国家教育部博士点基金(20020610078)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 相关作者：黄颂敏赖学莉杜新唐万欣柳飞更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院第二军医大学江苏省人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Cbl相关蛋白在高糖刺激下肾小球系膜细胞中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨高糖对肾小球系膜细胞(GMC)Cbl相关蛋白(CAP)mRNA表达的影响,以及糖尿病肾病发生发展中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的下游信号分子CAP的重要作用。方法:系膜细胞株分为8组,正常对照组,生理浓度胰岛素组(10-9mol/L),低浓度胰岛素组(10-8mol/L),高浓度胰岛素组(10-6mol/L),高糖组(30mmol/L),甘露醇组,高糖加高浓度胰岛素组,高糖加生理浓度胰岛素组。采用RT-PCR法,观察高糖刺激与不同浓度胰岛素作用下,系膜细胞中CAP mRNA的表达及其变化。结果:正常对照组系膜细胞中CAP mRNA有一定表达。高糖组CAP mRNA表达明显下降;低浓度胰岛素组和高浓度胰岛素组分别为对照组的1.91倍和2.15倍(P<0.01);高糖加入高浓度胰岛素组CAP mRNA表达为单纯高糖组的2.14倍(P<0.01)。结论:(1)正常系膜细胞中CAP mRNA有一定表达;(2)高糖可抑制CAP mRNA表达;(3)胰岛素能部分拮抗高糖导致系膜细胞中CAP mRNA表达的下调作用;(4)CAP在糖尿病肾病发生发展过程中是其重要因子之一。
- 杜新黄颂敏赖学莉
- 关键词：葡萄糖转运蛋白4系膜细胞糖尿病肾病
- 葡萄糖转运蛋白4及其下游信号分子在高糖刺激下肾小球系膜细胞中的作用
- 2009年
- 目的探讨高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞（GMC）葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）和Cbl相关蛋白（CAP）的mRNA表达及细胞骨架纤维状肌动蛋白F—actin的影响，探讨糖尿病肾病发生发展中GLUT4及其下游分子F—actin和CAP的重要作用。方法将细胞分为8组：正常对照组、生理浓度胰岛素（10。mol／L）组、低浓度胰岛素（10^-8 mol／L）组、高浓度胰岛素（10^-6mol／L）组、高糖（30mmol／L）组、甘露醇组（25mmol／L甘露醇＋5mmol／L葡萄糖）、高糖加高浓度胰岛素组、高糖加生理浓度胰岛素组。采用RT—PCR法和免疫组化法，观察不同情况下GMC中GLUT4蛋白和mRNA以及CAPmRNA的表达及其变化。Rhodamine—phalloidin染色和激光共聚焦显微镜观察F—actin形态及荧光强度。结果正常对照组GMC中GLUT4蛋白和mRNA以及CAPmRNA有一定表达，而生理浓度胰岛素组与正常对照组差异均无统计学意义。高糖组GLUT4蛋白（P〈0．01）和mRNA（P〈0．05）以及CAPmRNA（P〈0．01）表达均显著减少，F—actin解聚增加（P〈0．01）；而甘露醇组以上各指标与对照组差异均无统计学意义。低浓度胰岛素组和高浓度胰岛素组GLUT4mRNA表达分别为生理浓度胰岛素组的2．06倍和2．66倍，GLUT4蛋白表达分别为对照组的1．93倍和2．83倍，CAPmRNA表达分别为对照组的1．91倍和2．15倍，F—actin荧光强度分别为对照组的1．296倍及1．224倍，均呈一定的浓度依赖性。高糖加高浓度胰岛素组GLUT4mRNA表达为高糖组的2．15倍（P〈0．05），GLUT4蛋白表达为高糖组的2．08倍（P〈0．01），CAPmRNA表达为高糖组的2．14倍（P〈0．01），F—actin荧光强度为高糖组的1．838倍（P〈0．01）。GLUT4mRNA与CAPmRNA呈正相关（r=0．905，P=0．002）；GLUT4与F—actin呈正相关（r=0．929，P=0．001）。结论（1）正常GMC中GLUT4mRNA与蛋白、CAPmRNA有一定表达。（2）高糖可抑制GLUT4的蛋白�
- 杜新黄颂敏唐万欣柳飞赖学莉
- 关键词：单糖转运蛋白质类肾小球系膜细胞胰岛素纤维状肌动蛋白
- P_(21)在肾小球系膜细胞的表达变化及意义
- 2006年
- 目的:探讨高糖、胰岛素对肾小球系膜细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂P21表达的影响及其与系膜细胞肥大的关系。方法:将培养的大鼠1097系膜细胞株分为8组:正常对照组,高糖组,甘露醇组,不同浓度胰岛素组,高糖加不同浓度胰岛素组。用RT-PCR法检测各组系膜细胞P21mRNA表达。流式细胞仪定量检测各组系膜细胞前向角度散射光(FSC)大小。结果:正常对照组系膜细胞中P21mRNA有一定表达。高糖组P21mRNA表达明显增加为正常对照组的3.89倍(P<0.01);FSC为正常对照组的1.42倍(P<0.01)。不同浓度胰岛素组系膜细胞P21mRNA表达及FSC大小随胰岛素浓度增加而增加,但无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)P21mRNA在正常肾小球系膜细胞有一定表达。(2)高糖刺激可使系膜细胞P21mRNA表达上调,且与渗透压无明显关系。(3)P21mRNA表达上调可导致系膜细胞肥大,在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。
- 柳飞唐万欣黄颂敏
- 关键词：糖尿病肾病细胞肥大
- 高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4表达及易位的影响被引量：5
- 2007年
- 目的 观察高糖和胰岛素对体外培养的肾小球系膜细胞（GMC）葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的影响以及胰岛素引起GLUT4易位的情况，探讨GLUT4在糖尿病肾病（DN）发生发展机制中的作用。方法 将体外培养的鼠1097系膜细胞分为8组：对照组、生理浓度胰岛素组（10^-9mol／L）、低浓度胰岛素组（10^-8mol／L）、高浓度胰岛素组（10^-6mol／L）、高糖组（30mmol／L）、甘露醇组、高糖加高浓度胰岛素组和高糖加生理浓度胰岛素组。RT-PCR检测GLUT4mRNA表达；共聚焦显微镜观察各组GLUT4蛋白表达，以及胰岛素引起GMCGLUT4易位的剂量．时间效应。结果 胰岛素可增加GLUT4的表达，高糖使GLUT4表达明显下降。胰岛素可引起系膜细胞GLUT4易位。低浓度胰岛素组、高浓度胰岛素组细胞GLUT4均在加入胰岛素15rain后达到最大易位，且以后的45min胞膜上的GLUT4的荧光强度与15min时差异元统计学意义（P〉0．05）。结论 不同浓度的胰岛素均可刺激系膜细胞GLUT4易位，且过程是相似的。高糖明显抑制GLUT4在系膜细胞上的表达。胰岛素可部分拮抗高糖导致的GLUT4下调，且呈剂量依赖性。
- 黄颂敏赖学莉杜新
- 关键词：葡萄糖转运蛋白4胰岛素高糖血症易位
