国家高技术研究发展计划(2001AA216051)
- 作品数：11 被引量：28H指数：3
- 相关作者：杜智李涛张金卷朱争艳聂福华更多>>
- 相关机构：天津市第三中心医院中国科学院天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金天津市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝干细胞的研究进展被引量：1
- 2008年
- 肝干细胞是成体干细胞的一种,由于其具有强大的增殖能力,并能分化为具有功能的成熟肝细胞,为肝病的细胞治疗和组织工程提供了重要的细胞来源。现就肝干细胞的来源、标志物、诱导与示踪、体外培养与扩增、分化及其与肝细胞癌的关系作一综述。
- 高强杜智高英堂
- 关键词：肝干细胞肝卵圆细胞胚胎干细胞骨髓源性肝干细胞
- 人胎儿肝干细胞异种移植治疗小鼠暴发性肝功能衰竭被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨人胎儿肝干细胞异种移植治疗暴发性肝功能衰竭伴严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠的可能性与有效性。方法:改进Seglen胶原酶(Ⅳ型)原位灌注结合Percoll密度梯度离心法分离纯化中期妊娠流产的男性胎儿肝干细胞,经肝脏注射移植(106细胞)治疗D-氨基半乳糖(1600mg/kg)诱发的暴发性肝功能衰竭雌性SCID小鼠(治疗组),于移植前及移植后24,48,72h及1周取血测定血氨、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBiL),于移植后1,2,4周取受体肝脏组织,PCR方法检测性别决定因子,并与未移植肝干细胞小鼠(对照组)比较。结果:治疗组小鼠中位生存时间较对照组延长(123.4hvs70.4h)(P<0.05);移植后治疗组血清ALT、TBiL及血氨水平降低,各时间点均低于对照组(P<0.05);治疗组肝脏病理损伤逐渐减轻,存活2周小鼠肝脏组织中性别决定因子呈阳性表达,随时间延长表达增强。结论:人胎儿肝干细胞移植能延长暴发性肝功能衰竭SCID小鼠的存活时间,改善其肝功能及肝脏病理指标。
- 杜智张金卷李涛朱争艳高英堂王毅军聂福华宋继昌
- 关键词：胎儿干细胞干细胞移植小鼠
- 肝细胞移植的研究进展
- 2007年
- 肝细胞移植作为治疗暴发性肝功能衰竭及各种终末期肝病一种安全有效的方法在各种动物模型及临床应用中得到广泛证实,具有创伤小、安全简单、可一肝多用、重复移植、抗原性低等优点。就其细胞来源、移植途径、理论基础及应用等方面的研究进展综述如下。
- 张金卷宋继昌
- 关键词：肝细胞细胞移植生物人工肝
- 胚胎肝干细胞的研究进展被引量：3
- 2004年
- 近年来的研究表明在胚胎肝脏中存在大量的肝干细胞,它们在肝脏的发育中起着重要作用,并且受到各种时序性表达基因的调控。几个研究组采用不同的方法,分别从小鼠、大鼠和灵长类动物的胚胎肝脏分离并鉴定了具有双潜能的肝干细胞。就胚胎肝脏的发育、调控机制以及胚胎肝干细胞的分离、鉴定等方面的研究进展作一综述,并对胚胎肝干细胞的应用前景和今后的研究方向作了展望。
- 张好建何祖平丰美福
- 人胎儿肝干细胞的分离及鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的:探索人胎儿肝干细胞的分离及鉴定方法。方法:改进Seglen胶原酶(IV型)原位灌注结合Percoll密度梯度离心分离纯化4～6个月水囊引产男性胎儿的肝干细胞,CO2培养箱培养,光镜、电镜下观察细胞特点,进行肝干细胞细胞标志SABC免疫组化染色。结果:平均细胞产量(2.10±0.50)×107,细胞活性率为(92.30±1.23)%。光镜下呈游离状态、大小不等的单个细胞,约为正常肝细胞1/5～1/3大小;电镜下细胞表面可见少量短而小的微绒毛状突起,卵圆形细胞核,核/浆比例较大等特点;甲胎蛋白、细胞角蛋白8、19及α-1-抗胰蛋白酶免疫组化染色呈阳性,白蛋白及白细胞共同抗原染色呈阴性表现,培养3周可形成克隆样结构。结论:改进的Seglen胶原酶原位灌注结合Percoll密度梯度离心法可成功分离、纯化人胎儿肝干细胞。
- 张金卷杜智李涛朱争艳王毅军聂福华聂福华
- 关键词：白细胞共同抗原原位灌注男性胎儿水囊引产细胞特点镜下观察
- 胎儿骨髓源性胚胎后亚全能干细胞分离培养及向肝细胞的诱导分化(英文)
- 2009年
