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教育部重点实验室基金(2005111)
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早老素1与热休克蛋白70同源蛋白羧基端相互作用蛋白
2008年
目的探讨早老素(PS1)蛋白突变体在阿尔茨海默病(AD)发生中的作用和PS1蛋白的正常生理功能及分子伴侣蛋白热休克蛋白70同源蛋白羧基端相互作用蛋白(CHIP)的相互作用。方法采用酵母双杂交系统筛选与PS1蛋白相互作用的蛋白。在构建pGBKT7-PS1-C203诱饵质粒和含全长CHIP的pACT2-CHIP质粒表达载体后,用β-半乳糖苷酶活性测定法检测两者的相互作用;然后转染哺乳动物细胞293T,用Co-IP和Western blot法测试其相互作用。结果获得了一个能与PS1蛋白相互作用的蛋白,即CHIP,并通过β-半乳糖苷酶活性测试、免疫共沉淀进一步证实了PS1和CHIP相互作用的特异性。结论CHIP既可以和分子伴侣蛋白相互作用,本身又具有泛素连接酶活性,可调控蛋白的折叠和降解,PS1与CHIP相互作用的证实,有助于阐明机体泛素-蛋白酶体系统对PS1的调控和进一步阐明AD的病理机制。
刘润忠
易雪莲
霍淑芳
扬悦
侯海波
张云武
洪水根
许华曦
关键词:
早老素1
热休克蛋白质类
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