国家高技术研究发展计划(2012AA101401)
- 作品数：6 被引量：30H指数：3
- 相关作者：王伟马晓晓陈宝潘风山冯英更多>>
- 相关机构：华东理工大学浙江大学郑州轻工业学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 农田土壤中病原真菌DNA提取方法的研究
- 2013年
- 通过比较不同的研磨、洗涤、裂解和沉淀方法,成功获得一种适于土壤真菌DNA提取的方法.结果表明,采用石英砂研磨、TENP和PBS联合洗涤、SDS高盐裂解、异丙醇沉淀等一系列步骤,所获取的土壤微生物DNA质量最佳.该试验方法可以直接从土壤中提取微生物基因组,尤其适用于土壤病原真菌的提取,所得DNA完全可以直接用于酶切和PCR扩增.该方法高效、价廉、操作简单,对改进土壤病原菌生态的研究方法具有重要价值.
- 王楠王伟
- 关键词：农田土壤病原真菌DNA提取PCR扩增
- 毒死蜱乳油对辣椒根围土壤细菌群落结构的影响被引量：2
- 2016年
- 【目的】了解有机磷杀虫剂毒死蜱对土壤细菌群落结构的作用。【方法】联合微生物平板计数法、末端限制性片段多态性分析,选择PRIMER 5进行群落结构分析,以研究不同浓度的毒死蜱对辣椒根围可培养和不可培养细菌群落结构的影响。【结果】毒死蜱施入后前30 d,3个处理组的可培养细菌较对照组具有显著差异(P<0.05),但在第30天后,处理组可培养细菌数均能恢复到对照水平。采用PRIMER 5对T-RFLP数据进行多角度分析发现,HaeⅢ酶切片段中,对照组C3、处理组Y0和Z2的细菌群落结构较整体聚类较远。HhaⅠ酶切片段中,150μg/g的毒死蜱处理组(Z0)在第0天表现出最大的群落差异。ANOSIM表明,以不同浓度的毒死蜱分组,各组间细菌群落组成差异不显著(HaeⅢ:Global R=0.041,P=0.168;HhaⅠ:Global R=-0.04,P=0.842);以不同取样时间分组时,细菌群落组成差异显著(HaeⅢ:Global R=0.304,P=0.001;HhaⅠ:Global R=0.28,P=0.001)。经SIMPER分析所有TRFs可知,对群落丰度贡献最大的片段分别为TRF239、TRF240、TRF241。在线比对得到其代表菌群有芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、梭菌属(Clostridium sp.)、葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)、八叠球菌属(Sarcina sp.)、假单胞菌属(Pseudomonas sp.)等。【结论】高浓度的毒死蜱会对土壤细菌群落产生影响,抑制根围细菌生长,从而遏制植物的健康生长,因而有必要及时采取措施以减少大量重复使用毒死蜱所带来的危害。
- 陈婷王伟
- 关键词：毒死蜱
- 生防荧光假单胞菌CPF-10对西瓜根围土壤真菌群落的影响被引量：2
- 2013年
- 探讨了生防菌荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens CPF-10对西瓜根围土壤真菌群落结构的影响。采用传统分离培养法,结合变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,研究了施用CPF-10后不同生育期西瓜根围土壤真菌群落结构的变化。结果表明:施入生防菌CPF-10后2周,其对土壤真菌有一定的促进作用;第3～7周时,CPF-10对土壤真菌尤其是部分病原菌有较强的抑制作用;CPF-10对丛枝菌根真菌(AMF)有一定的促进作用,可维持3周左右;收获期后则检测不到CPF-10对土壤真菌群落的影响。生防菌CPF-10对西瓜根围土壤真菌群落产生的短暂影响不会对土壤生态系统构成长期威胁。对比土著真菌及丛枝菌根真菌的DGGE图谱和切胶条带测序结果,发现DGGE技术更适用于分析小范围特定菌属如丛枝菌根真菌的变化。
