湖南省自然科学基金(05JJ30065)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 噬菌体抗体库淘筛方法的比较研究被引量：1
- 2009年
- 目的:比较噬菌体抗体库的淘筛方法,从而为得到亲和力高、特异性强的抗体克隆打下基础。方法:在包被好抗原的2个细胞培养瓶中加入噬菌体抗体库,一个采用先直接加入宿主菌感染后,再将培养瓶内残留结合物洗脱中和后感染的方法,另一个则采用先洗脱并中和的噬菌体感染宿主菌,与抗原结合的剩余的噬菌体再行直接感染,将2种方法所得到的感染菌和援救所得的噬菌体进行CFU和PFU测定。结果:从实验的数据中可以发现,采用第一种方法所得次级库的容量要大于后一种方法所得的初级库。结论:噬菌体抗体库的淘筛方法必须按照实验的具体情况进行选择,如果要求严谨度适中,则可以采用直接感染的方法淘筛。
- 杜东霞吴剑李小曼朱振久张冉
- 关键词：噬菌体抗体库CFUPFU
- 抗体库构建中影响库容量的因素探讨被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨在噬菌体抗体库的构建过程中,提高转化效率的最优条件。方法:通过改变感受态细菌的浓度、电击时间的长短以及连接产物的纯化方法,从而找出最佳条件。结果:实验证明:在仪器的电压、电阻、电容等条件设定不变的情况下,感受态细菌的OD600在0.4左右,电击时间为2 s,转化效率最高。结论:连接产物进行酚-氯仿抽提后转化效率也会大大提高。
- 杜东霞吴剑李小曼朱振久张冉
- 关键词：电转化
- 辅助噬菌体在噬菌体展示中的应用及研究进展被引量：3
- 2009年
- 噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白质与特定噬菌体衣壳蛋白相融合,展示于噬菌体表面来构建蛋白质或多肽文库,并从中筛选目的蛋白、多肽或抗体的基因工程高新技术。噬菌粒/辅助噬菌体系统是最常用的噬菌体展示系统,此系统中辅助噬菌体对噬菌粒的复制和组装发挥着至关重要的作用。本文结合当今该领域的最新研究动态,概述了噬菌粒和辅助噬菌体双基因组系统,着重介绍了不同辅助噬菌体的特点及其突变机制,并对其应用前景进行了展望,以期为该技术的进一步完善提供一定的借鉴作用。
- 杜东霞张冉
- 关键词：噬菌体展示辅助噬菌体
- 抗病毒噬菌体抗体库研究进展被引量：3
- 2009年
- 噬菌体抗体库技术是基于噬菌体表面展示技术发展起来的一项基因抗体工程新技术。它将含亿万种基因的抗体可变区基因库转化成展示在噬菌体表面的蛋白库，不仅使对于具备所需属性的单克隆抗体筛选能更方便、快速、高效地在体外进行，还开辟了单克隆抗体人源化的新途径，揭开了人类单克隆抗体生产的历史新篇章。本文综述了近年来针对各种病毒的噬菌体抗体库的构建、筛选方法以及其在各种病毒性疾病研究中的最新进展。
- 吴剑张风华张冉
- 关键词：噬菌体抗体库噬菌体表面展示技术病毒病毒性疾病
