上海市科技兴农重点攻关项目(2005-3-5)
- 作品数：12 被引量：44H指数：4
- 相关作者：戴建军张廷宇张德福吴彩凤张树山更多>>
- 相关机构：上海市农业科学院上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室四川农业大学更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目上海市科技兴农推广项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- H19和IGF2R基因在体细胞克隆猪各组织中的甲基化状态被引量：6
- 2012年
- 为了探求新生克隆猪可能的死亡原因以及是否存在不完全的DNA甲基化重编程,本试验运用亚硫酸氢盐测序法分别检测了H19基因和IGF2R基因差异甲基化区(DMR)在新生死亡克隆猪和同期正常猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的甲基化状态。结果发现,H19基因DMR在克隆猪肺脏中表现为超甲基化,极显著高于正常猪(95.20%vs 46.80%P<0.01),且10个测序克隆中存在2处连续的全甲基化CpG位点(4～9位、12～S17位),而在其他组织中甲基化差异不显著(P>0.05);IGF2R基因DMR在肝脏中处于超甲基化状态,显著高于正常猪(80.00%vs 39.41%P<0.05),而在肺脏中为去甲基化状态,极显著低于正常猪(14.71%vs 66.47%P<0.01),在其他组织差异不显著(P>0.05)。结果说明,在死亡克隆猪中,H19基因DMR在肺脏和IGF2R基因在肝脏与肺脏中存在不完全的DNA甲基化重编程,这可能是导致克隆动物死亡的因素之一。
- 吴志强谢一妮戴建军张廷宇吴彩凤张树山顾晓龙刘亮吴斌陈慧兰张德福马恒东
- 关键词：DNA甲基化体细胞克隆
- 新生死亡克隆猪的组织病理学观察被引量：3
- 2014年
- 对1例新生死亡的体细胞克隆猪的5种组织进行详细的组织病理学观察,结果发现:体细胞克隆猪肺脏表现为典型的肺不张,肺泡壁有明显充血;肝脏的肝细胞形态异常,肝索紊乱,无典型肝小叶结构;肾脏的肾小球处于不同发育阶段,肾小管管腔尚未形成,仅有肾小管轮廓。
- 陈会兰戴建军吴彩凤张廷宇张树山顾晓龙吴斌
- 关键词：体细胞核移植病理学
- 巴马小型猪早期生长曲线拟合研究被引量：11
- 2012年
- 对随机选择的32头(4窝)巴马小型猪0～25周期间每周平均体重进行测定,并用Logistic和Gompatz 2种模型对其进行拟合。结果表明:Logistic模型(R^2=0.997)和Gompatz模型(R^2=0.999)均能够对巴马小型猪的生长曲线进行良好的拟合,尤以Gompatz模型生长曲线预测的结果更接近实际情况。Gompatz模型预测的巴马小型猪早期生长速度的拐点周龄和拐点体重分别为18周和14.388 kg。
- 张树山戴建军吴彩凤张廷宇张德福
- 关键词：巴马小型猪LOGISTIC模型
- 谷氨酰胺与鸡卵黄低密度脂蛋白提高猪精液冷冻效果的研究被引量：4
- 2013年
- 为提高猪精液冷冻保存效果,在9%鸡卵黄低密度脂蛋白(LDL)冷冻稀释液的基础上,研究了添加不同浓度的谷氨酰胺对猪精液冷冻效果的影响。结果表明:在LDL冷冻稀释液中添加谷氨酰胺可显著提高猪精子冷冻效果(P<0.05),较适宜添加量为40mmol/L.