- 背景:目前研究认为在胚胎发育后的多种组织中存在一类干细胞群体,可分化为不同胚层的组织细胞;但又不同于胚胎干细胞,随着妊娠期间胚胎的发育胚胎干细胞会逐渐失去部分分化潜能,会出现一些特殊表型或分子标记,如 CD105,称其为胚胎后亚全能干细胞。目的:根据胚胎后亚全能干细胞表达 CD105的特性分离胎儿骨髓源性胚胎后亚全能干细胞,经体内外诱导使其分化为肝细胞样细胞并检测其功能。设计、时间及地点:动物随机分组,细胞分子生物学实验,于 2003-03/2005-03 在天津市第三中心医院卫生部人工细胞工程技术研究中心完成。材料:取 22 周龄左右胎儿股骨和胫骨骨髓分离出胚胎后亚全能干细胞。以雌性成年SCID 鼠作为干细胞移植的受体。CD105 免疫磁珠为德国 Miltenyi Biotec 产品。鼠抗人白蛋白抗体为美国 Sigma 产品。碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子为英国PEPROTECH 产品。方法:利用密度梯度离心结合免疫磁珠方法分离胎儿骨髓 CD105(+)胚胎后亚全能干细胞,体外培养,用含 30 μg/L 肝细胞生长因 20 μg/L 碱性成纤维细胞生长因子的诱导培养基将其向肝细胞样细胞诱导分化。将24 只 SCID 鼠随机分为干细胞治疗组和对照组,每组 12 只,均按 800 mg/kg 的剂量向腹腔内注射 D-氨基半乳糖制备肝损伤模型。造模次日,干细胞移植组鼠在肝原位输注106 左右 CD105(+)细胞,对照组分别输注106左右的CD105(-)细胞或同等体积的培养液。主要观察指标:于干细胞移植后 2,7 d,1,3 个月对肝脏组织行免疫组化检测人源白蛋白表达。结果:免疫磁珠筛选后的细胞免疫细胞化学检测 CD105 呈弱阳性表达;细胞在对数生长期的倍增时间为 30 h 左右;约传 10 代后进入衰退期。SCID 鼠移植胚胎后亚全能干细胞 3 个月后在小鼠肝脏中可见有点状或小灶状的人白蛋白表达,对照组未见表达。结�
- 朱争艳张金卷李涛杜智
- 关键词：骨髓肝细胞样细胞
- 肝干细胞移植治疗大鼠暴发性肝功能衰竭的实验研究被引量：8
- 2006年
- 目的探索肝干细胞移植对暴发性肝功能衰竭大鼠的治疗效果。方法以二乙酰氨基芴(15mg/kgBW)联合2/3肝切除建立雄性大鼠肝干细胞增殖模型,以改进Seglen胶原酶原位灌注及Percoll密度梯度离心方法分离、纯化肝干细胞,经肝脏注射移植(4×106细胞)治疗由D-氨基半乳糖诱导的暴发性肝功能衰竭雌性大鼠,移植前及移植后24、48、72h及1周取血测定肝功能指标如血氨、ALT、TBiL,移植后1、2、4周取受体肝脏组织应用PCR方法进行性别决定因子检测。结果肝干细胞移植可延长暴发性肝功能衰竭大鼠的中位生存时间(P<0.05),移植后肝干细胞移植组大鼠血清ALT、TBiL及血氨水平明显下降,其测定值各时间点组间比较,治疗组明显低于对照组(P<0.01);肝脏病理损伤减轻,肝干细胞移植2周后雌性受体肝脏组织中性别决定因子呈阳性表达,且随时间延长而表达增强。结论肝干细胞移植可延长暴发性肝功能衰竭大鼠中位生存时间,改善肝功能及病理指标。
- 杜智李涛张金卷朱争艳高英堂王毅军聂福华
- 关键词：肝干细胞细胞移植暴发性肝功能衰竭
- 人胎儿肝干细胞分离鉴定及体内移植
- 2006年
- 目的分离鉴定人胎儿肝干细胞,并观察其对急性肝损伤严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠进行异种移植的治疗效果。方法以改进Seglen胶原酶(Ⅳ型)原位灌注结合Percoll密度梯度离心法分离纯化要求终止中期妊娠而流产的男性胎儿肝干细胞,经光镜、电镜下观察细胞特点,进行肝干细胞细胞标志SABC免疫组化染色。经肝脏直接注射移植人胎儿肝干细胞(106细胞)以治疗D-氨基半乳糖(800mg/kg)诱发的急性肝损伤雌性SCID小鼠,于移植前及移植后24、48、72h、1周取血测定ALT、TBiL,于移植后1、2、4周取受体肝脏组织,PCR方法检测受体肝组织性别决定因子。结果人胎儿肝干细胞平均细胞产量(2.10±0.50)×107,细胞活性率为(92.30±1.23)%;光镜下呈游离状态、大小不等的单个细胞,约为正常肝细胞1/5～1/3大小;电镜下细胞表面可见少量短而小的微绒毛状突起,卵圆形细胞核,核/浆比例较大等特点;甲胎蛋白、细胞角蛋白8、19及α-1-抗胰蛋白酶免疫组化染色呈阳性,白蛋白及白细胞共同抗原染色呈阴性表现,培养3周可形成克隆样结构。人胎儿肝干细胞移植组急性肝损伤SCID小鼠移植24h后血清ALT、TBiL水平降低,各时间点均低于对照组(P<0.05),且肝脏病理损伤逐渐减轻;存活2周小鼠肝脏组织中PCR测定性别决定因子呈阳性表达,随时间延长表达增强。结论该方法能成功分离高产量、高活性人胎儿肝干细胞,在急性肝损伤SCID小鼠体内移植存活,并改善其肝功能、肝脏病理指标。
- 张金卷杜智李涛朱争艳高英堂王毅军聂福华宋继昌
- 关键词：人胎儿肝干细胞细胞分离细胞鉴定细胞移植
- 肝卵圆细胞研究进展
- 2005年
- 张晔杜智李涛
- 关键词：肝卵圆细胞肝干细胞肝细胞移植
- 大鼠肝干细胞增殖模型建立
- ＜正＞目的建立稳定的大鼠肝干细胞模型,为干细胞研究提供良好的细胞来源。方法健康成年Wistar大鼠按二乙酰氨基芴给予剂量不同随机分为5组（5、10、15、20、25 mg/kg体质量）,按各自剂量每天1次连续灌胃处理给予...
- 张金卷杜智李涛朱争艳王毅军聂福华舒桂明宋继昌
- 文献传递
