- 浓香型白酒窖泥中细菌多样性的免培养技术分析被引量：14
- 2012年
- 采用免培养(culture independent)技术直接从浓香型白酒窖泥中提取细菌微生物混合基因组DNA(也叫元基因组DNA),利用细菌16S rDNA通用引物扩增窖泥细菌的序列,根据16S rDNA序列对细菌多样性进行初步分析。采用PCR扩增技术、分子克隆技术以及序列同源性分析等方法测定细菌的16S rDNA,通过与基因数据库中相似菌群序列同源性的比较,得到样品菌种多样性,分别构建系统发育树。结果显示,细菌含有几大类群,表现出高度的细菌多样性。共分为Uncultured bacterium、Clostridium、Lactobacillus、Eubacterium和Syntroph-omonas五个细菌分类。
- 汤斌刘金英周庆伍李安军万春环汤有宏
- 关键词：窖泥免培养法系统发育树
- 葡枝根霉TP-02cDNA文库中两种新的β-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2011年
- 从具有良好降解纤维素能力的葡枝根霉TP-02的cDNA文库中筛选获得两个新的β-葡萄糖苷酶基因bgl1和bgl2,并在毕赤酵母中高效表达。阳性克隆在MM培养基中发酵84h和1%的甲醇的诱导的情况下,产生的β-葡萄糖苷酶酶活达到峰值分别为8.2IU/mL和9.9IU/mL,分别较原菌株葡枝根霉的β-葡萄糖苷酶酶活提高了1倍和1.41倍,并且其发酵时间缩短12h。用G100分离纯化其发酵上清液后,用SDS-PAGE电泳方法,测得它们的分子量分别为46kDa、47kDa,而且条带清晰,所以用甲醇诱导的重组毕赤酵母发酵的上清液较大肠杆菌易于纯化。
- 汤斌丁丽霞潘海波汤文晶张凤琴
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶毕赤酵母纯化
- 免培养技术对浓香型白酒大曲中细菌多样性的影响被引量：14
- 2011年
- 采用免培养(culture independent)技术直接从浓香型白酒大曲中提取细菌微生物基因组DNA,利用细菌16S rDNA通用引物扩增大曲混合微生物的16S rDNA,采用PCR扩增技术、分子克隆技术以及序列同源性分析等方法测定大曲中细菌的16S rDNA基因全序列,通过与基因数据库中相似菌群序列同源性的比较,构建系统发育树。结果显示,成熟的大曲中细菌共分为Lactobacillus,Pantoea,Enterobacter,Klebsiella,Leuconostoc,Erwinias,Pseudomonas,Bacillus licheniformis几大类群,表现出高度的细菌多样性。
- 汤斌刘金英周庆伍李安军万春环汤有宏
- 关键词：大曲免培养法系统发育树
