国家自然科学基金(31270984)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
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- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学遵义医学院附属医院更多>>
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- 利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案治疗高龄非霍奇金淋巴瘤患者的疗效被引量：9
- 2014年
- 目的评价利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案治疗高龄非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者的疗效。方法将2010年10月至2013年10月入院的76例老年NHL患者随机分为两组;CHOP方案组36例,利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案组40例。采用回顾分析方法,比较两组患者6个疗程后的临床疗效并记录其不良反应。结果 CHOP组患者的完全缓解率为25.00%,总有效率为55.56%;利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案组分别为45.00%,77.50%,两组总有效率差异具有统计学意义(χ2=4.133,P<0.05);两组治疗方案毒副反应发生率差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗前的IgA、lgG、IgM水平均无统计学差异(P>0.05),治疗后水平均较治疗前显著下降(P<0.05),且两组间无统计学差异(P>0.05)。结论利妥昔单克隆抗体联合CHOP方案治疗高龄NHL临床疗效较好且不良反应未增加,但还应实时监测患者的免疫功能。
- 谌海兰
- 关键词：利妥昔单克隆抗体CHOP方案非霍奇金淋巴瘤
- 氨基端前B型钠尿肽单克隆抗体的制备及其鉴定
- 2017年
- 目的通过经典单克隆抗体制备技术制备氨基端前B型钠尿肽(NT-pro BNP)单克隆抗体,将单克隆抗体进行特异性和亲和力鉴定,并用于免疫学检测试剂盒的开发。方法用带His-Trx-标签蛋白的NT-pro BNP免疫Balb/C小鼠制备单克隆抗体。使用PEG1500化学融合法将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。用不带标签的NT-pro BNP对获取的杂交瘤细胞进行反复多次克隆筛选,将稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株经腹腔注射Balb/C小鼠诱导产生腹水,经蛋白G亲和纯化后获得NT-pro BNP单克隆抗体并对其进行亲和力和特异性进行鉴定。结果成功进行细胞融合并获得4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,抗体分泌亚型为Ig G1,可特异性识别NT-pro BNP。经腹腔体内诱生法和蛋白G亲和纯化,获得高质量NT-pro BNP单克隆抗体,经ELISA检测抗体效价在1∶10~5以上。结论通过传统经典单克隆抗体制备技术成功制备NT-pro BNP单克隆抗体,为NT-pro BNP检测试剂盒的研发奠定了基础。
- 谌海兰陈特毕小云
- 关键词：单克隆抗体心力衰竭
- 即时检验床旁血糖仪与生物化学静脉血糖仪对比分析被引量：6
- 2016年
- 目的分析监测血糖的即时检验(POCT)床旁血糖仪与检验科大型生物化学分析仪(简称生化分析仪)检测结果,以监测临床正在使用的POCT床旁血糖仪是否符合国家卫生和计划生育委员会(简称卫计委)相关使用要求。方法选择重庆医科大学附属第一医院POCT床旁血糖仪(罗氏卓越和强生稳步)和生化分析血糖仪(罗氏Modular-DDPP模块检测仪),对静脉血分别检测全血血糖浓度和血浆血糖浓度,每台血糖分析仪检测50份标本。对比检测标本的偏倚是否符合卫计委的要求,当血糖浓度<4.2 mmol/L时,至少95%的检测结果误差应在±0.83 mmol/L的范围内;当血糖浓度≥4.2 mmol/L时,至少95%的检测结果误差应在±20%范围内。结果笔者所在医院36个科室151台POCT床旁血糖仪检测结果与生化分析仪检测结果对比,有2个指标超过比对要求的最高限,不达标,应进行更换。POCT床旁血糖仪达标率为98.67%。结论血糖仪在使用过程中存在损耗,应根据卫计委相关要求定期与生化分析仪检测结果进行对比,对于对比不达标的血糖仪应进行校准或更换,并应与生化分析仪检测结果进行对比,对比合格后方可用于临床患者自我监测。
- 谌海兰毕小云
- 关键词：血糖仪生化分析仪血糖检测
- 肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1激发小鼠巨噬细胞应答的免疫作用机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1对巨噬细胞引起的天然免疫应答及机制。方法体外诱导培养小鼠骨髓来源的巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM),SPY1作用巨噬细胞6 h和24 h后,分别用RT-PCR和ELISA检测细胞因子的表达情况;SPY1作用于野生小鼠以及TLR2、TLR4缺陷小鼠的BMDM 24 h后,ELISA检测TNF-α和IL-6的表达;Western blot检测各信号分子的磷酸化水平;MAPK、PI3K和NF-κB抑制剂处理后,检测细胞因子TNF-α和IL-6的表达变化。结果 SPY1作用巨噬细胞后可引起强烈的免疫应答,此过程不依赖于TLR2和TLR4。MAPK、PI3K和NF-κB信号通路参与调控SPY1引起的巨噬细胞天然免疫应答。结论肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1通过MAPK、PI3K和NF-κB通路产生巨噬细胞天然免疫应答,这一过程不依赖于TLR2和TLR4。
