江西省自然科学基金(0330044)
- 作品数：3 被引量：24H指数：3
- 相关作者：陈燕徐波曹郁生郭兴华廖立新更多>>
- 相关机构：南昌大学江西省药物研究所中国科学院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 乳酸乳球菌NICE系统食品级分泌表达载体pRNV48的构建及铜绿假单胞菌融合外膜蛋白的表达被引量：3
- 2006年
- 乳酸菌NICE系统是目前较理想的可控制蛋白质生产的食品级诱导表达系统,而乳酸菌分泌表达异源蛋白比细胞质表达更优越。本研究将以pVE5524为模板PCR扩增的1.5 kbSPUsp45-NucA-CWAM6-t1t2基因克隆到食品级细胞内诱导表达载体pRNA48上,构建成食品级细胞壁锚定表达载体pRNV48,与宿主菌L.lactisNZ9000共同构成乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定诱导表达系统。为检测该系统的功能,将铜绿假单胞菌融合外膜蛋白基因OprF/H克隆进pRNV48中,并检测了OprF/H的表达量和免疫原性。
- 徐波曹郁生陈燕郭兴华
- 关键词：乳酸乳球菌食品级载体
- 乳酸乳球菌食品级诱导表达系统的构建及异源蛋白的表达被引量：19
- 2007年
- 以α-aga基因为食品级选择标记构建了乳酸乳球菌食品级高效诱导细胞内和细胞壁锚定表达系统,并用这一表达系统表达了铜绿假单胞菌融合外膜蛋白基因OprF/H。首先以pRAF800和pNZ8048构建了含有α-aga、PnisA-MCS-TpepN和θ复制子的乳酸乳球菌食品级细胞内诱导表达载体pRNA48,再以pRNA48和pVE5524为出发载体构建了含有α-aga、PnisA-SPUsp45-nucA-CWAM6-t1t2和θ复制子的乳酸乳球菌细胞壁锚定诱导表达载体pRNV48。然后以食品级载体pRNA48和pRNV48为基础,构建了不含抗生素抗性选择标记的铜绿假单胞菌融合外膜蛋白基因的表达质粒pRNA48-OprF/H和pRNV48-OprF/H。利用nisin进行重组乳酸乳球菌菌株的诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,检测到表达蛋白分别占细胞内可溶蛋白的9.6%和细胞壁锚定蛋白的9.8%,表达产物具有免疫原性,可与含OprF/H的乳球菌以及铜绿假单胞菌发生特异性的凝集反应。
- 徐波曹郁生陈燕郭兴华
- 关键词：乳酸乳球菌食品级载体诱导表达系统
- 铜绿假单胞菌外膜蛋白的免疫原性及免疫保护性被引量：3
- 2004年
- 廖立新曹郁生李国辉陈燕张万山熊勇华姚闽
- 关键词：铜绿假单胞菌免疫原性免疫保护性绿脓杆菌
