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黑龙江省科技计划项目(PC10S02)
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
相关作者:
单丽玲
陈淑慧
曲连东
姜骞
刘家森
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相关机构:
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
黑龙江八一农垦大学
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发文基金:
黑龙江省科技计划项目
国家自然科学基金
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相关领域:
农业科学
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出血症病毒
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RHDV
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VP60基因
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中国农业科学...
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刘家森
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2014
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表达兔出血症病毒VP60蛋白重组牛疱疹病毒1型的构建及免疫原性分析
被引量:2
2014年
为制备表达兔出血症病毒(RHDV)VP60蛋白的重组病毒疫苗,本研究将RHDV VP60基因插入到CMV启动子下,构建牛疱疹病毒1型(BoHV-1)gE基因缺失转移载体,利用磷酸钙介导转染法将该转移载体与gE基因缺失的亲本病毒基因组DNA共转染牛肺细胞,制备了表达RHDV VP60基因的重组BoHV-1(rBoHV-1/gE-/VP60)。通过PCR、western blot及间接免疫荧光鉴定表明VP60基因在rBoHV-1/gE-/VP60中获得表达。并且体内试验表明重组病毒能够有效诱导小鼠产生RHDV特异性抗体。本研究构建了表达RHDV VP60基因的rBoHV-1/gE-/VP60,为研制预防兔出血症的BoHV-1活载体疫苗奠定了基础。
黄艳秋
原冬伟
刘行波
刘家森
陈淑慧
单丽玲
郭东春
姜骞
崔玉东
薛飞
曲连东
关键词:
兔出血症病毒
VP60基因
ELISA验证兔铁蛋白重链与RHDV VP60相互作用
2013年
为验证本实验室前期实验中初步鉴定的兔铁蛋白重链(FTH)与兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(VP60)具有相互作用关系,本研究采用RT-PCR技术从兔肝脏扩增编码FTH基因,并将其克隆至pET-32a(+)中转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达。重组FTH蛋白(rFTH)经IPTG诱导获得表达,采用Ni-NTA Agarose纯化rFTH。利用纯化的VP60作为ELISA包被抗原检测FTH与VP60的相互作用。结果表明,ELISA检测的OD490nm值与FTH蛋白量呈正相关。本研究进一步验证了FTH与VP60具有相互作用关系。
孙宏勇
刘家森
王泽祥
陈淑慧
单丽玲
郭冬春
姜骞
林欢
曲连东
关键词:
兔出血症病毒
VP60
ELISA
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