国家现代甘薯产业化技术体系建设项目(nycytx-16-B-7) 作品数:8 被引量:87 H指数:5 相关作者: 张德胜 张振臣 乔奇 秦艳红 田雨婷 更多>> 相关机构: 河南省农业科学院 学研究院 河南农业大学 更多>> 发文基金: 国家现代甘薯产业化技术体系建设项目 河南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
甘薯羽状斑驳病毒外壳蛋白基因的分子变异 被引量:6 2012年 应用单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)技术结合核苷酸序列测定的方法,对我国甘薯主产区11个省份的甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因的分子变异情况进行了研究。结果表明,SPFMV CP基因的RT-PCR产物表现了较丰富的图谱类型,50个分离物共产生9种主要的SSCP带型;对显示不同带型的20个样品的CP基因进行了序列测定和进化树分析,CP基因核苷酸序列一致性为77.2%~99.9%。说明这些样品的SPFMV的CP基因存在较大的分子变异,可划分为EA、RC、O和C 4个株系。 王晓华 张振臣 乔奇 秦艳红 张德胜 田雨婷关键词:甘薯羽状斑驳病毒 外壳蛋白基因 分子变异 甘薯和巴西牵牛18S rRNA基因的克隆和序列分析 被引量:1 2011年 【研究目的】为甘薯和侵染甘薯病毒的基因表达研究提供内参基因序列信息。【方法】分别以‘商薯19’、‘北京553’2个甘薯品种和巴西牵牛的基因组DNA为模板,利用PCR方法克隆甘薯和巴西牵牛18S rRNA基因序列。【结果】测序结果表明,获得的供试2甘薯品种和巴西牵牛的18S rRNA基因序列长度均为1630bp;序列比对结果表明,甘薯和巴西牵牛与裂叶牵牛、烟草等双子叶植物的18S rRNA基因相应序列的一致性均达98%以上,与单子叶植物Lilium superbum的18S rRNA基因序列也有较高的一致性。【结论】从2甘薯品种和巴西牵牛的基因组中克隆出了18S rRNA基因部分序列,研究结果不仅为利用18S rRNA基因作为内参基因分析甘薯和侵染甘薯病毒基因的表达研究提供了序列依据,而且可为甘薯和巴西牵牛的分子系统学研究提供序列参考。 王振东 王晓华 乔奇 张德胜 秦艳红 田雨婷 张振臣关键词:甘薯 RRNA基因 克隆 甘薯遗传转化及其抗病毒转基因研究进展 被引量:2 2011年 甘薯病毒病是影响甘薯生产的重要因素之一。传统的抗病育种由于缺乏抗源材料和育种周期长等原因不能满足生产需要,转基因技术的发展为抗病毒甘薯的培育提供了新的途径。鉴此,综述了近年来甘薯遗传转化及其抗病毒基因工程方面的研究进展。 张磊 张磊 邢国珍 郑文明关键词:甘薯 抗病毒基因工程 中国甘薯病毒种类的血清学和分子检测 被引量:55 2012年 2009~2010年,从我国18个省(市)采集了176份表现病毒病症状的甘薯样品。利用血清学、PCR和核苷酸序列测定的方法,对上述样品中的病毒种类进行了鉴定。血清学检测结果表明,供试样品中甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)的阳性率最高,达56.3%,其次为甘薯G病毒(SPVG)和甘薯类花椰菜花叶病毒(SPCaLV),阳性率分别为34.1%和33.5%。PCR和核苷酸序列测定结果表明,我国甘薯上至少存在SPFMV、SPVG、甘薯潜隐病毒(SPLV)、甘薯褪绿斑病毒(SPCFV)、甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、甘薯脉花叶病毒(SPVMV)和甘薯卷叶病毒(SPLCV)8种病毒。此外,供试样品中没有检测出甘薯轻斑驳病毒(SPMMV),是否存在甘薯轻斑点病毒(SPMSV)、SPCaLV和C-6病毒尚不能确定。 乔奇 张振臣 张德胜 秦艳红 田雨婷 王永江关键词:甘薯 病毒检测 ELISA 甘薯脉花叶病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备 被引量:3 2011年 根据已报道的甘薯脉花叶病毒(Sweet potato vein mosaic virus,SPVMV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RT—PCR方法克隆了SPVMV河南分离物(SPVMV—HN)基因组3’端1.8kb的基因片段,包括部分NIb基因序列和完整的CP基因及3’端非编码区序列(3’UTR)。