国家自然科学基金(31270923)
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 相关作者：金丽华江元清周洋刘强张宏更多>>
- 相关机构：东北林业大学西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 拟南芥WRKY61转录因子的转录活性与互作蛋白分析被引量：12
- 2018年
- 该研究采用双荧光素酶报告系统、酵母双杂交和双分子荧光互补实验,对拟南芥AtWRKY61的转录活性及与AtWRKY61转录因子的互作蛋白进行了分析,并用qRT-PCR方法分析AtWRKY61对多种非生物逆境的响应特征,为进一步揭示AtWRKY61的功能与分子调控机制奠定基础。绿色荧光蛋白介导的亚细胞定位分析显示,AtWRKY61定位于细胞核内;基于原生质体的双荧光素酶报告系统和酵母实验发现,AtWRKY61具有转录抑制活性。qRT-PCR分析表明,AtWRKY61对多种非生物逆境的处理具有明显的响应,可能是在多条信号通路中发挥作用。酵母双杂交与双分子荧光互补分析表明,AtWRKY61与自身以及同组的AtWRKY9和AtWRKY72存在互作关系,暗示可能通过形成WRKY复合物来行使特定的转录抑制功能。
- 范晓江郭小华牛芳芳杨博江元清
- 关键词：拟南芥转录活性
- 果蝇再生蛋白(rgn)多克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的制备具有高度特异性的抗果蝇再生蛋白(rgn)的多克隆抗体。方法利用PCR技术从果蝇W1118c DNA中获得rgn基因片段,构建重组质粒;将其转入JM109(DE3)菌株中诱导rgn融合蛋白表达,再利用Ni-NTA superflow层析柱法将其纯化;经Western blot法检测后,利用制备的抗原免疫SD大鼠,从血清中获得高纯度的抗rgn多克隆抗体,利用Western blot法和免疫组织化学染色法对抗体特异性进行鉴定。结果构建的pRSETA-rgn表达载体成功表达6×His-rgn蛋白,融合蛋白在大肠杆菌中大量表达并纯化后,作为抗原免疫SD大鼠,获得了抗rgn的多克隆抗体;免疫组织化学染色技术证实rgn定位在果蝇三龄幼虫血细胞的细胞质。结论成功获得了特异性较高的大鼠抗rgn多克隆抗体。
- 李哲柳宗琳金丽华
- 关键词：基因克隆原核表达多克隆抗体
- 瓜蒌、红花、川芎和菊花提取物对氧化应激诱导的果蝇肠道免疫的影响被引量：9
- 2014年
- 目的研究中药提取物对氧化应激诱导的果蝇肠道免疫功能的影响。方法通过喂食氧化应激物(百草枯和H2O2)后统计果蝇生存率的方法,从50种中药中筛选出具有缓解氧化应激损伤作用的中药。通过分析果蝇寿命、肠道干细胞和成肠细胞数量等,探索中药对果蝇肠道氧化应激损伤的影响。结果瓜蒌、红花、川芎和菊花具有缓解氧化应激损伤的作用,主要表现为提高百草枯和H2O2诱导后果蝇的生存率、延长果蝇寿命、缓解由老化及百草枯诱导的肠道干细胞和成肠细胞数量过多的现象。结论瓜蒌、红花、川芎和菊花提取物对百草枯和H2O2诱导的氧化应激损伤具有很好的缓解和保护作用。
- 周洋柳宗琳陈羽臣金丽华
- 关键词：瓜蒌红花川芎果蝇肠道免疫氧化应激
- 果蝇肠道干细胞增殖与分化机制及其研究进展被引量：5
- 2015年
- 动物肠道经常接触微生物而引起免疫应答,持续感染将导致胃肠疾病的发生.大量文献报道了果蝇中肠是研究肠道干细胞稳态的理想模型.本文将对果蝇肠道干细胞增殖与分化机制进行简要归纳和总结,同时对该领域的研究前景进行展望,为研究果蝇肠道内稳态提供一定的理论基础.
- 刘强金丽华
- 关键词：肠道干细胞肠道免疫
- Notch信号途径中的Su(H)和E(spl)基因对果蝇天然免疫的影响被引量：2
- 2014年
- 天然免疫系统是多细胞生物抵抗各种入侵微生物的第一道防线.Notch途径介导相邻细胞之间的相互作用,调节细胞、组织、器官的分化和发育.为了进一步探索Notch信号途径在果蝇天然免疫中的功能,利用Notch途径下游基因Su(H)和E(spl)的低表达突变体果蝇,通过体外注射病原体分析了生存率、血细胞的噬菌功能和抗菌肽的表达量以及突变体的血细胞数量.结果表明,革兰氏阴性细菌和真菌感染后果蝇E(spl)突变体的生存率、噬菌能力及抗菌肽的表达量明显降低,而且幼虫期血细胞出现异常增殖;Su(H)突变体只对真菌表现出敏感性,抗菌肽的表达量降低,但是对真菌的噬菌能力正常.此结果表明,Notch途径不仅影响个体的生长发育,而且在果蝇天然免疫中也起重要的调节作用.
- 汪晓纯金丽华
- 关键词：天然免疫黑腹果蝇NOTCH信号途径
- 果蝇Rab蛋白在天然免疫中的作用被引量：2
- 2015年
- Rab蛋白是小GTP结合蛋白超家族(small GTP-binding proteins)中最大的亚家族,在不同细胞膜区室之间的囊泡转运过程中起重要的调控作用。脊椎动物包含70多种Rab蛋白,到目前在果蝇中发现了33种Rab,并且与脊椎动物的Rab蛋白具有较高的同源性。果蝇Rab蛋白广泛分布于各细胞器中并发挥重要的生物学功能。由于果蝇的免疫系统相对简单,并且其天然免疫调节机制与哺乳动物比较相似,因此果蝇成为研究天然免疫的理想模型。本文主要介绍了Rab家族蛋白在果蝇天然免疫中的作用。
- 于世超金丽华
- 关键词：果蝇RAB蛋白囊泡运输天然免疫
- 紫草提取物对果蝇肠道损伤的保护作用被引量：3
- 2016年
- 目的探究紫草Arnebia euchroma水提取物对果蝇肠道损伤的保护作用与保护机制。方法利用十二烷基硫酸钠(SDS)与百草枯诱导野生型黑腹果蝇肠道损伤,分析喂食正常培养基与含紫草培养基的果蝇生存率。通过免疫染色法检测果蝇肠道前体细胞数量、处于分裂期的干细胞数量、肠道上皮细胞内活性氧自由基水平与死亡细胞的数量,并用Axioskop 2 plus型荧光显微镜观察肠道形态学变化。结果喂食含10%紫草水提取物可以明显提高果蝇的生存率、显著抑制肠道损伤引起的前体细胞与肠道干细胞的过度增殖、降低肠道上皮细胞的死亡,结果具有统计学意义(P<0.01)。此外,10%紫草提取物还可以降低肠道上皮细胞内活性氧的水平,保护和维持肠道形态。结论紫草水提取物对SDS与百草枯诱导的果蝇肠道损伤具有保护作用。
- 丁秋然张宏洛方舟金丽华
- 关键词：紫草水提取物黑腹果蝇百草枯肠道损伤肠道上皮细胞
