高等学校科技创新工程重大项目(706039)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：赵宏坤高运东杨宏军杨少华仲跻峰更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院山东农业大学河南科技学院更多>>
- 发文基金：高等学校科技创新工程重大项目山东省农业科学院高技术自主创新基金山东省农科院重大成果培育基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 奶牛乳腺炎病原学比较研究
- 2008年
- 针对大型奶牛场和部分散养户的奶牛,对乳腺炎阳性和阴性乳汁进行细菌分离培养计数和生化鉴定,对分离到的病原菌做药物敏感性试验。试验中分离出的细菌主要是葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、棒状杆菌和酵母菌。经过生化鉴定,乳腺炎阳性乳分离得到的细菌大多数是明显溶血的,凝固酶反应呈阳性的强致病菌,细菌计数也高于乳腺炎阴性组,差异极显著;而乳腺炎阴性乳中所分离得到的细菌大多是环境中条件性致病菌,致病性不强。
- 杨宏军高运东杨少华仲跻峰赵宏坤
- 关键词：奶牛乳腺炎细菌培养
- 金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达被引量：5
- 2008年
- 【目的】克隆和表达奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白连接蛋白A(Fnbp A)的功能基因。【方法】采集奶牛急性乳腺炎乳样,分离金黄色葡萄球菌,提取其DNA作为模板,利用设计合成的特异性引物,对金黄色葡萄球菌进行FnbpA功能基因的PCR扩增。回收目的基因并连接到T载体,鉴定后进行测序,然后将FnbpA基因连接到pET-32a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导后采用SDS-PAGE分析蛋白质的表达情况。【结果】PCR产物经电泳成像,仅金黄色葡萄球菌在1.7 kb处出现特异性条带,测序发现其与GenBank公布的FnbpA序列的同源性为98%;蛋白诱导表达SDS-PAGE分析发现,在80 ku处出现特异性条带。【结论】试验成功地克隆到FnbpA基因,并在大肠杆菌中获得高效表达,蛋白量为33.4%,为进一步研究金黄色葡萄球菌粘附素基因工程疫苗奠定了基础。
- 杨宏军高运东王长法杨少华仲跻峰赵宏坤
- 关键词：金黄色葡萄球菌乳腺炎粘附素
