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国家自然科学基金(30500610)

作品数:5 被引量:17H指数:3
相关作者:史艳侠姜文奇韩文杰彭柔君张景航更多>>
相关机构:中山大学新乡医学院商丘市第一人民医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省卫生厅资助课题广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇细胞
  • 2篇FOXP3
  • 1篇单抗
  • 1篇调节性
  • 1篇体外
  • 1篇体外扩增
  • 1篇利妥昔
  • 1篇利妥昔单抗
  • 1篇慢病毒
  • 1篇慢病毒载体
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫磁珠
  • 1篇节性
  • 1篇抗瘤
  • 1篇抗瘤作用
  • 1篇扩增
  • 1篇基因
  • 1篇分选
  • 1篇NK细胞
  • 1篇REGULA...

机构

  • 4篇中山大学
  • 2篇新乡医学院
  • 1篇商丘市第一人...

作者

  • 4篇史艳侠
  • 3篇韩文杰
  • 3篇姜文奇
  • 2篇张景航
  • 2篇彭柔君
  • 1篇夏建川
  • 1篇张晓实
  • 1篇黄慧强
  • 1篇徐瑞华
  • 1篇管忠震
  • 1篇李永强
  • 1篇何伟

传媒

  • 2篇中山大学学报...
  • 1篇癌症
  • 1篇Chines...
  • 1篇中国临床实用...