- 张树山戴建军吴彩凤张廷宇张德福
- 关键词：猪精液冷冻保存谷氨酰胺低密度脂蛋白
- 体细胞克隆小型猪主要性能指标的测定被引量：2
- 2013年
- 通过与普通巴马小型猪的生长发育规律、繁殖性能、生理生化指标和屠宰肉质性能等的比较,了解小型克隆猪的主要性能指标,以期为克隆猪安全性评估及其产业化健康发展提供借鉴。结果表明,体细胞克隆巴马小型猪与普通猪的各项性能指标差异不显著。这种相似性在一定程度上说明了体细胞克隆猪的产业健康性和安全性。
- 张德福陈会兰顾晓龙戴建军张廷宇张树山吴彩凤吴斌
- 关键词：克隆猪性能指标安全性
- 紫杉醇预处理对猪体外成熟卵母细胞玻璃化冷冻的影响被引量：1
- 2009年
- 为了提高猪成熟卵母细胞细胞玻璃化冷冻效果。本试验拟添加紫杉醇,比较其对冷冻环冷冻效果的影响。结果显示使用1.0μmol.L-1紫杉醇预处理卵母细胞,冷冻后其形态完整率(89.93%)和FDA染色存活率(83.33%)都显著高于未处理组的79.12%和70.97%(P<0.05),继续提高紫杉醇浓度则表现为对卵母细胞的毒副作用。在不同预处理时间上,预处理30 min组冷冻后卵母细胞形态完整率和FDA染色存活率最高,分别达到90.21%和84.13%。预处理浓度1.0μmol.L-1,30 min是比较合适的处理方法;紫杉醇、细胞松弛素B(CB)或两者联合添加能显著提高猪成熟卵母细胞的玻璃化冷冻的效果(P<0.05),但两者之间没有显著差异(P>0.05)。
- 王磊杨山亭戴建军吴彩凤张廷宇张德福
- 关键词：卵母细胞紫杉醇
- 体细胞克隆巴马小型猪部分生理生化指标的初步测定被引量：1
- 2011年
- 目的探讨体细胞克隆巴马小型猪的生理生化指标特性。方法采用全自动血球计数仪和全自动生化仪，对体细胞克隆巴马小型猪血液的部分生理和生化指标进行测定和分析。结果体细胞克隆巴马小型猪生理生化指标和同期普通巴马小型猪没有显著差异，与人类大部分指标接近。结论体细胞克隆巴马小型猪和人类的生理生化特性有一定的相似性。
- 陈会兰张德福吴彩凤戴建军张廷宇张树山顾晓龙吴斌
- 关键词：体细胞克隆巴马小型猪生理指标生化指标
- 小型猪克隆胚的构建及胚胎移植研究
- 2011年
- 目的建立小型猪的体细胞核移植技术，为开展转基因小型猪动物模型研究提供技术支撑。方法应用体细胞核移植技术，以小型猪胎儿成纤维细胞和枫泾猪耳成纤维细胞作为供体细胞进行体细胞核移植，并将两种重构胚混合后进行胚胎移植。结果两种供体细胞在体外发育能力上无显著差异（P〉0．05）；电融合后进行化学激活能部分提高囊胚发育率，但差异不显著（P〉0．05）。两种方法生产的小型猪和枫泾猪克隆胚胎混合后，经胚胎移植均能顺利产下4只健康后代。经微卫星亲缘关系鉴定，克隆猪lOO％与供体细胞相同，与代孕母猪无关。结论建立的克隆平台能够用于克隆猪的生产。
- 戴建军李垚顾晓龙张廷宇吴彩凤张树山吴斌陈会兰陈学进张德福
- 关键词：体细胞核移植克隆小型猪化学激活
- Spindle-view系统在猪卵母细胞去核中的应用被引量：12
- 2007年
- 应用Spindle—view对体外成熟培养36、42、44和45h的猪体外成熟卵母细胞减数分裂纺锤体进行去核操作，并与传统去核方法（McGrath—Solter去核法，挤压去核法）相比较，结果表明：①在42～48h之间利用Spindle—view得到的猪卵纺锤体影像与极体的相对位置没有明显的变化；②Spindle—view适合用于猪体外成熟卵母细胞减数分裂纺锤体的观察及去核；去核效率与其他两种方法相比差异极显著（95．5％，42.1％，74．2％，P〈0．01）；③纺锤体成像是否清晰可用于猪卵母细胞的质量监控。
- 杨宇戴建军张廷宇吴华莉陈学进张德福马恒东
- 关键词：猪卵母细胞去核
- 单层细胞共培养对猪去卵丘卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响
- 2011年
- 本试验比较观察第一极体(The first polar body,PbⅠ)、Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第2次减数分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ)卵母细胞判定结果的相关性分析,并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells,pOCCs)、猪输卵管上皮细胞(porcine oviductal epithelial cells,pOECs)和猪卵丘颗粒细胞(porcine cumulus cells,pCCs)等3种单层细胞体外共培养体系对猪去卵丘卵母细胞(cumulus cells denuded oocytes,Dos)体外成熟(in vitro maturation,IVM)和孤雌发育的影响。结果显示:(1)Oosight imaging system判定卵母细胞成熟的结果与hocchst33342染色法判定的结果有很强相关性(R=0.973,P<0.01,N=90);(2)pOCCs单层细胞共培养体系中猪去卵丘卵母细胞成熟率显著高于pOECs((52.5±0.30)%vs(43.8±2.18)%,P<0.05),且这2组成熟率显著高于其余各组(P<0.05);Dos在3种单层细胞共培养体系培养后,成熟卵母细胞GSH含量较非共培养组都能显著升高(P<0.05),pOCCs组GSH含量最高((7.1±0.32)pmol/卵);(3)成熟后的Dos经孤雌激活,pOCCs组和pOECs组卵裂率和囊胚率都显著高于其余2组(P<0.05)。
- 顾晓龙孟祥黔吴彩凤戴建军张廷宇谢一妮吴志强刘亮曾宪垠张德福
- 关键词：共培养体外成熟
