国家科技支撑计划(2012BAD02B05-10)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 相关作者:郭晓杨煜马伟清杨晓慧李广存更多>>
- 相关机构:中国农业科学院蔬菜花卉研究所山东省农业科学院蔬菜花卉研究所云南师范大学更多>>
- 发文基金:山东省农业良种工程项目国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- PyTPS基因无标记表达载体的构建及转化马铃薯的初步研究
- 利用马铃薯抗晚疫病R3b基因的启动子区域代替pCAMBIA2300-PyTPs的NPTⅡ和35S启动子区域,构建了无标记的植物表达载体,转化农杆菌AGLl,以马铃薯栽培品种鲁引1号的薯块为外植体进行遗传转化,获得再生植株...
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- 关键词:鲁引1号
- 文献传递
- 马铃薯蛋白激酶基因StPki的遗传转化及表达分析被引量:1
- 2014年
- 以高抗青枯病二倍体马铃薯基因型ED13为材料,克隆了蛋白激酶基因StPki。以StPki基因特异区段为靶标,成功构建了该基因的RNA干扰植物表达载体pCHF1-StPki。利用重组农杆菌株LBA4404(pCHF1-StPki)感染转化ED13茎段外植体,获得了抗庆大霉素的再生植株。利用CaMV35S启动子特异引物对再生植株进行PCR检测,结果表明获得了转基因植株。利用StPki基因的特异引物对转基因植株进行半定量RT-PCR分析,结果显示该基因的转录受到了抑制。马铃薯抗病基因型ED13已被成功转化,且表现出了对StPki基因的RNA干扰活性。
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- 关键词:马铃薯二倍体蛋白激酶基因
- 马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价被引量:2
- 2015年
- 以四倍体马铃薯栽培品种‘合作88’培养12~15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100~300 kb片段,连接到载体Copy ControlTM p CC1BACTM的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1 700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。
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- 关键词:马铃薯细菌人工染色体文库抗病性