序列分析表明,SPVMV—HN的CP基因由996个核苷酸组成(GenBank登录号为FJ687211),编码332个氨基酸残基。与已发表的SPVMV其他分离物相比,其推导的氨基酸序列一致性为95.2%~98.5%,与SPVMV广东分离物的氨基酸序列一致性为97.9%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,SDS—PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPVMV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP—ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测。利用SPVMV的抗血清,对采自全国14个省(市)的田间甘薯样品以及嫁接的巴西牵牛样品进行了检测,结果表明,SPVMV在我国甘薯上普遍存在。 张业辉 秦艳红 乔奇 张德胜 田雨婷 王永江 张振臣关键词:外壳蛋白基因 原核表达 抗血清 不同药剂防治甘薯茎线虫病的田间效果 被引量:12 2011年 从病株率、病薯率、病情指数3个方面评价了8种供试药剂对甘薯茎线虫病的田间防治效果,其中,5%神农丹颗粒剂45 kg/hm2、10%福气多颗粒剂30 kg/hm2、22%吡虫.辛硫磷乳油9 L/hm2、35%辛硫磷微胶囊悬浮剂15 L/hm2和40%毒死蜱乳油15 L/hm2的防治效果较好,株防效为77.96%-89.83%,薯防效为85.30%-97.91%,病情指数防效为83.06%-98.94%。综合防治效果、药剂毒性、施用成本等因素,建议生产上施用22%吡虫.辛硫磷乳油9 L/hm2和35%辛硫磷微胶囊15 L/hm2防治甘薯茎线虫病。 刘顺通 段爱菊 张自启 刘长营关键词:药剂 甘薯 茎线虫病 不同甘薯品种对甘薯茎线虫病的抗性鉴定 被引量:8 2011年 采取田间自然诱发鉴定和室内贮藏鉴定相结合的方法,鉴定了21个甘薯品种对甘薯茎线虫病的抗性。结果表明:高抗品种有4个:华北52-45、烟252、徐州781和176;抗病品种有北京553等7个;中抗品种有梅营7号等6个;感病品种和高感品种各2个。收获后室内贮藏30 d,各品种的病情指数均有所增加。 段爱菊 刘顺通 张自启 刘长营 张德胜关键词:甘薯品种 茎线虫 病情指数 抗性 3种甘薯病毒多重RT-PCR检测方法的建立 被引量:15 2010年 A multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (multiplex RT-PCR) method was developed for the simultaneous detection and discrimination of three sweet potato potyviruses: Sweet potato feathery mottle virus(SPFMV),Sweet potato latent virus (SPLV) and Sweet potato virus G (SPVG). Three compatible sets of primers specific for each virus were designed in conserved regions of the coat protein (CP) gene for use in multiplex RT-PCR assay, and producing three distinct fragments 300, 420, and 600 bp, indicating the presence of SPFMV, SPLV and SPVG respectively. The individual RT-PCR assays and the multiplex assay were optimized for highest sensitivity and specificity. This study fulfilled the need for rapid and specific sweet potato potyvirus diagnostic tool and that also had the potential for investigating the epidemiology of sweet viral diseases. 张业辉 张振臣 蒋士君 秦艳红 张德胜 乔奇 王永江关键词:甘薯羽状斑驳病毒 潜隐病毒 马铃薯Y病毒属 混合侵染