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安徽高校省级自然科学研究基金(KJ2011B072)
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相关作者:
高超
沈双
陈礼文
仲维学
朱一蓓
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相关机构:
安徽医学高等专科学校
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发文基金:
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CD83
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作者
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张学光
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朱一蓓
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仲维学
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陈礼文
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沈双
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高超
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免疫学杂志
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2011
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人CD83基因转染细胞株的构建及其功能初步研究
2011年
目的构建人CD83全长编码基因转染293细胞,并探讨其对单核细胞的作用。方法 RT-PCR方法从成熟人树突状细胞(DC)扩增出CD83 cDNA,插入pIRES2-EGFP载体,脂质体转染293细胞,筛选出稳定表达目的基因细胞株;从人外周血单个核细胞(PBMC)中磁珠分选单核细胞,LPS刺激的同时加入293/CD83细胞或293/mock,24 h后检测细胞活化状态以及培养上清中TNF-α水平。结果经流式细胞术反复检测绿色荧光蛋白(GFP)报告基因及CD83表达水平,筛选获得获得一株稳定表达膜型CD83分子的基因转染细胞株293/CD83;体外实验显示293/CD83可促进LPS刺激的单核细胞活化水平和TNF-α分泌量。结论成功构建表达人CD83分子的293细胞株,293/CD83对LPS刺激的单核细胞有协同刺激作用。
陈礼文
高超
沈双
仲维学
朱一蓓
张学光
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树突状细胞
转染
免疫调控
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