上海市科学技术发展基金(03DZ19618)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 严重急性呼吸综合征病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的炎症反应
- 2007年
- 目的研究SARS冠状病毒N蛋白致人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)的炎症反应。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测第24、48、72和96小时SARS冠状病毒N蛋白对人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549)生长活性的影响。采用ELISA检测SARS冠状病毒N蛋白作用后A549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)的浓度变化。用RNA提取试剂盒提取总RNA,RT-PCR半定量法检测A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA及基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA的表达。结果不同浓度N蛋白对A549细胞生长均有抑制作用(表现在作用48h后),其中以20μg/mL浓度抑制性最强,其72h、96h的A值分别为0.672±0.027、0.799±0.092,与同一时间点空白对照组A值0.737±0.024、0.968±0.007相比,差异有统计学意义(P<0.01)。加入N蛋白后,4、6和12h A549细胞培养上清液中IL-6、IL-10、TGF-β1浓度上升,其中IL-6的6h和12h浓度分别为(119.35±5.60)ng/L和(11 6.29±10.49)ng/L,IL-10的4、6和12h浓度分别为(56.75±6.28)、(64.99±7.45)和(61.28±3.56)ng/L,TGF-β1 4、6和12h的浓度分别为(159.47±5.38)、(178.83±9.13)和(173.40±1 4.71)ng/L,与同一时间点对照组相比,差异有统计学意义。加入N蛋白后,A549细胞IL-6、IL-10、TGF-β1 mRNA的表达迅速上升,2h即有明显升高,6h进一步升高;MMP-9 mRNA的表达在2h时无明显上升,6h时有明显升高。结论Ⅱ型肺泡上皮细胞是SARS冠状病毒的重要靶细胞,同时也是效应细胞;SARS冠状病毒结构蛋白导致A549细胞各种炎性介质的分泌增加,表现在炎性因子的浓度提高和相应的mRNA表达水平增加,可能是机体异常免疫反应的发病机制。
- 郝东何礼贤瞿介明潘珏胡必杰
- 关键词：SARS病毒病毒蛋白质类肺泡上皮细胞
- SARS冠状病毒N蛋白致大鼠肺部炎症及糖皮质激素对其的作用被引量：4
- 2005年
- 目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒N蛋白所致大鼠肺部炎症反应及糖皮质激素(以下简称激素)对其的调节作用。方法24只SD大鼠随机分为4组,每组6只;A组大鼠气管内滴入无菌生理盐水0.2ml,B组(6h)、C组(24h)大鼠气管内滴入SARS病毒N蛋白溶液0.2ml,D组大鼠气管内滴入SARS病毒N蛋白溶液0.2ml的同时腹腔内注射10mg/kg地塞米松。测4组大鼠外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)中WBC总数及分类;测4组大鼠肺组织湿/干(W/D)比值;观察4组大鼠肺组织病理学变化;ELISA测4组大鼠血清及BALF中IL6、IL10、转化生长因子(TGF)β1水平。结果(1)外周血淋巴细胞比例C组较A组低(P<0.05),D组较A、C组均低(P值均小于0.01);D组WBC总数较A、C组均低(P<0.01)。BALF中WBC总数C组较A组高(P<0.05),D组较C组低(P<0.05);B、C组BALF中肺泡巨噬细胞占98%～99%。(2)肺脏W/D比值B、C组较A组高(P<0.05),D组较C组低(P<0.01)。(3)肺组织病理学变化:B、C组大鼠肺泡间隔明显增宽,有较多的炎性细胞渗出,包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、成纤维细胞等,血管充血、淤血,有的支气管腔内有炎性细胞渗出,C组变化较B组无明显加重;D组大鼠肺组织炎性反应较B、C组减轻,肺泡间隔变薄,炎性细胞渗出减少。(4)血清及BALF中IL6、IL10、TGFβ1水平B组较A组高(P<0.01),C组进一步升高(P<0.01),D组较C组低(P<0.01)。结论SARS冠状病毒N蛋白具有致病性,能够引起大鼠肺部炎症反应和(或)急性肺损伤,肺损伤与促炎性细胞因子、抗炎性细胞因子的升高及失衡有关;激素可有效地减轻SARS冠状病毒N蛋白所致的肺部炎症反应。
- 郝东何礼贤瞿介明潘珏胡必杰张静李倬哲
- 关键词：严重急性呼吸综合征SARS冠状病毒N蛋白炎症
