吉林省科技发展计划基金(20030552-2)
- 作品数：4 被引量：18H指数：2
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- 梅花鹿源BVDV NS_(2-3)基因重要区的克隆与序列分析被引量：1
- 2006年
- 根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NADL株的序列设计并合成1对引物,对从吉林不同地区分离的4株梅花鹿源BVDV(CCSYD株、CC JYD株、CCKCD株和JLCYD株)的N S2-3基因进行RT-PCR扩增,并对扩增的片段进行序列分析。结果表明,国内梅花鹿源BVDV CCSYD株属基因Ib亚型,CC JYD株、CCKCD株和JLCYD株属基因型待定。
- 温铁锋郜玉钢王树志杜锐
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒
- 牛病毒性腹泻病毒梅花鹿分离株E_0基因的克隆与表达被引量：4
- 2005年
- 利用RT-PCR技术扩增了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)梅花鹿分离株E0基因,并将其克隆到pMD18-T克隆载体和pET28a原核表达载体中,构建了pMD18-T/E0和pET28a/E0重组子,并进行了测序和表达。表达产物分别用12%SDS-PAGE检测和牛抗BVDV阳性血清进行Western-blotting检测,结果表明,BVDV梅花鹿分离株E0基因的核苷酸序列与匈牙利VEDEVAC株的同源性高达98.6%,与C24V标准株的同源性为84.9%,证明构建的重组子是正确的;BVDV梅花鹿分离株E0基因得到了正确表达。
- 郜玉钢杜锐王全凯王楠王树志
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒E0基因
- 梅花鹿牛病毒性腹泻病毒的分离及其RT-PCR鉴定被引量：11
- 2004年
- 对梅花鹿的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分离培养及RT—PCR进行了研究。从腹泻鹿粪样中分离到了 与BVDV的C24V标准椿致细胞病变相同规律的BVDV病毒株,经RT—PCR扩增进一步证实其为牛病毒性腹 泻病毒。
- 郜玉钢郑全杜锐王全凯王树志
- 关键词：梅花鹿牛病毒性腹泻病毒BVDVRT-PCR反转录-聚合酶链式反应
- 鹿粘膜病病毒的分离鉴定被引量：2
- 2004年
- 本研究首次应用MDBK传代细胞从腹泻幼鹿粪样中分离获得一株病毒(MDV N71)。该毒株可使培养细胞出现明显的空泡变性,电镜负染观察接毒细胞培养物见有典型的粘膜病病毒粒子。MDV N71在MDBK传代细胞上的TCID_(50)为10^(-5.4),对乙醚、氯仿和胰蛋白酶敏感,56℃70min被灭活。对酸的耐受力较弱,在pH3.0环境下毒力明显降低。对碱有较强的耐受力,在pH9.0环境下依然稳定。不凝集绵羊、猪、兔和鸡红细胞。用MDV长春184毒株的特异性免疫荧光抗体染色(IFA),可以在感染细胞浆内见有特异性荧光。该毒株的致细胞病变作用,可被MDV长春184毒株抗血清所中和。提取病毒感染细胞的总RNA进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),结果扩增出的片段大小为400 bp。根据MDV N71的理化特性、形态学、生物学、免疫学和RT-PCR鉴定结果,确证MDV N71株为粘膜病病毒,这为深入探讨鹿MD的诊断和防制以及进行分子生物学研究奠定了基础。
- 杜锐王全凯王树志王新平任东波
- 关键词：粘膜病病毒