- 陈胜菊杨洁旭热王伟
- 关键词：荧光假单胞菌土壤真菌丛枝菌根真菌变性梯度凝胶电泳
- 毒死蜱对棉花根际土细菌群落多样性和结构的影响被引量：4
- 2016年
- 通过室内盆栽试验模拟自然环境条件,采用高效液相色谱(HPLC)和末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)技术,研究了土壤使用推荐剂量(5 mg·kg^(-1))及推荐剂量的2倍、3倍和4倍(10 mg·kg^(-1)、15 mg·kg^(-1)、20 mg·kg^(-1))毒死蜱对棉花根际土壤细菌群落多样性和结构的影响,以不施用毒死蜱的土壤为对照。结果表明,5 mg·kg^(-1)、10 mg·kg^(-1)、15 mg·kg^(-1)和20 mg·kg^(-1)毒死蜱在土壤中的半衰期分别为10.04 d、11.36 d、11.55 d和12.16 d,60 d时基本完全降解。毒死蜱处理60 d后,棉花生物量显著降低;毒死蜱浓度越高,棉花生物量越低。无毒死蜱条件下不同取样时间根际细菌多样性无显著差异,毒死蜱处理组前30 d细菌多样性均显著降低,60 d时毒死蜱处理组细菌多样性恢复到正常水平。研究发现毒死蜱浓度越高对细菌多样性抑制作用越显著,恢复越缓慢。主成分分析结果发现,第10 d、30 d和60 d毒死蜱处理组与对照组细菌群落结构差异显著,其中60 d时20 mg·kg^(-1)毒死蜱处理组差异最显著,即使土壤中毒死蜱完全降解,根际细菌群落结构仍不会恢复到正常水平。60 d时,被毒死蜱抑制的细菌有硝化刺菌属(Nitrospina sp.)和Cellulophaga sp.等,被激活的有芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和链霉菌属(Streptomyces sp.)等。可见,毒死蜱的引入,重新构建了土壤细菌群落结构,显著影响棉花生长,对棉花根际土壤微生态环境冲击较大,应对其生态安全性予以重视。
- 程娟万婷婷赵慧慧王伟
- 关键词：毒死蜱半衰期群落多样性群落结构
- 重金属Cr^(6+)耐受细菌的筛选研究被引量：4
- 2016年
- 土壤中重金属Cr6+污染日益严重,其对植物的影响也越来越大,并可通过食物链富集进入人和动物体内,从而危害人畜健康。试验在分别添加0.3和0.5 g·kg-1Cr6+的土样中进行耐性菌株的筛选,以期为微生物修复重金属污染提供技术支持。结果表明,该研究共获得了9株具有较好Cr6+耐性的菌株。它们均可在含0.5,1.0 mmol·L-1Cr6+的LB培养基中生长。其中,编号为J3,J5,J8的菌种耐性达到2 mmol·L-1,在含2 mmol·L-1Cr6+的液体培养基中培养48 h后,培养基中的Cr6+含量分别降低23%,36%,7%。经测定,上述3种菌分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、沙福芽孢杆菌(Bacillus sonorensis)。
- 姜蒙王伟
- 关键词：重金属耐性土壤修复
- 一株镉超积累植物东南景天特异内生细菌的筛选及鉴定被引量：19
- 2014年
- 以我国原生的镉超积累植物东南景天为材料,从其根部筛选到4株对镉具有耐性的内生菌株,它们均可产生生长素(IAA)、铁载体等促生物质.砂培试验发现,接种上述菌株能促进油菜植株的生长,提高植物对镉的积累量,其中,以菌株SaN1的作用效果最显著,可使油菜苗期地上部的生物量和镉积累量分别提高18.6%和45%.生理生化鉴定与16S rDNA分析证明,SaN1为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterum);该菌株接种到LB液体培养基后,12 h进入对数生长期,42 h达到稳定生长期,54 h进入衰亡期;其最佳培养温度为30℃,最适pH为中性.
- 潘风山陈宝马晓晓杨肖娥冯英
- 关键词：东南景天镉内生细菌促生作用巨大芽孢杆菌
