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国家自然科学基金(31270836)

作品数:5 被引量:66H指数:2
相关作者:郑晓飞沈远付汉江朱捷李瑞花更多>>
相关机构:军事医学科学院安徽医科大学大连大学附属中山医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 3篇细胞
  • 2篇酸酶
  • 2篇核酸
  • 2篇核糖
  • 2篇核糖核酸
  • 2篇核糖核酸酶
  • 2篇HELA细胞
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白相互作用
  • 1篇定量RT-P...
  • 1篇增殖
  • 1篇酸化
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇同源
  • 1篇同源重组
  • 1篇内源
  • 1篇染色
  • 1篇染色质
  • 1篇染色质重塑

机构

  • 4篇军事医学科学...
  • 2篇安徽医科大学
  • 1篇大连大学
  • 1篇昆明理工大学
  • 1篇大连大学附属...

作者

  • 4篇郑晓飞
  • 3篇朱捷
  • 3篇付汉江
  • 3篇沈远
  • 2篇李瑞花
  • 1篇李清
  • 1篇杜彩素
  • 1篇罗瑛
  • 1篇宋宜
  • 1篇王瑞国

传媒

  • 2篇中国生物化学...
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇Scienc...
  • 1篇军事医学

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2013
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
聚腺苷酸特异性核糖核酸酶(PARN)的功能多样性被引量:1
2014年
聚腺苷酸尾的降解对于mRNA的质量控制和转录后基因调控十分重要.在真核生物中,去腺苷酸化是mRNA降解和翻译沉默的首要限速步骤.3'核糖核酸外切酶——聚腺苷酸特异性核糖核酸酶(poly(A)-specific ribonuclease,PARN)能够高效降解真核生物mRNA的聚腺苷酸尾.PARN不仅在降解mRNA poly(A)尾中发挥关键的作用,还参与DNA损伤、非编码RNA的加工成熟以及肿瘤等疾病过程.PARN是一种多功能酶分子,本文就PARN发现、结构、催化机制和功能多样性进行综述.
岳志宇罗瑛郑晓飞
关键词:MRNA
利用CRISPR/Cas方法建立RNaseL基因稳定敲除细胞株被引量:1
2015年
目的利用CRISPR/Cas9技术建立人RNase L基因稳定敲除的细胞株。方法根据Gen Bank中RNase L基因序列,设计RNase L敲除的小指导RNA(sgRNA)序列,将其克隆到p Cas-Guide真核表达载体中,获得p Cas指导RNA(gRNA)载体;设计供体DNA的同源臂序列,通过搭桥PCR将左同源臂、潮霉素B抗性基因和右同源臂扩增成为一条片段作为同源重组的修复模板,并将其克隆到p Back Zero-T表达载体上,获得p Back Zero-T-RNase LK载体。将上述两个载体共转染HEK293细胞,用潮霉素B筛选,通过Western印迹和DNA测序等技术验证RNase L从基因组上敲除。结果与结论成功构建了载体p Cas-gRNA和p Back Zero-T-RNase LK,Western印迹和DNA测序结果表明,成功获得5株RNase L缺失的细胞株,为探讨RNase L的生物学功能和研究其分子机制奠定了基础。
李瑞花付汉江钟一然沈远朱捷郑晓飞
关键词:RNASE同源重组转染
利用CRISPR/Cas系统构建在XRCC6内源基因插入Flag标签序列的HeLa细胞系被引量:2
2016年
目的:利用CRISPR/Cas系统在XRCC6基因5′端插入Flag标签序列,筛选XRCC6-Flag稳定表达的宫颈癌细胞(He La)株。方法:根据Gen Bank中XRCC6基因序列,设计XRCC6基因敲入的g RNA序列,构建入p Cas-Guide载体中,获得p Cas-XRCC6载体;设计XRCC6基因的同源臂序列,利用搭桥PCR方法将同源臂和Flag标签序列作为模板进行扩增,得到供体DNA片段,并将其克隆到p Back Zero-T表达载体上,获得p XRCC6-Donor载体;将上述2个载体共转染He La细胞,采用PCR、Western印迹等方法检测和筛选Flag标签序列插入XRCC6基因5′端的细胞株。结果:构建了p Cas-XRCC6和p XRCC6-Donor载体,筛选获得3株XRCC6-Flag稳定表达细胞株。结论:构建了XRCC6-Flag稳定细胞株,为研究XRCC6基因及其蛋白产物的生物学功能奠定了基础。
李瑞花付汉江沈远钟一然朱捷郑晓飞
Function of lncRNAs and approaches to lncRNA-protein interactions被引量:54
2013年
Long non-coding RNAs(lncRNAs),which represent a new frontier in molecular biology,play important roles in regulating gene expression at epigenetic,transcriptional and post-transcriptional levels.More and more lncRNAs have been found to play important roles in normal cell physiological activities,and participate in the development of varieties of tumors and other diseases.Previously,we have only been able to determine the function of lncRNAs through multiple mechanisms,including genetic imprinting,chromatin remodeling,splicing regulation,mRNA decay,and translational regulation.Application of technological advances to research into the function of lncRNAs is extremely important.The major tools for exploring lncRNAs include microarrays,RNA sequencing(RNA-seq),Northern blotting,real-time quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction(qRT-PCR),fluorescence in situ hybridization(FISH),RNA interference(RNAi),RNA-binding protein immunoprecipitation(RIP),chromatin isolation by RNA purification(ChIRP),crosslinking-immunopurification(CLIP),and bioinformatic prediction.In this review,we highlight the functions of lncRNAs,and advanced methods to research lncRNA-protein interactions.
ZHU JuanJuanFU HanJiangWU YongGeZHENG XiaoFei
关键词:蛋白相互作用定量RT-PCRRNA结合蛋白转录后水平染色质重塑RNAS
DNA损伤诱导的长链非编码RNA-UCA1促进HeLa细胞增殖被引量:8
2015年
尿路上皮癌抗原1(UCA1)是一种长链非编码RNA,在多种肿瘤内高表达.然而,其在宫颈癌细胞和组织中的表达报告颇不一致,且功能尚未确定.本文探索UCA1在宫颈癌He La细胞中的生物学功能.实时定量PCR(qRT-PCR)结果显示,UCA1、p21和p53 mRNA在阿霉素(doxorubicin,DOX)或γ射线照射的He La细胞中表达上调;相反,敲减p53表达则可抑制DOX诱导的UCA1上调.表明DNA损伤诱导的UCA1可能与p53有关.转染结合CCK8检测He La细胞增殖活力结果显示,与对照比较,过表达UCA1促进He La细胞增殖,干扰UCA1表达则减缓细胞增殖.此外,流式细胞术结果显示,过表达UCA1导致阿霉素诱导的凋亡率下降;siRNA抑制UCA1表达后引起细胞G2/M期比例上升,S期下降,且阿霉素诱导的细胞凋亡率上升.上述结果说明,DNA损伤诱导的UCA1可促进He La细胞增殖,减少细胞凋亡.然而,是否DNA损伤诱导的UCA1上调依赖p53尚需进一步实验证明.
王瑞国沈远李清宋宜朱捷郑晓飞杜彩素付汉江
关键词:长链非编码RNA宫颈癌DNA损伤
共1页<1>
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