- 高松吴盈盈曾令斌崔晶晶孙潇雨胥文春
- 关键词：巨噬细胞固有免疫应答
- 肺炎链球菌热休克蛋白40通过p38MAPK和JNK通路诱导小鼠巨噬细胞免疫应答被引量：8
- 2015年
- 目的探讨肺炎链球菌热休克蛋白40(HSP40)引起小鼠巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达、纯化重组HSP40蛋白(r HSP40),去除其中的脂多糖(LPS)。r HSP40处理C57BL/6野生小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)后,反转录PCR检测BMDM中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-23p19、IL-12p40、IL-12p35、IL-10的mRNA水平,ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-12p40水平;r HSP40刺激后,ELISA检测野生型、Toll样受体2(TLR2)和TLR4缺陷的BMDM中TNF-α和IL-6的表达水平;丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂预处理BMDM后,ELISA检测其对r HSP40诱导TNF-α和IL-6水平的影响;Western blot法检测p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平。结果获得纯度90%以上的r HSP40;r HSP40可显著增强p38MAPK、JNK的磷酸化水平和TNF-α、IL-6的表达;p38MAPK和JNK抑制剂可显著抑制TNF-α和IL-6的表达;与野生BMDM相比较,TLR4缺陷的BMDM表达TNF-α和IL-6显著降低。结论 HSP40诱导小鼠巨噬细胞产生免疫应答受JNK及p38MAPK信号通路调控,并且此过程依赖TLR4。
- 吴盈盈高松马峰崔晶晶姚华孙潇雨王继超胥文春
- 关键词：肺炎链球菌巨噬细胞C-JUN氨基末端激酶
- 一种具有CaPi矿化外壳的新型肺炎链球菌减毒活疫苗的构建
- 2016年
- 为构建肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1矿化菌,并进一步探究其自身稳定性、热稳定性等生物学特性的改变,本研究以肺炎链球菌D39基因组DNA为模板设计合成构建突变体lyt A基因所需引物,采用插入失活的方法构建SPY1-△lyt A突变株,并以缺陷菌的生长特性以及PCR的方法进行鉴定;将SPY1-△lyt A突变株于富钙环境中培养,用不同浓度的磷酸盐进行滴定,使其形成磷酸钙矿化壳,通过扫描电镜以及直接荧光反应来检测疫苗菌株矿化情况;并将矿化菌株与未矿化菌株同时置于37℃不同时间后通过比较其存活率来评价矿化菌的热稳定性。PCR结果以及细菌长时间不溶解的生长特性表明成功构建了SPY1-△lyt A突变株;扫描电镜以及直接荧光反应结果显示细菌表面形成Ca Pi矿化外壳,并且SPY1-△lyt A-Ca Pi矿化菌具有较好的热稳定性。本研究为肺炎链球菌活菌疫苗的进一步研发奠定了基础。
- 崔晶晶吴凯峰孙潇雨王继超张心愿邱喻兰莫云钧胥文春
- 关键词：肺炎链球菌减毒活疫苗生物矿化热稳定性
- GEM 3000与雅培I-STAT血气分析仪结果比对分析被引量：2
- 2016年
- 目的确保相同标本在不同的血气分析仪上的检测结果具有可比性,对医院使用GEM Premier3000血气分析仪(简称GEM 3000)与雅培I-STAT血气分析仪(简称雅培I-STAT)进行比较,保证使用于临床的血气分析仪能正确反映病人的血气情况。方法 22台血气分析仪,其中雅培I-STAT 11台,GEM 3000 11台。采用相同的血气质控物对两款血气分析仪进行检测,以美国CLIA’88为标准对参加比对的仪器进行评价,并与检验科参加过全国卫生和计划生育委员会室间质评的血气分析仪进行比对,计算两种型号血气分析仪之间的偏倚。结果发现胸心外科1台GEM 3000的氧分压在2号和3号标本中检测结果偏高(分别是113 mm Hg、172 mm Hg),超过了允许的最大范围,比对不符合要求。对不符合比对要求的血气分析仪进行校准并再次比对,合格后给予临床使用。结论临床检测中尽量使用相同型号的血气分析仪,若型号不同,应定期进行比对,保证结果具有可比性。
- 谌海兰陈特徐华建毕小云
- 关键词：血气分析仪GEM
- 截短ALT1蛋白的获得及其多克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的原核表达、纯化截短ALT1蛋白,制备ALT1多克隆抗体。方法利用pCold TF载体原核表达系统,IPTG诱导,表达经生物信息学分析含有两个编码ALT1抗原表位的ALT1 N端1～115个氨基酸序列的基因片段,依次经镍(Ni)离子亲和柱纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、二次镍离子亲和柱纯化和分子筛柱层析得到不带标签的截短ALT1纯蛋白,用纯蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果经测序证实,成功构建了截短pCold TF-ALT1表达载体。获得纯度达90%的不带标签的截短ALT1重组蛋白,制备了效价达4.0×106的ALT1多克隆抗体,经Western blot鉴定,能特异性地识别ALT1抗原和肝细胞裂解液。结论成功获得高质量的截短ALT1无标签蛋白及其特异的多克隆抗体,为ALT1的免疫学检测试剂的研发提供了依据。
- 谌海兰王鹏黄美容胥文春
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