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2008
  • 3篇2007
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
Regularity of hypoxia inducible factor 1 alpha expression in acute myocardial ischaemia in rats被引量:2
2007年
Acute myocardial ischaemia is a common acute .disease and a common cause of sudden death.However, it is difficult to diagnose in patients who died within 6 hours after the onset of myocardial ischaemia. The occurrence of sudden cardiac death often has pathological basis of primary heart diseases, which may lead to a series of changes in metabolism and gene expression.1 Recent research found that hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1α) is a sensitive marker of hypoxia; its gene expression is upregulated within several minutes after acute myocardial ischaemia, followed by the upregulation of its protein and its expression will remain high if the inducement continues. Its expression in nonhypoxic cardiac muscle is very low. This characteristic may be used to differentiate hypoxic factors from nonhypoxic factors, and help to judge the cause of death. This study explored the expression of HIF-1α in hypoxic cardiac muscle by establishing an acute myocardial ischaemia model in mice, and observed its dynamic changes to provide reference for analysing causes of death within 48 hours after death.
LI Zhi-gangWANG Jiang-fengCHENG Jian-dingLIU Yan-weiXING Hao-weiWANG YongCHEN Yu-chuan
关键词:ASPHYXIA
CD4^+CD25^+调节性T细胞的体外扩增被引量:6
2008年
【目的】探讨有效的体外培养扩增CD4+CD25+Treg的方法。【方法】收集健康志愿者外周血5例,免疫磁珠法分选出CD4+CD25+Treg。将实验分为3组,第1组在CD4+CD25+Treg中加入100nmol/Lrapamycin(1μg/mL)和包被了CD3/CD28单抗的磁珠培养3周,第8天开始加入1000U/mL的IL-2,第2组培养条件除不加rapamycin外其余与第1组相同,第3组培养细胞为CD4+CD25-T细胞,培养条件同第1组。培养第7、14、21天收集细胞计数,第21天收集细胞行流式细胞术三标法检测CD4、CD25、FOXP3的表达。MTT法检测体外扩增的CD4+CD25+Treg对自体和异体的CD4+T细胞增殖的抑制作用。【结果】三组细胞均有明显的扩增。加rapamycin培养的CD4+CD25+Treg细胞的扩增率比不加rapamycin扩增倍数低,但细胞的纯度明显增加。CD4+CD25-T细胞组在培养第1周扩增迅速,从第2周开始增殖减慢,其中CD4+CD25+Treg细胞的比例较培养前无明显的差别。三组至第3周时扩增倍数分别为89±21、338±78、216±55(F=484.655,P<0.0001),细胞的纯度分别为84.32%±4.62%、34.04%±5.78%、0.68%±0.39%(F=24.660,P<0.0001)。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体和异体的CD4+T细胞增殖均有明显的抑制作用,并且随着效靶比浓度的降低而降低。在CD4+T/Treg比例为8:1、4:1、2:1、1:1时对自体CD4+T细胞的抑制率分别为9.65%、16.43%、28.75%、55.34%,对异体CD4+T细胞的抑制率分别为6.43%、14.72%、26.47%、50.25%,而且在各浓度梯度其抑制作用在自体和异体之间均无明显的差异。【结论】我们采用rapamycin+CD3/CD28单抗标记的磁珠+IL-2在体外成功扩增了CD4+CD25+Treg,其扩增的倍数为89.4±20.53,具有免疫抑制功能,有望进一步应用于临床。
史艳侠何伟彭柔君姜文奇
关键词:CD4^+CD25^+TREG体外扩增RAPAMYCIN
CD4+CD25+Treg细胞的分选、表型鉴定及Foxp3表达鉴定
2010年
目的为验证从C57BL/6小鼠脾脏中分离出高纯度CD4+CD25+Treg细胞及证实CD4+CD25+Treg细胞中Foxp3基因的表达。方法使用免疫磁珠分选出CD4+CD25+Treg细胞,流式细胞仪检测纯度;使用TRIZOL抽提Foxp3基因mRNA,使用RT—PCR方法逆转录出Foxp3基因的cDNA。结果从C57BL/6小鼠脾脏中分离出了纯度达到90%CD4+CD25+Treg。进一步应用RT—PCR技术克隆出Foxp3的cDNA,通过凝胶电泳证实了克隆出了Foxp3的cDNA。结论使用免疫磁珠方法能够分离出C57BL/6小鼠CD4+CD25+Treg细胞,并进行了Foxp3基因表达的鉴定。
韩文杰史艳侠
关键词:免疫磁珠CD4+CD25+TREG细胞FOXP3基因
使用FLAG标签肽及慢病毒载体共同筛选小鼠foxp3基因RNA干扰的有效靶点被引量:6
2007年
【目的】筛选高效的foxp3RNA干扰的靶点用于阻断CD4+CD25+Treg细胞的免疫抑制功能。【方法】使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列,化学合成法合成4条shRNA序列,构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体;构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点。【结果】成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒;成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞;在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3%和95.6%的有效靶点。【结论】使用FLAG融合蛋白和慢病毒载体能够筛选出Foxp3基因的RNAi最佳靶点。
史艳侠韩文杰彭柔君张景航黄慧强姜文奇
关键词:FOXP3
B-NHL患者NK细胞中CD16ζ表达及利妥昔单抗与LAK细胞的联合抗瘤作用被引量:4
2007年
背景与目的:自然杀伤细胞(nature killer cell,NK)是抗体依赖细胞介导的细胞毒作用的主要效应细胞,肿瘤患者普遍存在NK细胞活化功能的缺陷可能会影响单克隆抗体的治疗效果。因此如能逆转NK细胞的CD16ζ链信号转导的功能缺陷,并与单克隆抗体联合免疫治疗,可能会产生协同抗肿瘤作用。本研究的目的是了解B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-cellnon-HodgkinI's lymphoma,B-NHL)患者是否存在NK细胞的活化障碍,体外白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)是否能完全逆转其活化障碍,并观察利妥昔单抗与LAK细胞联合对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:使用密度梯度离心方法分别分离69例B-NHL患者和30例健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),将两种PBMC在体外与1000U/mlIL-12共同培养制备LAK细胞,流式细胞仪检测PBMC和LAK细胞中CD16ζ链的阳性率和平均荧光强度。流式细胞仪检测Raji细胞表面CD20的表达;AnnexinⅤ/PI方法检测利妥昔单抗单药对Raji细胞的促凋亡作用,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验进行杀伤活性的检测。结果:在B-NHL组和健康对照组,CD56+细胞表达CD16ζ链的阳性率为(63.3±16.4)%、(97.8±3.1)%(P<0.001),CD16ζ链MFI值分别为1.3±1.3和3.6±1.7(P<0.001)。在体外1000U/ml的IL-2共培养的LAK细胞中,两组CD16ζ链的阳性率分别为(99.3±4.1)%和(99.7±3.9)%,其MFI值分别为29.2±12.5和31.4±13.8,均无显著性差异(P=0.15和P=0.44)。40μg/ml利妥昔单抗可以完全结合细胞表面CD20抗原,在24h时才开始出现对Raji细胞的明显的凋亡作用。利妥昔单抗与LAK细胞联合对Raji细胞的杀伤率在不同的浓度组均明显高于不加利妥昔单抗组(P<0.05)。LAK细胞与Herceptin(40μg/ml)联合的杀伤率与不加Herceptin组相比,在各效靶比浓度梯度均无明显提高(P>0.05)。LAK细胞与利妥昔单抗联合对Jurket细胞的杀伤率在各效靶比浓度梯度均与不加利妥昔单抗�
史艳侠张晓实夏建川李永强徐瑞华韩文杰张景航管忠震姜文奇
关键词:利妥昔单抗LAK细胞
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