国家自然科学基金(81102483)
- 作品数：8 被引量：27H指数：4
- 相关作者：郑永唐杨柳萌罗荣华王睿睿陈欢更多>>
- 相关机构：中国科学院昆明医科大学中国科学院大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项云南省应用基础研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 分子对接技术筛选抗HIV-1逆转录酶活性化合物被引量：7
- 2015年
- 【目的】通过分子模拟和活性测试筛选非核苷类抗人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)逆转录酶活性化合物。【方法】采用Tripos SYBYL软件Surflex-Dock分子对接模块,模拟SPECS数据库中22 000个化合物与HIV-1逆转录酶活性口袋的结合,根据模拟结果分析化合物与HIV-1逆转录酶晶体结构的相互作用模式。对于打分较高与结合模式较优的化合物,采用体外抗HIV-1活性测试方法检测其生物活性。【结果】虚拟筛选结果显示化合物1-(4-fluorophenyl)-3-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]thiourea对接构象与晶体结构中内嵌配体非常接近,它与HIV-1逆转录酶结合口袋重要残基Lys101形成氢键、与保守残基Trp229和芳香残基Tyr181分别形成π-π堆积作用。体外抗HIV-1活性测试结果显示其抑制HIV-1IIIB病毒感染的C8166淋巴细胞合胞体形成50%时的浓度即EC50值为5.45μg/m L。【结论】分子对接技术能缩小活性化合物筛选范围,并可用于预测化合物与蛋白质的相互作用模式,本研究利用该技术筛选出活性化合物。
- 冀树伸黄新安罗荣华杨柳萌郑永唐符林春
- 关键词：分子对接HIV-1逆转录酶
- 基于逆转录酶结构和耐药突变的新型非核苷类逆转录酶抑制剂研究进展
- 2018年
- 为了应对艾滋病治疗过程中严重的耐药性问题,开发新型抗耐药性非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)势在必行。本文通过分析2015~2018年文献报道的新型抗耐药性NNRTI的代表性实例,探讨了抗耐药性NNRTI与逆转录酶的结合模式,并讨论了药物化学策略在发现和优化新型抗HIV-1药物中的作用。本文指出基于逆转录酶晶体结构信息的药物化学策略是快速发现具有新结构的NNRTI的有效途径,前期构效关系研究能为后续的药物开发提供一定的支持。
- 唐成润唐成润杨柳萌
- 关键词：艾滋病毒逆转录酶非核苷类逆转录酶抑制剂
- 氯喹联合用药体外抗HIV-1作用研究被引量：5
- 2018年
- 本文评价氯喹与已上市抗HIV药物联合使用的体外抗HIV-1作用和抑制TLR7激动剂引起的浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells,p DC)活化及Ⅰ型干扰素分泌上调的作用。采用MTT法检测氯喹对C8166、TZM-bl、PBMC细胞的毒性。采用荧光素酶活性检测方法、ELISA检测p24抗原测定氯喹分别与雷特格韦(rategrivir,RAL)、恩夫韦肽(enfuvirtide,T-20)、茚地那韦(indinavir,IDV)和依法韦仑(efavirenz,EFV)联合用药抗HIV-1_(ⅢB)、HIV-1_(KM018)活性。流式细胞术检测氯喹分别与RAL、IDV联合使用对细胞p DC活化水平的影响。