国家自然科学基金(39970780)
- 作品数：53 被引量：209H指数：9
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- 内皮素刺激下人视网膜色素上皮细胞的自分泌被引量：3
- 2007年
- 以往实验发现，在人视网膜脱离玻璃体液中和检测出内皮素（ET-1）的含量增生膜中的表达，说明ET-1参与了增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的形成。ET-1可以刺激自身的分泌，是一种正反馈调节，可以激活丝裂素活化蛋白激酶级联反应途径转录ET-1 mRNA。我们对培养的人视网膜色素上皮（RPE）细胞经ET-1的刺激，观察其自身的分泌和调节，现报告如下。
- 王建洲惠延年王雨生张鹏侯旭马吉献1
- 关键词：内皮缩血管肽1
- 转化生长因子-β受体Ⅱ在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达被引量：14
- 2003年
- 目的:观察及评估转化生长因子-β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达及临床意义。 方法:采用免疫组化和原位杂交方法,对13例PVR患者行玻璃体手术增生膜获得的16例进行TGF-βRⅡ的蛋白和mRNA的检测。 结果:免疫组化结果为:9例C2～C3级膜中,染色反应为阳性的有8例,总阳性率为88.9％。7例D1～D3级膜中有6例为阳性,总阳性率为85.7％。阳性细胞多是一类胞体为长圆形,胞核呈圆形或卵圆形的上皮样细胞。统计学分析TGF-βRⅡ标记与膜分级间无相关性(P>0.05)。原位杂交结果与免疫组化基本一致。 结论:PVR发生过程中视网膜色素上皮细胞在生长因子等的刺激下,TGF-βRⅡ表达显著上调,表明了TGF-β参与PVR增生膜的形成。眼科学报 2003;19:244-247。
- 郭长梅惠延年马吉献韩泉洪阎峰秦向阳王建洲
- 关键词：增生性玻璃体视网膜病变增生膜免疫组化原位杂交
- 视网膜脱离术后患者俯卧位的并发症及护理对策被引量：9
- 2013年
- 目的研究视网膜脱离术后患者俯卧位的并发症及护理对策。方法选择在第四军医大学唐都医院就诊的100名视网膜脱离患者,随机分为给予护理干预的观察组50例和给予眼科常规护理的对照组50例,观察二组各类并发症发生例数、睡眠质量以及负面情绪。结果观察组眼睑水肿(5例)、呕逆(7例)、肘部皮肤破溃(2例)、颈椎疼痛(1例)的发生例数均明显少于对照组(P<0.05);PSQI评分(15.37±2.84)明显高于对照组;VAS评分(2.17±0.65)、HAMD评分(25.38±3.74)、HAMA评分(19.84±2.74)均明显低于对照组。结论护理干预对于因持续俯卧位而引起的生理和心理不适感均有积极的治疗意义。
- 李荣王建洲
- 关键词：视网膜脱离俯卧位护理干预并发症
- 实验性视网膜脱离的病理改变及细胞增生被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨实验性视网膜脱离的病理变化和细胞增生。方法:成年白化病兔32眼在间接检眼镜直视下,先抽取玻璃体液0.5mL软化眼球,用50nm玻璃微管在下方6:00赤道部部位刺入视网膜造成裂孔并注射生理盐水0.5mL于视网膜下间隙。术后0.5,1,3,6,24h;3,7d和14d摘除眼球作组织学观察并以免疫组织化学的方法检测视网膜下细胞增生。结果:32只兔眼术后均发生视网膜脱离,视网膜脱离范围3:00～9:00(髓腺下方视网膜均脱离)。自发性复位的时间在3～14d,组织学切片显示,3d可见视网膜色素上皮细胞积聚团,7dRPE细胞增生肥大呈巨噬细胞样改变,14dRPE多层化改变,并见巨噬细胞样RPE来源于单层的RPE,游离RPE层后,吸附于脱离的光感受器细胞外节;3d增生细胞核抗原即表达阳性,增生细胞表达角蛋白阳性。结论:在此模型中,RPE细胞表现出细胞增生,巨噬细胞样细胞也来源于RPE。
- 王建洲惠延年王雨生陈利军王海燕马吉献赵炜
- 关键词：视网膜脱离角蛋白增生细胞核抗原视网膜色素上皮细胞增生
