重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ111108)
- 作品数：3 被引量：13H指数：3
- 相关作者：胡廷章吴应梅陈再刚杨俊年黄小云更多>>
- 相关机构：重庆三峡学院更多>>
- 发文基金：重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 水稻OsLEA19a基因的克隆、表达及生物信息学分析被引量：6
- 2011年
- 半定量RT-PCR分析表明,水稻胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA19a在水稻幼苗中的表达受干旱和高盐的诱导,说明OsLEA19a可能在水稻抗旱和抗盐中发挥作用。利用RT-PCR方法成功从水稻中克隆了OsLEA19a的cDNA。生物信息学分析表明,OsLEA19a基因编码一个由200个氨基酸残基组成的蛋白,蛋白分子量为20.48 kDa,等电点为5.89。OsLEA19a蛋白的5～48位氨基酸残基形成LEA_4结构域。OsLEA19a蛋白的二级结构有3个α-螺旋构象区域,没有伸展的β-片层构象,为亲水蛋白。进化树分析表明,OsLEA19a与单子叶植物第3组LEA蛋白的亲缘关系较近,而与双子叶植物的较远,OsLEA19a与单子叶植物第3组LEA蛋白的氨基酸一致性为48%～57%。
- 胡廷章吴应梅陈再刚黄小云
- 关键词：水稻克隆生物信息学
- 水稻OsLEA19a基因在大肠杆菌中的表达和抗逆性分析被引量：4
- 2012年
- 根据胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA19a的读码框序列设计引物,PCR扩增目的基因后,利用基因重组技术成功构建原核表达载体pET30a-OsLEA19a,并将重组质粒转化到E.coli BL21中。优化诱导OsLEA19a表达的条件,使目的蛋白可在E.coli BL21中高效表达。OsLEA19a融合蛋白的SDS-PAGE电泳分析表明,诱导蛋白表达的最适条件是37℃、4 h,融合蛋白的大小大约为30 kDa。抗逆性分析表明,OsLEA19a的表达能增强大肠杆菌对高盐、高渗透压、高温和低温等非生物胁迫的抗性。
- 胡廷章杨俊年吴应梅陈再刚
- 关键词：蛋白表达大肠杆菌抗逆性
- 水稻OsLEA2基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2012年
- 利用RT-PCR技术从水稻中克隆到OsLEA2的cDNA。序列分析表明,OsLEA2基因的读码框为312 bp,编码一个由103个氨基酸残基组成的蛋白,富含Ala、Lys、Glu、His、Val和Arg,不含Asn、Cys、Phe和Trp。OsLEA2蛋白的1～73位氨基酸残基形成LEA_1结构域。OsLEA2蛋白的二级结构有3个α-螺旋构象区域,没有伸展的β-片层构象,为亲水蛋白。进化树分析表明OsLEA2属于第4组LEA蛋白的4A亚组,OsLEA2与4A亚组LEA蛋白的氨基酸一致性为29%～45%。实时定量RT-PCR分析表明表明OsLEA2基因在水稻的不同生长发育时期的不同组织中都能表达,在完熟期的根和穗中,OsLEA2基因的表达明显升高。
- 胡廷章吴应梅杨俊年吴晓丽
- 关键词：水稻基因克隆基因表达