定量PCR检测氯喹分别与RAL、IDV联合使用对细胞内IFN-α、IFN-βm RNA水平上调的影响。结果表明,氯喹对C8166、TZM-bl和PBMC细胞表现出较低的细胞毒性,半数细胞毒浓度(median cytotoxic concentration,CC_(50))分别为85.02±0.28、73.67±5.10和91.84±4.10μmol·L^(-1)。氯喹分别与RAL、T-20、IDV、EFV联合用药呈中度协同、强协同、相加、中度拮抗效果。氯喹分别与RAL、IDV的联合使用相比于氯喹单药使用对p DC活化水平和IFN-α、IFN-βm RNA表达水平的下调作用无统计学差异。本研究发现氯喹与不同类型的已上市抗HIV药物联合使用呈现不同程度的协同、拮抗或相加抗HIV-1作用。氯喹分别与RAL、IDV联合使用不影响氯喹对TLR7激动剂引起的p DC活化和Ⅰ型干扰素分泌上调的抑制作用。本研究希望能够给氯喹应用于抗HIV治疗提供参考,促进氯喹更广泛地应用于临床研究和治疗中。
- 向思颖陈敏陈欢罗荣华罗荣华杨柳萌郑永唐
- 关键词：氯喹人类免疫缺陷病毒-1联合用药
- HIV-1整合酶3′端加工抑制剂筛选方法的建立与优化被引量：1
- 2014年
- 目的建立与优化HIV-1整合酶3'端加工抑制剂筛选方法。方法利用荧光共振能量转移原理建立筛选方法,用DNaseⅠ切割底物DNA确定底物检测波长,在该检测波长下,对缓冲液成分、底物浓度、酶浓度、金属离子浓度等影响整合酶活性的条件进行优化,并用阳性药物雷特格韦和杨梅黄素进行方法验证。结果检测波长为495 nm/525 nm,使用缓冲液1、底物浓度500 nmol·L-1,整合酶浓度1μmol·L-1,镁离子浓度20 mmol·L-1时整合酶3'端加工活性最强。在此反应条件下雷特格韦和杨梅黄素能有效地抑制整合酶3'端加工活性。用所建立的方法筛选到2个有较强抑制整合酶3'端加工活性的抑制剂。结论该文成功建立并优化了HIV-1整合酶3'端加工抑制剂筛选方法。
- 陆翠林张旋詹金彪杨柳萌郑永唐
- 关键词：HIV-1整合酶荧光共振能量转移抑制剂
- 二甲苯酮类非核苷类逆转录酶抑制剂的体外抗HIV-1活性被引量：1
- 2016年
- 本文评价了5个二甲苯酮类非核苷类逆转录酶抑制剂(DY1203、DY1204、DY1119、DY1208和DY1209)的体外抗HIV-1药效学。采用MTT法检测了5个化合物对人T淋巴细胞系(C8166、MT-4、H9)和PBMC的毒性作用;p24抗原ELISA方法测定了化合物对1株HIV-1实验株、4株耐药株和3株临床株的抗病毒活性;HIV逆转录酶试剂盒检测了化合物体外对HIV-1重组逆转录酶的抑制活性。结果表明,5个化合物中,DY1203和DY1204对不同细胞的毒性均很小(CC50>200μg·m L-1)。DY1119、DY1208和DY1209具有显著的抗病毒活性,对实验株HIV-1IIIB、NRTI耐药株HIV-174V、PI耐药株HIV-1RF/V82F/184V、FI耐药株HIV-1NL4-3 gp41(36G)N42S和临床分离株(HIV-1KM018、HIV-1TC-1、HIV-1Wan)均有很强的抑制作用,而NNRTI耐药株HIV-1A17对其有不同程度耐药。5个化合物对HIV-1重组逆转录酶有不同程度的抑制效应,其中DY1208有显著的抗HIV-1活性和较高的治疗指数,安全性高,有望成为新的抗HIV-1先导化合物。
- 王萍张高红向思颖杨柳萌唐成润马晓东郑永唐
- 关键词：非核苷类逆转录酶抑制剂HIV-1耐药株抗病毒活性
- 普洱茶提取物的抗HIV活性(英文)被引量：7
- 2012年
