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siRNA干扰CASK表达对INS-1细胞胰岛素分泌的影响被引量：2: 2012年; 目的探讨小分子RNA(siRNA)干扰CASK基因表达对大鼠INS-1细胞胰岛素分泌的影响。方法用脂质体lipofectamine 2000将针对靶基因CASK合成的特异性siRNA片段转染INS-1细胞。实时定量PCR及Western blot检测CASK基因表达变化,进行有效干扰片段的筛选。放射免疫法检测钾离子刺激胰岛素分泌(KSIS)功能的改变。结果转染100nM siRNAs 48h后,INS-1细胞中CASK基因表达明显降低(P<0.01),KSIS功能显著降低(P<0.01)。结论靶向siRNA可以特异性地抑制INS-1细胞中CASK基因表达,从而抑制钾离子诱导的胰岛素分泌。; 李原陈鸿朱云霞杨楠王尧; 关键词：钙小分子干扰RNA 胰岛素分泌

钙／钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶在胰岛素囊泡分泌过程中的作用被引量：1: 2016年; 目的探讨钙／钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶（CASK）在胰岛素囊泡分泌过程中的作用。方法体外培养胰岛B细胞株INS-1细胞，干扰或过表达CASK同时结合腺甘酸环化酶激动剂forskolin或硝苯地平处理，使用电镜观察干扰CASK后胰岛素囊泡的锚定情况和数量。两组问比较采用t检验，多组间比较采用方差分析。结果（1）干扰CASK后，forskolin促胰岛素分泌的效应减弱[（4．5±0．4）%比（2．7±0．6）％，t=6．019，P〈0．01]。（2）过表达CASK不能逆转硝苯地平处理后引起的胰岛素分泌下降[（1．4±0．1）％比（1．5±0．3）％，t=0．40，P〉0．05]。（3）干扰CASK后胰岛素囊泡在细胞膜上的锚定明显减少，而总胰岛素囊泡数量组间差异无统计学意义[（140±30）比（123±45）个，t=0．44，P〉0．05]。结论CASK参与forskolin促胰岛素分泌的过程，其作用环节可能位于钙离子通道的下游；CASK很可能参与了胰岛素囊泡分泌的锚定过程。; 郝娜娜王天元王尧; 关键词：胰岛素胰岛素分泌细胞

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江苏省自然科学基金(BK2012752)