广东省重大科技专项(2012A080202009) 作品数:5 被引量:16 H指数:4 相关作者: 李常青 陈斯泰 赵敏 赵昉 李小翚 更多>> 相关机构: 广州中医药大学 广州泽力医药科技有限公司 生物技术有限公司 更多>> 发文基金: 广东省重大科技专项 广东省科技计划工业攻关项目 广州市重大科技专项计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
HPLC测定扶正柔肝颗粒柯里拉京和丹酚酸B的含量 2015年 目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方扶正柔肝颗粒中柯里拉京和丹酚酸B含量的方法。方法:色谱柱:InertsiL?ODS-SP(5μm,4.6×250mm);流动相:乙腈-0.2%磷酸(梯度洗脱);检测波长为210nm;流速为1.0mL/min;柱温35℃;进样量5μL。结果:柯里拉京在0.061~0.510μg的范围内线性关系良好(r=0.9997),平均加样回收率为101.41%(RSD=1.68%,n=6);丹酚酸B在0.504~4.203μg的范围内(r=0.9999)线性关系良好,平均加样回收率为103.30%(RSD=1.11%,n=6)。结论:本法灵敏、快速、准确,可用于复方扶正柔肝颗粒的质量控制。 宋力飞 刘常青 李曼莎 阳建军 李常青关键词:柯里拉京 丹酚酸B HPLC 扶正柔肝颗粒HHLSE制备过程控制的指纹图谱研究 被引量:4 2016年 目的运用指纹图谱方法,评价扶正柔肝颗粒在采用高效高压差低温连续式提取分离浓缩技术(HHLSE)制备过程中所产生的中间体,建立起过程控制模式。方法通过对生产过程中产生的复方药粉、醇提浓缩液、水提浓缩液、混合浓缩液、真空浓缩液、喷雾干燥粉分别进行指纹图谱的测试,考察生产工艺的稳定性和可重复性。结果 10批扶正柔肝颗粒的复方药粉、5种中间体各自指纹图谱的相似度均在0.95以上。结论采用指纹图谱方法对扶正柔肝颗粒HHLSE制备工艺过程进行监控,方法准确、有效,可用于扶正柔肝颗粒HHLSE制备过程的质量控制和产品的质量评价。 周绍春 刘常青 李曼莎 段海霞 宋力飞关键词:指纹图谱 叶下珠复方Ⅱ号对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用 被引量:7 2016年 目的观察叶下珠复方Ⅱ号对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法72只昆明小鼠(KM小鼠)随机分为正常组、模型组、叶下珠复方Ⅱ号高剂量组(6.04 g/kg)、中剂量组(3.02 g/kg)、低剂量组(0.604 g/kg)和联苯双酯组(150 mg/kg),给药7 d后,除正常组外,其余各组小鼠均按10 m L/kg腹腔注射0.12%CCl4大豆油溶液,16 h后取小鼠血清,检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;取肝组织,观察肝组织病理改变,并检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原性谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平变化。结果与模型组比较,叶下珠复方Ⅱ号高、中剂量组可显著降低急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性(P<0.01或P<0.05),显著减轻肝组织病理改变,并提高肝组织SOD活性(P<0.01或P<0.05),降低肝组织MDA水平(P<0.01)。结论叶下珠复方Ⅱ号对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤有较好的保护作用,其作用机制与抗脂质过氧化损伤有关。 陈斯泰 何素 李常青关键词:四氯化碳 急性肝损伤 叶下珠复方Ⅱ号对肝星状细胞增殖和miR-122/KLF6表达的影响 被引量:4 2015年 目的观察叶下珠复方Ⅱ号对肝星状细胞(HSC-T6)增殖及miR-122/KLF6表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法体外培养HSC-T6细胞,分为空白对照组、叶下珠复方Ⅱ号高剂量组(120 g/L)和低剂量组(60 g/L),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对HSC-T6细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR法检测药物处理后HSC-T6细胞miR-122、KLF6和TGF-β1 m RNA表达的改变,Western blot法检测KLF6蛋白表达的变化。结果叶下珠复方Ⅱ号处理HSC-T6细胞后,叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组对HSC-T6细胞增殖均有明显的抑制作用。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组HSC-T6细胞的miR-122表达增加,尤以高剂量组作用显著,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。叶下珠复方Ⅱ号高、低剂量组KLF6 m RNA和蛋白表达均显著减少,TGF-β1 m RNA的表达明显抑制,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),并呈明显的剂量-效应关系。结论叶下珠复方Ⅱ号能显著抑制HSC-T6细胞增殖,其作用机制与提高miR-122的表达、抑制其靶基因KLF6的m RNA和蛋白质表达有关。 罗来育 李常青 李小翬 杨锦江 王小龙 陈斯泰关键词:肝纤维化 叶下珠复方Ⅱ号对肝星状细胞凋亡和miR-16/Bcl-2表达的影响 被引量:6 2013年 【目的】观察叶下珠复方Ⅱ号体外对肝星状细胞(HSC-T6)凋亡和miR-16/Bcl-2表达的影响,进一步探讨其抗肝纤维化的作用机制。【方法】体外培养HSC-T6细胞,分为空白对照组,叶下珠复方Ⅱ号高剂量组(3.6 g/L)、中剂量组(1.8 g/L)和低剂量组(0.9 g/L),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,实时荧光定量PCR法检测药物处理后HSC-T6细胞miR-16和Bcl-2 mRNA表达的改变,Western Blot法测定Bcl-2蛋白的表达变化。【结果】叶下珠复方Ⅱ号处理HSC-T6细胞后,高、中、低各剂量组对HSC-T6细胞增殖均有明显的抑制作用,随着叶下珠复方Ⅱ号浓度的增加,细胞的凋亡率也逐渐增加;叶下珠复方Ⅱ号各处理组miR-16的表达显著增加,呈现明显的剂量—效应关系,且Bcl-2 mRNA和蛋白质表达显著减少,与空白对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。【结论】叶下珠复方Ⅱ号能显著抑制HSC-T6细胞增殖和诱导其凋亡,其作用机制与提高miR-16的表达,抑制其靶基因Bcl-2的表达有关。 夏曦 赵敏 李常青 李小翚 赵昉关键词:中药疗法 细胞凋亡 基因表达调控 细胞培养