- 肾上腺髓质素及其受体在增生性玻璃体视网膜病变前膜中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨肾上腺髓质素 (ADM)及其受体 (ADMR)在增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)前膜中的表达。方法 标本取自 2 0 0 1年 7～ 11月在我院眼科研究所确诊为孔源性视网膜脱离合并PVR行玻璃体手术的 10例连续病例 ,PVR均为C级以上 ,采用原位杂交法对术中所取标本的ADM和ADMRmRNA表达情况进行观察。结果 10例增生性玻璃体视网膜病变前膜中有 7例ADM和ADMRmRNA阳性。阳性细胞内分布不均匀 ,部分细胞以胞质阳性为主 ,部分细胞的阳性主要出现在胞核。结论 ADM和ADMR在PVR前膜中表达 ,PVR的发病过程中有ADM和ADMR的参与。
- 黄蔚王琳袁铭马吉献惠延年
- 关键词：肾上腺髓质素肾上腺髓质素受体增生性玻璃体视网膜病变孔源性视网膜脱离原位杂交法
- 内皮素刺激下人RPE细胞的自分泌调节被引量：3
- 2007年
- 目的检测内皮素(endothelin-1,ET-1)刺激人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞后ET-1的自分泌。方法用体外培养的RPE细胞,经10-11mol.L-1、10-9mol.L-1、10-7mol.L-1ET-1作用后,用免疫组织化学和原位杂交检测RPE细胞ET-1的表达和一氧化氮合酶1(nitric oxide synthase1,NOS1)的表达,并用LeicaQ750图像分析仪定量分析表达量;用放射免疫测定检测细胞调理液中ET-1和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)含量。结果在未经ET-1作用的RPE中ET-1、ET-1 mRNA和NOS1仅见少量细胞微弱表达,3个浓度ET-1作用24h后,图像分析在不同浓度ET-1刺激后均检测出ET-1的表达增强,并有浓度依赖性(F=9.511,P<0.01),NOS1的表达也增强(F=16.113,P<0.01),两者有直线相关性(r=0.685,P<0.05)。在调理液的检测中,ET-1和6-Keto-PGF1α的含量均随着ET-1作用浓度的增加而增加,各作用浓度两者含量均有统计学差异(前者F=23.67,P<0.01;后者F=44.431,P<0.01);并且两者有直线相关性(r=0.85,P<0.01)。结论ET-1刺激RPE细胞表达并分泌ET-1,同时伴随的NOS1表达增加和6-Keto-PGF1α分泌增加可能是针对ET-1的负向调节作用。
- 王建洲惠延年王雨生张鹏侯旭马吉献
- 关键词：内皮素自分泌负向调节
- 结缔组织生长因子对视网膜色素上皮细胞增生和黏附的调节作用被引量：2
- 2007年
- 目的观察重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)对视网膜色素上皮(RPE)细胞增生和黏附的影响。方法用CTGF蛋白、多聚赖氨酸(PLL)和胶原分别包被培养板,观察CTGF促进RPE细胞黏附的作用;用四唑盐(MTT)比色试验和流式细胞仪(FCM)测定RPE细胞增生反应。结果10-30 mg/L的CTGF蛋白提高RPE细胞的贴壁黏附能力,与未包被的对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);30 mg/L CTGF促进RPE细胞黏附的能力与0.1 g/L胶原的作用一致,但略低于0.1 g/L PLL的作用。MTT实验显示CTGF刺激RPE细胞生长,CTGF作用24 h刺激RPE细胞增生的能力最强。FCM测定细胞周期结果显示S期百分比随着CTGF浓度增加而逐渐增加,无血清培养的对照组S期百分比为(7.5±0.4)%,60μg/LCTGF刺激24 h后,S期百分比上升至(16.1±2.0)%。结论CTGF可以促进RPE细胞的黏附和增生,在增生性玻璃体视网膜病变等眼内增生性疾病中可能有重要意义。
- 郭长梅惠延年王雨生田艳明王静波马吉献
- 关键词：结缔组织生长因子视网膜色素上皮细胞细胞黏附细胞增生
- 白细胞介素-6反义寡核苷酸抑制人视网膜色素上皮细胞表达白细胞介素-6被引量：8
