长沙市科技计划项目(k068017)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：燕海峰胡雄贵邓缘肖定福赵燕更多>>
- 相关机构：湖南农业大学湖南省畜牧兽医研究所湖南省原子能农业应用研究所更多>>
- 发文基金：中捷政府间科技合作项目长沙市科技计划项目湖南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 鸡囊胚细胞玻璃化冷冻保存技术的研究
- 2009年
- 研究不同冷冻液配方对鸡囊胚细胞的玻璃化冷冻保存效果。对新鲜种蛋囊胚细胞分离提纯后,在DMEM中添加不同的冷冻保护剂DMSO(二甲基亚砜)、EG(乙二醇)、蔗糖,分别组成6种玻璃化冷冻保护液,进行超低温冷冻保存。复苏后通过苔盼蓝染色测定活细胞存活率。结果:玻璃化冷冻保存中,囊胚细胞在玻璃化冷冻液配方2(10%EG+10%DMSO+0.5mol/L蔗糖+20%FBS+DMEM)条件下复苏后存活率最高(71.32%),与玻璃化冷冻液配方1和3条件下复苏后存活率之间差异显著(P<0.05),且与玻璃化冷冻液配方4、5、6条件下复苏后存活率之间差异均极显著(P<0.01),可以作为鸡囊胚细胞的玻璃化冷冻液。
- 邓缘洪亚辉燕海峰胡雄贵
- 关键词：囊胚细胞玻璃化冷冻
- 应用PCR技术鉴定家鸡囊胚细胞性别的研究被引量：2
- 2008年
- 为了鉴定家鸡囊胚细胞的性别,应用W染色体性别鉴定引物进行PCR,对不同方法提取的微量囊胚细胞DNA的效果进行鉴定,并应用此技术对种蛋进行性别鉴定。结果表明,3种方法均能提取适合于PCR的模板,其中以Chelex-100法提取的效果最好,最小细胞数为10个。对123个种蛋的性别进行鉴定,其中雌胚57个,雄胚66个。本研究对微量家鸡囊胚细胞DNA提取方法进行了大量的摸索和改进,为家鸡种蛋孵化前性别鉴定技术研究奠定了基础。
- 胡雄贵邓缘朱立军肖定福燕海峰
- 关键词：囊胚细胞性别鉴定
- ^(60)Co-γ射线对食用蛋保鲜和种蛋胚胎发育致弱作用的研究被引量：5
- 2007年
- 采用60Co辐射源,研究不同剂量对食用蛋的灭菌和保鲜效果,以及对种蛋囊胚的致弱作用。结果表明:7 kGy的辐照剂量可以杀灭鸡蛋内容物和蛋壳上的全部细菌,但即使是4 kGy,对鸡蛋的保鲜和延长货架期方面起到的也是副作用;从3 Gy^11 Gy剂量范围内对种蛋进行辐照,其对应的孵化率为71.8%~13.3%。由于没有一个衡量辐照致弱种蛋胚胎发育程度的参数,提出了相对于空白组的孵化率下降幅度作为家鸡囊胚细胞嵌合体选取辐照剂量的依据。
- 燕海峰田国强李文革赵燕柳小春
- 关键词：辐照种蛋
- 利用Gateway技术构建慢病毒载体及其在鸡囊胚细胞中的表达被引量：2
- 2007年
- 目的:建立慢病毒载体介导的外源基因在动物中表达的模式。方法:通过PCR扩增出带EGFP基因和特异性结合位点的DNA序列,并应用Gateway技术构建了带EGFP基因的pLenti6/v5-DEST慢病毒载体。利用磷酸钙介导慢病毒4质粒系统在包装细胞中转染,收集并浓缩产生的病毒颗粒,通过感染293FT细胞测定慢病毒滴度。结果:通过PCR扩增后测序分析,表明慢病毒载体构建正确。病毒滴度测定结果为2×107TU/mL。并用慢病毒对鸡囊胚细胞进行感染,获得了较强的表达效果。结论:慢病毒载体系统所产生的病毒颗粒对动物细胞具有较强的感染能力,为慢病毒载体在转基因家禽研究中的应用奠定了基础。
- 胡雄贵肖定福邓缘燕海峰
- 关键词：GATEWAY慢病毒载体EGFP
