国家自然科学基金(81071939)
- 作品数:3 被引量:5H指数:2
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- CD45RA^+细胞去除后的外周血干细胞产物体外抗肿瘤活性
- 2016年
- 目的:探索体外利用CD45RA磁珠分选供者外周血干细胞(PBSCs)中CD45RA^+细胞(处女T淋巴细胞)的可行性;比较去除CD45RA^+细胞后的干细胞产物(CD45RA-depleted cells)体外抗肿瘤活性有无明显减弱。方法:CD45RA磁珠分选供者外周血干细胞中的CD45RA^+细胞;流式细胞仪检测分选纯度以及分选后干细胞产物的细胞成分;分选前后干细胞产物分别与K562/Jurkat肿瘤株共培养,CCK-8检测其体外抗肿瘤活性。结果:CD45RA磁珠分选供者PBSCs中CD45RA^+细胞有效率达95.41%(88.21%~98.18%),分选后干细胞产物主要以CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞为主,CD45RA-depleted产物与PBSCs相比体外抗肿瘤效应无明显减低(P>0.05)。结论:利用CD45RA磁珠去除供者PBSCs中的处女T淋巴细胞是可行的,去除CD45RA^+细胞后的DBSCs产物体外仍具有抗肿瘤活性。
- 张璐莫文健张玉平周睿卿吴亮亮梁敏王顺清
- 关键词:外周血干细胞
- RYBP基因沉默对HL-60细胞对化疗药物敏感性的影响被引量:2
- 2015年
- 目的:用RNA干扰技术探讨白血病HL-60细胞株RYBP基因沉默后对化疗药物敏感性的影响。方法:构建针对RYBP基因的shRNA干扰质粒并建立稳定沉默RYBP基因的白血病HL-60细胞株,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测确认RYBP基因在mRNA和蛋白水平的沉默效果。然后用DNA ladder及Annexin V标记的流式细胞术检测各组HL-60细胞凋亡的情况,用CCK-8法检测各组HL-60细胞对化疗药物阿糖胞苷和柔红霉素的敏感性。结果:成功构建的RYBP shRNA慢病毒载体能够有效沉默HL-60中RYBP基因的表达。在没有加入化疗药物时RYBP shRNA组凋亡率低于空载体对照组(NC组)(P<0.05);用阿糖胞苷处理时RYBP shRNA组凋亡率和抑制率均低于NC组(P<0.05);用柔红霉素处理时RYBP shRNA组凋亡率虽然低于NC组,但是抑制率差异不明显。结论:HL-60细胞RYBP基因沉默能抑制细胞的凋亡,明显降低对阿糖胞苷的敏感性,但是对柔红霉素敏感性的改变不明显。
- 曾丽华王顺清邓晖张玉平应逸陈小卫许士林林秀梅
- 关键词:HL-60细胞SHRNA阿糖胞苷柔红霉素药物敏感性
- 组蛋白去甲基化酶赖氨酸特异性去甲基化酶1在急性白血病的表达及其临床意义被引量:3
- 2011年
- 本研究探讨组蛋白去甲基化酶赖氨酸特异性去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)在急性白血病的表达及其临床意义。采用Western blot方法半定量检测LSD1在HL-60和SHI-1白血病细胞株、不同病情(初诊、完全缓解、复发)急性白血病(acute leukemia,AL)患者及非恶性血液病对照者骨髓单个核细胞的表达水平。随访收集AL患者的临床资料,分析LSD1表达与临床预后的关系。结果表明,HL-60细胞和SHI-1细胞LSD1均呈阳性高表达,LSD1相对含量(LSD1/β-actin灰度比)分别为4.647±3.840和1.628±0.185(n=4);72例AL患者LSD1表达程度差异较大,阳性率为56.9%(41/72),LSD1相对含量平均为1.053±1.976;17例非恶性血液病对照组LSD1阳性率为0%,LSD1相对含量为0.004±0.012。LSD1阳性率在急性髓系白血病(AML)或急性淋巴细胞白血病(ALL)患者初诊组(90.4%,77.8%)与难治/复发组(100%,100%)均高于完全缓解(CR)组(4.7%,0%)(p=0.000);LSD1相对含量在AML与ALL患者初诊组之间(1.177±1.646,1.275±1.845)、难治/复发组之间(2.050±2.470,4.107±3.676)或CR组之间(0.029±0.033,0.019±0.024)差异无统计学意义(p>0.05);AL患者LSD1阳性率在初诊组(84.6%)与难治/复发组(100%)均高于CR组(3.8%),LSD1相对含量在初诊组(1.274±1.760)、难治/复发组(3.359±3.319)及CR组(0.027±0.031)均高于对照组(p<0.01),其中难治/复发组高于初诊组与CR组(p<0.01),初诊组高于CR组(p<0.01)。结论:LSD1过高表达与AL难治/复发有关,其表达水平能反映AL患者的病情,可成为对AL预后有提示作用的生物学标志。
- 林秀梅钟雯婷王春丽王顺清
- 关键词:急性白血病组蛋白去甲基化酶