- 2002年
- 目的 观察人视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞表达白细胞介素 6(interleukine 6 ,IL 6 )和IL 6反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotide ,ASON)从基因水平阻断RPE细胞表达IL 6的效应 ,为增生性玻璃体视网膜病变的防治寻找新的药物。方法 将培养的人RPE细胞以IL 1β刺激后 ,用酶联免疫吸附试验 (enzymelinkedimmunosorbentassay ,ELISA)、免疫组化染色及原位杂交等方法 ,观察RPE细胞表达IL 6蛋白质和mRNA的情况。结果 在IL 1β介导下 ,RPE细胞对IL 6蛋白质的表达呈时间和剂量反应关系。用IL 1β刺激 8h ,对照组RPE细胞培养上清液中IL 6蛋白质含量为 2 0 0× 10 6g/L ;IL 6ASON (浓度为 2 0 0× 10 5mol/L)组的IL 6蛋白质含量明显降低 ,为 5 5 0×10 7g/L ;两组比较差异有显著意义 (t=4 5 18,P <0 0 1)。免疫组化染色结果显示 ,对照组RPE细胞胞浆中IL 6蛋白质的表达呈深浅不一的棕黄色 ,IL 6ASON组染色则较浅 ;两组比较差异有显著意义(t=2 32 5 ,P <0 0 5 )。原位杂交结果表明 ,对照组RPE细胞胞浆中IL 6mRNA的表达呈紫蓝色 ,而IL 6ASON组染色较淡 ;图像分析结果显示 ,两组灰度值差异有显著意义 (t=3 74 6 ,P <0 0 1)。结论在IL 1β刺激下 ,人RPE细胞可明显表达IL 6蛋白?
- 宋宗明惠延年瞿佳王雨生马吉献司艳芳康军
- 关键词：视网膜色素上皮反义寡核苷酸类
- 内皮素-1在实验性视网膜脱离兔中的表达特征被引量：1
- 2010年
- 目的观察内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在实验性视网膜脱离兔中的表达。方法选取18只(36眼)中国大白兔,对照组2只(4眼);实验组16只(32眼)。实验组大白兔在间接检眼镜直视下,用50nm玻璃微管在兔眼下方600钟位赤道部视网膜造孔并注射0.5mL生理盐水于视网膜下间隙。实验组各取2只4眼兔于术后0.5h、1h、3h、6h、24h和3d、7d、14d摘除眼球作组织学观察并以免疫组织化学和原位杂交的方法检测ET-1在视网膜的表达,并于抽取玻璃体降眼压以及取眼球时分别抽出玻璃体用放射免疫测定法检测ET-1浓度。结果实验组兔眼术后均发生视网膜脱离,视网膜脱离范围300-900钟位。从模型建立后3h,经放射免疫测定开始可检测出玻璃体中存在ET-1,浓度逐渐上升,并随后下降,而免疫组织化学的结果提示,ET-1在模型建立后24h开始表达。原位杂交检测结果也证实,建模后玻璃体液中检测出ET-1,ET-1的mRNA主要表达在视网膜神经层各层细胞和RPE的细胞核,胞浆只有较弱的着色,造模24h后,胞浆的着色才明显加深,并且在建模后3d时着色明显,7d、14d减弱。结论 ET-1在视网膜脱离中是一种早期表达的细胞因子,有峰值,也有低谷,除与视网膜脱离的损伤有关外,其在视网膜下液含量的波动与外屏障的破坏和细胞因子间的相互作用有关。
- 王建洲惠延年周健宋虎平王雨生徐渊马吉献陈立军
- 关键词：内皮素视网膜脱离原位杂交放射免疫测定
- 增生性玻璃体视网膜病变增生膜中survivin基因的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 :探讨凋亡抑制基因survivin在增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)增生膜中的表达 .方法 :玻璃体手术中取出的 10例PVR患者的增生膜 ,应用免疫组织化学方法(SABC法 )检测增生膜中survivin基因的表达 .结果 :10例增生膜中 ,6例表达阳性 .阳性染色位于膜上大部分细胞的胞质内及细胞外基质中 .结论 :Survivin基因的异常表达引起细胞的凋亡抑制 。
- 王静波惠延年马吉献苏静波
- 关键词：玻璃体视网膜病细胞凋亡SURVIVIN基因表达