- 目的:研究普洱熟茶(发酵)和普洱绿茶(未发酵)这 2 种常见普洱茶的抗 HIV 作用。方法:采用 MTT 比色法检测普洱茶提取物对 C8166, MT4 和 PBMC 细胞的毒性作用; 细胞病变法检测化合物对 HIV-1 急性感染的抑制活性。采用细胞病变法和 HIV-1 p24 抗原 ELISA 方法检测普洱茶提取物的抗 HIV 活性作用; 结果:所有普洱茶提取物都具有较低的细胞毒性 CC50为 120.63 524.95 μg·mL 1。所有普洱茶提取物均能抑制 HIV 诱导细胞形成合胞体其 EC50为 11.13 67.49 μg·mL 1。普洱茶水提物的抑制作用比醇提物的抑制作用要好, 并且普洱熟茶的抑制作用好于普洱生茶, 尤其是 YYP-31, 其 SI 值为 42.40。YYP-31 对HIV-RF和 HIV-2CBL-20也有很好的抑制作用, 其 EC50分别为 30.82 和 39.79 μg·mL 1。YYP-31 还能很好地抑制 HIV-1IIIB急性感染C8166 细胞和 HIV-1KM018感染PBMC细胞p24抗原的产生, 其EC50分别为14.95和 74.63 μg·mL 1。YYP-31能阻止正常细胞C8166与 HIV-1 慢性感染细胞 H9/HIV-1IIIB之间的融合, EC50为 234.27 μg·mL 1。提取物 YYP-31 与 AZT 联合用药具有显著的协同抗HIV 作用,但是对 HIV 逆转录没有抑制作用。结论:普洱茶提取物具有很好的抗 HIV 的活性作用, 可以作为一种 HIV 辅助治疗的产品或保健品用于 HIV 患者的治疗过程中。
- 黄宁杨柳萌李晓莉郑昌博王睿睿杨永平郑永唐
- 关键词：茶树普洱茶抗HIV药物
- 基于假病毒筛选抗病毒药物的研究进展被引量：4
- 2015年
- 假病毒是一种整合其他病毒囊膜糖蛋白所形成的具有外源性病毒囊膜、而自身基因组仍保持着源病毒基因组特性的一类病毒。假病毒因丧失了病毒的自我复制能力,具有安全性高等优点,已被广泛用于包括HIV、H5N1、HCV等病毒的研究。本文介绍了基于假病毒技术进行研究的优势及局限性,还通过总结大量研究成果阐明了利用假病毒技术进行药物筛选的可行性与有效性。假病毒药物筛选平台作为一种新型、安全、可靠的实验手段,将为抗病毒药物的研究做出更多的贡献。
- 王萍张高红郑永唐
- 关键词：假病毒抗病毒活性药物筛选抑制剂
- 核桃壳提取物体外抗HIV-1活性研究被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨核桃壳提取物体外对艾滋病毒(HIV^(-1))的抑制活性和作用机制。方法:采用MTT比色法检验核桃壳提取物对细胞的毒性;合胞体抑制、p24抑制和MT-4细胞保护作用检测提取物对HIV^(-1)的抑制作用。通过HIV^(-1)复制中间产物检测、融合阻断和分时给药实验判断提取物的作用机制。结果:核桃壳提取物0504对HIV^(-1)有较好的抑制作用,对HIV^(-1)ⅢB在C8166细胞中复制的选择指数TI值大于1 213.59。HIV^(-1)复制中间产物检测实验显示0504处理组ss DNA和late-RT的拷贝数明显低于PC组,提示作用于病毒复制的早期;融合阻断实验显示0504对慢性H9/HIV^(-1)ⅢB与C8166细胞融合有较好的抑制作用,EC50值为20.79μg/m L,表明0504作用于病毒进入阶段;分时给药实验显示提取物对已进入细胞的HIV^(-1)没有抑制作用,再次证明了0504作用于HIV^(-1)进入细胞。结论:核桃壳提取物0504对HIV^(-1)有较好的抑制作用,其作用机制为抑制HIV^(-1)进入细胞。
- 崔雪青刘熙陈欢彭芳罗荣华杨柳萌刘光明王睿睿郑永唐
- 关键词：艾滋病毒
