国家自然科学基金(30830054)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
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- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院第四军医大学西京脑科医院更多>>
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- 腺病毒介导NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:研究抑癌候选基因NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响。方法:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测NDRG2基因的mRNA和蛋白表达水平,甲基噻唑基四唑法(MTT法)绘制细胞生长曲线,流式细胞仪(FCM)分别分析细胞周期和细胞凋亡。结果:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109后,NDRG2的mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪检测显示,与对照组相比,感染后48小时Eca-109细胞G2期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显增多(P<0.01);转染后的Eca-109细胞中凋亡细胞明显增多,感染48h后达16.0%。结论:过表达NDRG2可明显抑制人食管鳞癌细胞Eca-109的增殖并诱导细胞凋亡。
- 江宁刘文超刘学武王江刘新平药立波
- 关键词：NDRG2食管鳞癌凋亡腺病毒
- 人BRCA1干涉慢病毒载体的构建与验证
- 2012年
- 目的:设计合成干涉BRCA1表达的小干扰RNA,并克隆入pLKO.1慢病毒表达载体,为研究基因BRCA1在乳腺癌细胞增殖中的作用提供基础。方法:根据人BRCA1的基因序列,设计合成三对BRCA1干涉片段(序列前后加入酶切位点EcoRI和AgeI),再利用酶切连接反应将其插入到慢病毒载体pLKO.1中,经过酶切鉴定及测序正确后,将重组质粒转染入MCF-7细胞,48h后提取蛋白质和RNA,通过蛋白印迹验证BRCA1的蛋白水平的表达情况,Realtime PCR验证BRCA1的RNA水平的表达变化。结果:重组质粒经酶切鉴定和测序比对完全正确,转染乳腺癌细胞48h后可见BRCA1表达的明显下调。结论:成功构建BRCA1干涉的慢病毒载体,并且转染MCF-7细胞证实其能够下调BRCA1的表达,为后续研究BRCA1在乳腺癌细胞的功能奠定了基础。
- 张永平赵虎韦伊芳张健药立波
- 关键词：BRCA1慢病毒载体重组质粒
- NDRG2基因对前列腺癌细胞株PC-3M侵袭转移能力的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 观察NDRG2基因对人前列腺癌细胞株PC-3M侵袭转移能力的影响.方法 以携带人NDRG2基因的腺病毒感染体外培养的PC-3M细胞株,采用Western blot及明胶酶谱实验检测NDRG2、MMP-2、MMP-9蛋白表达情况及相关酶活性的变化.平板克隆实验、细胞生长实验检测NDRG2对PC-3M增殖能力的影响.Transwell实验检测NDRG2对PC-3M细胞体外侵袭能力的影响.结果 Ad-NDRG2感染后,PC-3M细胞中NDRG2表达明显增加,而MMP-2和MMP-9表达水平及活性均降低.噻唑蓝（MTT）比色法（抑制率24 h为16.2%、48 h为24.4%、72 h为43.7%）及平板克隆实验（3组分别为56.3%、55.2%和36.7%）显示NDRG2对PC-3M细胞的生长有明显抑制作用.Transwell显示对照组及Ad-LacZ组穿入下室面的细胞数明显多于Ad-NDRG2组（3组分别为93.0、94.8和50.4）.结论 NDRG2对人前列腺癌PC-3M细胞株侵袭能力有明显抑制作用,提示NDRG2可能在前列腺癌的侵袭及转移中发挥重要作用.
- 高磊刘学武王禾于垂恭袁建林武国军
- 关键词：前列腺癌NDRG2基因
- 多西紫杉醇和腺病毒介导NDRG2基因对人前列腺癌细胞株DU145的协同作用
- 2012年
- 目的观察携带NDRG2基因的腺病毒（Ad．NDRG2）与多西紫杉醇（DT）联合给药对人前列腺癌细胞株DUl45的抗肿瘤增效作用。方法以Ad．NDRG2感染体外培养的DUl45细胞，采用Western—blot方法检测CyclinDl、CyclinE、NDRG2蛋白表达水平的变化。流式细胞仪检测和MTT试验分析Ad-NDRG2给药后DUl45细胞对DT敏感性的变化。建立裸鼠移植瘤模型，观察Ad—NDRG2与DT联合给药的体内抗肿瘤作用。结果Ad-NDRG2感染后，DUl45细胞中NDRG2表达明显增加，而CyclinDl和CyclinE表达水平降低。Ad—NDRG2协同10。mo]／L以上浓度DT作用48h，可增强对DUl45细胞的生长抑制作用（抑制率：41．8％，t=4．18，P〈0．01），增强诱导凋亡作用（凋亡率=32．4％，）（2=11．66，P〈0．05），并且使DT所致的G2／M期细胞比例由50．2％变为23．6％，部分逆转了其G2／M期阻滞。动物实验表明：DT组、Ad．NDRG2组、Ad．NDRG2与DT联合给药组其移植瘤的抑瘤率分别为30．7％、28．2％和55．8％，两药相互作用指数（CDI）为0．89。结论腺病毒介导NDRG2基因感染细胞后，增加了人前列腺癌DUl45细胞在体内及体外对多西紫杉醇的敏感性。
- 高磊于垂恭李瑞晓张璟袁建林武国军王禾
- 关键词：前列腺肿瘤前列腺肿瘤肿瘤药理学细胞周期蛋白质类药理学
- 腺病毒介导的NDRG2基因对前列腺癌细胞株DU145的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨腺病毒介导的N-myc下游调节基因2(NDRG2)基因对前列腺癌细胞株DU145增殖抑制及诱导其凋亡的作用。方法:以携带人NDRG2基因的腺病毒载体转染体外培养的前列腺癌细胞株DU145。采用Western blot检测目的基因的表达,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对DU145细胞增殖能力的影响。流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡的情况;光镜观察细胞形态学的改变。结果:DU145细胞经腺病毒转染后Western blot检测有NDRG2蛋白(40kD)特异表达。MTT比色及平板克隆实验结果显示NDRG2对DU145细胞生长有明显抑制作用(P<0.05)。流式细胞检测结果显示Ad-NDRG2组凋亡率明显高于对照组及Ad-LacZ组,差异有显著性(P<0.05)。与对照组及Ad-LacZ组比较,光镜下观察可见Ad-NDRG2转染的细胞生长状态明显变差,细胞变圆,边缘模糊。结论:通过腺病毒载体使细胞表达NDRG2基因,可以明显抑制DU145细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡。
- 高磊刘学武刘新平王禾于垂恭赵毅武国军
- 关键词：前列腺肿瘤NDRG2基因腺病毒科凋亡
